高中生物 专题五 课题1 DNA的粗提取和分离课件 新人教版选修1.ppt

讨论1 生物体的遗传物质是什么 讨论2 真核生物的遗传物质存在于哪里 讨论1 生物体的遗传物质是什么 讨论2 真核生物的遗传物质存在于哪里 讨论1 生物体的遗传物质是什么 讨论3 怎样才能将真核细胞内的遗传物质分离来 基本知识 一 DNA的溶解性 基本知识 2mol L浓度可使DNA溶解 0 14mol L浓度可使DNA析出 一 DNA的溶解性 二 酒精是一种常用有机溶剂 但DNA却不能溶于酒精 三 蛋白酶能水解蛋白质 但是对DNA没有影响四 大多数蛋白质不能忍受60 80 的高温 而DNA在80 以上才会变性五 洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜 去除脂质和蛋白质 但对DNA没有影响 DNA的鉴定 DNA与二苯胺 沸水浴 会染成蓝色 因此 二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂 甲基绿 绿色 一 实验材料的选取 用什么材料提取DNA 为什么 实验设计 一 实验材料的选取 鸡血细胞做实验材料 原因 1 鸡血细胞核DNA含量丰富 材料易得2 鸡血细胞极易吸水胀破3 植物细胞外有细胞壁 其他动物细胞制取DNA有时需匀浆和离心 对设备要求较高 操作繁琐 历时较长 二 破碎细胞 获取含DNA的滤液 1 若是动物细胞 如何获取DNA滤液 2 若是植物细胞 如何获取DNA滤液 二 破碎细胞 获取含DNA的滤液 1 若是动物细胞 如何获取DNA滤液 加入洗涤剂和食盐的作用分别是 如果研磨不充分 会对实验结果产生什么影响 加入洗涤剂和食盐的作用分别是 如果研磨不充分 会对实验结果产生什么影响 洗涤剂是一些离子去污剂 能溶解细胞膜 有利于DNA释放 食盐有利于DNA溶解 加入洗涤剂和食盐的作用分别是 如果研磨不充分 会对实验结果产生什么影响 洗涤剂是一些离子去污剂 能溶解细胞膜 有利于DNA释放 食盐有利于DNA溶解 会使细胞核内DNA释放不完全 提取DNA量变少 影响实验结果 导致看不到丝状沉淀物 用二苯胺鉴定不显示蓝色等 三 去除滤液中的杂质 滤液中的杂质可能有哪些细胞成分 三 去除滤液中的杂质 滤液中的杂质可能有哪些细胞成分 可能有核蛋白 多糖和RNA等杂质 三 去除滤液中的杂质 根据DNA的理化性质 可以用哪些方法来去除滤液中的杂质 三 去除滤液中的杂质 为什么反复地溶解与析出DNA 能够除去杂质 注意 两种食盐溶液的浓度和作用 三 去除滤液中的杂质 为什么反复地溶解与析出DNA 能够除去杂质 注意 两种食盐溶液的浓度和作用 用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质 用低盐浓度使DNA析出 能除去在低盐溶液中的杂质 因此 反复溶解与析出DNA 就能除去与DNA溶解度不同的多种杂质 析出 滤液 同体积95 冷却酒精白色丝状物 四 DNA的析出 DNA 二苯胺蓝色物 沸水浴 五 DNA的鉴定 如何鉴定 对比反应是为了证明什么 原理 1 以血液为实验材料 每100ml加入3g柠檬酸钠 作为抗凝剂 操作提示 2 加入酒精和用玻璃棒搅拌时 动作要轻缓 以免加剧DNA分子的断裂 导致DNA分子不能形成絮状沉淀 1 以血液为实验材料 每100ml加入3g柠檬酸钠 作为抗凝剂 操作提示 2 加入酒精和用玻璃棒搅拌时 动作要轻缓 以免加剧DNA分子的断裂 导致DNA分子不能形成絮状沉淀 3 二苯胺试剂要现配现用 否则会影响鉴定的效果 1 以血液为实验材料 每100ml加入3g柠檬酸钠 作为抗凝剂 操作提示 试验 播放视频 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解DNA 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解DNA 使2mol L的NaCl溶液稀释至0 14mol L使得DNA最大限度地析出 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解DNA 使2mol L的NaCl溶液稀释至0 14mol L使得DNA最大限度地析出 使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解DNA 使2mol L的NaCl溶液稀释至0 14mol L使得DNA最大限度地析出 使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 除去含DNA的滤液中的杂质 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解DNA 使2mol L的NaCl溶液稀释至0 14mol L使得DNA最大限度地析出 使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 除去含DNA的滤液中的杂质 提取DNA 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解DNA 使2mol L的NaCl溶液稀释至0 14mol L使得DNA最大限度地析出 使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 除去含DNA的滤液中的杂质 提取DNA A出现蓝色B无变化 讨论 讨论 此实验过程中有几次过滤 几次析出 分别在哪一步 讨论 答 整个实验共 两次过滤 两次析出 此实验过程中有几次过滤 几次析出 分别在哪一步 两次过滤 两次过滤 第一次 DNA存在于滤液里第一步第二次 DNA存在于滤液里第六步 过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关 第二次要用其滤出的黏稠物有关 所以要使用多层纱布 第一次和第三次均要用其滤液 使用的纱布为1 2层 两次过滤 第一次 DNA存在于滤液里第一步第二次 DNA存在于滤液里第六步 两次析出 两次析出 第一次 用0 14mol L的NaCI溶液 两次析出 第一次 用0 14mol L的NaCI溶液 第三步 两次析出 第一次 用0 14mol L的NaCI溶液 第三步 第二次 用冷却的95 的酒精 两次析出 第一次 用0 14mol L的NaCI溶液 第三步 第二次 用冷却的95 的酒精 第七步