临床常用免疫学检验.ppt

2020/5/20,免疫学检验,1,临床常用免疫学检验1.免疫功能检验体液免疫细胞免疫2.感染免疫学诊断试验病毒性肝炎；AIDS;STD;其它传染病；CRP3.自身免疫病的检验4.肿瘤标志物检验,2020/5/20,免疫学检验,2,检验医学与临床医学,检验医学（laboratorymedicine）是一门临床学科，它运用不断发展的自然科学和医学科学技术对患者血液、尿液和各种体液标本进行检验，并以发展检验技术、提高检验质量为重点，达到对患者疾病的诊断、病情观察和预后判断等目的。,2020/5/20,免疫学检验,3,（一）现代检验诊断特点主要有：自动化和智能化。高质量控制。微量化标本、多参数分析。流水线检测和床边检测并存。基因检测前景可喜。,2020/5/20,免疫学检验,4,（二）现代检验诊断面临挑战虽然现代检验诊断的技术正在长足发展，但也面临许多挑战。表现在：1如何选择日益增多的检验诊断项目？2如何选择有多种方法的检验诊断项目？3如何判断检验诊断新项目的应用价值？4如何合理选择检验诊断项目，降低检验诊断的费用？,2020/5/20,免疫学检验,5,二、循证检验医学新世纪检验诊断高质量发展的新天地,定义循证医学（evidence-basedmedicine，EBM）指：在对患者作出新的医疗决策的过程中，必须审慎、明确和明智地运用当前所能获得的最佳证据。这里，“最佳证据”指不仅可以否定迄今已被视为临床诊断或辅助诊断的“金标准”，并且其本身也可被未来的更准确、更有效新证据所取代。,2020/5/20,免疫学检验,6,目的主要是：不断弄清疾病的病因和发病危险因素的证据，为临床诊断和预防提供最为可靠的依据。提高疾病的早期诊断率，继而提高疾病的治愈率。改善患者的预后，提高患者的生存质量。提高临床医疗管理和决策水平。精选临床检查和治疗方案，降低医、患双方的医疗费用，使患者得到最合理的临床医疗服务。促进临床医学教学水平，培养业务精湛、医德高尚的临床医学人才。,2020/5/20,免疫学检验,7,现行传统医学是以经验医学为主，而EBM则要求选用最新的、经过临床研究机构科学评价过的、更为准确的新证据，而不采用尚未经过严格评价的、目前仍处于基础医学研究阶段的所谓“新证据”。,2020/5/20,免疫学检验,8,概念：循证检验医学（evidence-basedlaboratorymedicine，EBLM）就是按照循证医学“以当前最佳证据为基础”的原则，用临床流行病学的方法学规范检验医学的研究、设计和文献评价，其任务是向临床医师提供反映患者真实情况的检验证据。,2020/5/20,免疫学检验,9,循证医学同样也给检验医学带来了发展机遇。循证检验医学要求检验医师不仅向临床医师解释检验项目的意义，而且要帮助他们选择正确的检验项目，合理地利用实验室资源。这是因为有时候临床医师并不一定熟悉这些新的诊断指标，相反，过多的检查会提供一些不必要的信息和消耗不必要的费用，从而干扰诊断、治疗和医疗经济的合理分配。检验医师还必须使用综合分析方法对诊断指标进行评价。,2020/5/20,免疫学检验,10,一些专家认为，目前应用的实验室检查项目，在临床应用前并未给予充分的评价。Jaeshke等认为，判断一项诊断试验是否有用的最终标准是：试验是否增加了有用的诊断信息。Burke认为,如果一项试验主要用于筛检，其敏感性一定要高，但易出现假阳性。任何新的检验只有在充分评价其可靠性、准确性后才能用于临床实践。而现实是，由于制造商的热情提供试剂、临床医师和检验人员的欣然接受，许多新检验项目在未被评价充分之前，就已被积极的推向了临床应用。,2020/5/20,免疫学检验,11,第一章免疫功能检验(ImmunologicalFunctionTest)免疫功能检验分为细胞免疫功能检验和体液免疫功能检验，对于了解患者的免疫状态，以及细胞的各种功能，为深入研究和认识机体免疫系统的生理、病理改变，阐明某些疾病的发病机制和临床诊断与治疗将提供有利的信息。下面简单介绍临床常用的一些免疫检验项目。,2020/5/20,免疫学检验,12,一.IgG、IgA、IgM测定免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig)是一组具有抗体活性的蛋白。存在于机体的血液、体液、外分泌液及某些细胞的膜上，分为IgG、IgA、IgM、IgD、和IgE五类。其中IgG、IgA、IgM含量较多，一般应用单向免疫扩散法、免疫比浊法和速率散射比浊法测定。,2020/5/20,免疫学检验,13,参考值依年龄、性别、地区等因素有差异。IgG：6.9416.18g/LIgA：0.683.78g/LIgM：0.602.63g/L临床意义1.Ig含量减低：一种或多种Ig水平减少，分原发性和继发性。见于各种先天性或获得性免疫缺陷病。继发性常与免疫抑制剂应用、射线、蛋白质丢失、营养不良等有关。也可见于细胞毒药物治疗后。,2020/5/20,免疫学检验,14,2.Ig含量增高：(1)多克隆性增高，见于各种慢性感染、慢性肝病、某些自身免疫病，如SLE、RA、SS等；也见于寄生虫疾病、结节病等。(2)单克隆性增高，又称“M”蛋白，主要见于免疫增殖性疾病，如多发性骨髓瘤、重链病、轻链病，巨球蛋白血症等。,2020/5/20,免疫学检验,15,注意事项Ig水平与年龄、性别有一定的关系，Ig含量因检测方法不同而有差别，各地区参考值也不相同，在判断结果时应综合考虑。如有“M蛋白”，可进一步作血清或尿液免疫电泳，检测轻链和重链。,2020/5/20,免疫学检验,16,二.血清总IgE测定IgE为血清中含量极少的一种免疫球蛋白，与过敏性疾病和寄生虫感染有关。目前检测方法有多种，包括ELISA、间接血凝试验（indirecthemoagglutinationassayIHA）、RIA、电化学发光法（electrochemiluminescenceimmunoassay，ECLIA，）、IFA等。参考值0.1-150IU/ml,2020/5/20,免疫学检验,17,临床意义1.IgE增高：见于IgE型多发性骨髓瘤、特应性哮喘、特应性皮炎、过敏性鼻炎、寄生虫感染、热带嗜酸细胞增多症、SLE、RA及某些霉菌病等。2.IgE减低：一般无意义。可见于原发性无丙种球蛋白血症、恶性肿瘤及细胞毒药物治疗后。,2020/5/20,免疫学检验,18,注意事项年龄、性别均可影响总IgE水平。一般男性高于女性；新生儿水平低，青春期水平最高，30岁以后逐渐下降。不同种族血清总IgE水平也有差别，混血人种比白人高34倍，黑人水平更高，黄种人水平也较高。总IgE水平高不一定是过敏；过敏者总IgE也不一定高。因此，在评价总IgE结果时要考虑到以上因素。,2020/5/20,免疫学检验,19,三.特异性IgE抗体（sIgE)的检测过敏患者的血清中存在着具有变应原特异性的IgE称之为特异性IgE,如对牛奶过敏者则有针对牛奶变应原的IgE；对蒿草花粉过敏者，则有针对该花粉的IgE，该抗体只能与该变应原特异性结合。,2020/5/20,免疫学检验,20,sIgE的测定在变态反应体外诊断中占有重要地位。在呼吸疾病中，过敏性哮喘，过敏性鼻炎，职业性哮喘等患者血清中均能检出sIgE。sIgE检测方法有许多种，目前临床上常用的有ELISA，FEIA，免疫印迹等。随着sIgE测定技术的完善，此项测定已日趋商品化，开发了各种检测系统，如CAP过敏原检测系统，Master过敏原检测系统，Px过敏原检测系统等，这些测定系统包括了仪器、试剂、计算机软件处理系统。国内目前应用最多的是CAP检测系统。,2020/5/20,免疫学检验,21,1.CAP检测系统原理CAP，一个很小的塑料帽状物，其内置有多孔性、弹性和亲水性的纤维素粒，此粒多孔，吸咐了更多的变应原，加入血清，血清中的sIgE就会和变应原结合，再加入酶标抗人IgE，再加入荧光显色系统，在荧光分光光度计上测定荧光强度，计算机提供相应软件，自动计算出结果。报告sIgE含量。,2020/5/20,免疫学检验,22,适应征（1）临床怀疑过敏性疾病，支气管哮喘等；（2）不适宜作皮内试验的患者；（3）脱敏治疗的病人观察疗效。（4）抗组胺等对症治疗药物影响皮肤反应者；（5）皮试可能发生危险者；,2020/5/20,免疫学检验,23,（6）不能用于皮试的变应原，如毒素，非水溶性或高度致敏性物质；（7）食物过敏，皮试结果不可靠者。（8）皮试结果可疑者。方法RASTFEIA参考值CAP系统结果报告。一般报告sIgE含量。单位ku/L。正常人19s)可被吞噬细胞吞噬去除；中等复合物(约等于19s)存在于局部病变部位，如肾基膜、皮肤基底膜、血管内膜和关节滑膜等；只有小的复合物(19s)游离于血液、体液中，为一种可溶的CIC。CIC测定对免疫复合物病、自身免疫病以及肝病的诊断、疗效观察、预后判断均有重要意义。,2020/5/20,免疫学检验,43,检测方法有多种，如聚乙二醇沉淀法、C1q结合法等。PEG可引起蛋白沉淀，蛋白分子愈大沉淀所需PEG浓度愈小。CIC分子量较大，且抗原-抗体结合后发生构型改变，而被低浓度PEG从液相中析出，PEG还抑制CIC解离，促使CIC聚合成更大的凝聚物而被沉淀，用分光光度计在波长450nm处测定吸光度。计算出浊度值，可知CIC的存在和含量。,2020/5/20,免疫学检验,44,参考值PEG沉淀法：2.1为阳性。数值越大，表明患者体内抗体效价越高，表明患者为华支睾吸虫感染。如能测到IgM抗体，对于早期诊断有很大帮助。如有可能，可检测循环抗原以考核疗效和早期诊断。,2020/5/20,免疫学检验,67,4、肺吸虫抗体测定肺吸虫病又称并殖吸虫病，是由并殖吸虫引起的自身免疫源性疾病。临床表现多种多样，可分肺型和肺外型。诊断主要结合流行病学。临床症状及实验室检查。其中免疫学检查对临床诊断有很重要意义。人感染肺吸虫后，可出现抗肺吸虫抗体，以IgG型为主。血清中IgE水平也可升高。IgM、IgE型抗体检方法主要有ELISA、IFA、皮内试验等。参考值阴性ELISA：P/N2.1,2020/5/20,免疫学检验,68,临床意义抗体阳性表明患者为肺吸虫感染者，结合其他检查和临床表现可作出诊断。在判断结果时应该注意。其它寄生虫病，如血吸虫病、囊虫病与此有轻度的交叉反应。此外还可应用双抗体夹心ELISA法检测循环抗原用于诊断和流行病学调查。目前应用尚不广泛。,2020/5/20,免疫学检验,69,第三章自身免疫病和风湿病的免疫学检验,2020/5/20,免疫学检验,70,自身免疫病（AID)是指由于过度而持久的自身免疫反应导致组织器官损伤并引起相应器官病变或临床症状的一类疾病。风湿病是一类涉及到关节、软骨、肌肉等结缔组织的慢性疾病。,实验室检查特别是免疫学检查对AID和风湿病的诊断是及其重要的。有些检查可作为诊断指标之一；有些检查可作为病情进展和预后判断的监测指标；有些检查可作为药物疗效的考核指标之一。,2020/5/20,免疫学检验,72,随着免疫学技术的发展以及分子生物学的应用，各种自身抗体的检查越来越多地应用于临床。作为临床医生，应该熟悉这些检验的意义，并能结合临床及其他检查，客观地运用这些指标，协助诊断，了解病情，指导治疗。这里仅介绍临床常用的一些自身抗体的检测。,2020/5/20,免疫学检验,73,1.抗核抗体测定（Antinuclearantibody,ANA)ANA是抗细胞核多种成分的自身抗体，无种属及器官特异性。ANA可分为抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体及其他细胞成分抗体。这些抗体共同组成ANA谱。,2020/5/20,免疫学检验,74,抗核抗体（ANA）的检查最常用于筛查全身性风湿病和自身免疫病。ANA的检查可观察到能与细胞核内的核酸和蛋白抗原起反应的自身抗体。细胞内可能存在对多种抗原起反应的抗体。只有某种抗体的效价很高时，IFA才能加以鉴别。,2020/5/20,免疫学检验,75,homogenous（均质型）又称弥散型，相应的抗原是双链DNA和组蛋白复合物。常见于SLE，特别是肾脏受累病人。也可见于其它结缔组织病，如：风湿性关节炎，MCTD，干燥综合征，硬皮病，慢性活动性肝炎及原发性胆汁性肝硬变。Peripheral(周边型)相应的抗原为双链DNA，多见于活动性SLE病人。,2020/5/20,免疫学检验,76,Speckle(斑点型)主要是针对ENA的抗体，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。一般认为低效价的斑点型ANA不是结缔组织病特有的，实际上不代表临床异常。高效价的抗Sm抗体多与SLE有关。高效价的抗RNP自身抗体见于MCTD，但也见于SLE。抗SSA和抗SSB抗体，见于S.S，也可见于SLE。当病人有抗SSA抗体时，通常以皮肤表现和光过敏为主。，也存在于ANA阴性狼疮和新生儿狼疮。Scl-70抗体与硬皮病有关。,2020/5/20,免疫学检验,77,Nucleoli(核仁型)其靶抗原是与RNA分子相关的核蛋白。多见于硬皮病。Centromere(着丝点型)抗着丝点抗体（ACA），多见于全身性硬皮病的CREST综合征。,常用检测方法为IFA、ELISA、免疫印迹法、RIA、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法等。其中IFA是应用较广的一种方法。一般采用鼠肝切片或Hep-2细胞为底物抗原片，当加入病人血清时，病人血清中的ANA可与细胞中相应抗原成分结合。再加入荧光标记抗人IgG，在荧光显微镜下可见细胞核内亮绿色荧光。,2020/5/20,免疫学检验,79,参考值1:10或阴性临床意义NA阳性见于多种疾病，常用于风湿病及自身免疫病的诊断。SLE患者阳性率在95以上，且效价常在1：80以上。在其他风湿病如RA、系统性硬化症、皮肌炎、干燥综合征(SS)、混合结缔组织病(MCTD)等也可阳性。其他如肝病，病毒感染等也可呈低效价阳性。,注意事项在大约1%的正常人的体内可测到低效价的非特异性抗核抗体，80岁以上老人的检出率可高达50%。高效价的ANA一般与活动期SLE密切相关。采用Hep-2细胞检测ANA，可见到不同的染色模型。此外，口服避孕药的妇女也可检测到ANA。,2020/5/20,免疫学检验,81,2020/5/20,免疫学检验,82,2020/5/20,免疫学检验,83,2020/5/20,免疫学检验,84,2020/5/20,免疫学检验,85,二.可提取性核抗原（ExtractablenuclearantigenENA)抗体ENA是细胞内许多小分子的RNA和多肽组成的非组蛋白的酸性核蛋白颗粒。分布在细胞质中的称为小细胞浆核糖核蛋白(scRNPs)；分布在细胞核内的称为小细胞核核糖核蛋白(snRNPs)。目前已发现的有20余种，其中常用的抗ENA抗体有如下几种。,2020/5/20,免疫学检验,86,（一）抗Sm抗体Sm是病人Smith的缩写。Sm抗原属于SnRNP，由5个RNA和多肽组成，抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上，抗Sm抗体是酸性糖蛋白，是SLE的标记抗体。,2020/5/20,免疫学检验,87,(二)抗nRNP(u1RNP)抗体u1RNP是u1RNA和蛋白质组成的，抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上，是MLTD的重要血清标志。,2020/5/20,免疫学检验,88,（三）抗SSA抗体SS为干燥综合征的缩写。此抗体又称抗RO抗体。SSA抗原是RNA和蛋白质复合物，抗原表位在52KD多肽上，主要见于原发性干燥综合征患者及SLE。,2020/5/20,免疫学检验,89,（四）抗SSB抗体SSB抗体常伴随SSA抗体同时出现，又称抗La抗体，SSB抗原属于SnRNP，是含有RNA和50KD蛋白质的复合物。抗原表位在45KD、47KD和48KD多肽上。与SSA抗体并存对诊断SS有特异性。,2020/5/20,免疫学检验,90,（五）抗Scl-70抗体Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上，是DNA拓扑异构酶I的降解产物，抗Scl-70抗体几乎仅见于硬皮病，阳性率30%左右。,2020/5/20,免疫学检验,91,（六）抗Jo-1抗体Jo-1抗体是组氨酰tRNA合成酶，抗原表位在55KD多肽，抗Jo-1抗体是多发性肌炎和皮肌炎的标记抗体，阳性率25-40%。,2020/5/20,免疫学检验,92,（七）抗核糖体抗体核糖体在核仁合成，然后转入胞浆，抗原表位在大亚基上的38KD、16KD和15KD多肽上。抗核糖体抗体阳性主要见于SLE，阳性率20-30%。,2020/5/20,免疫学检验,93,检测以上抗体的方法主要有：对流免疫电泳法(CIE)、双相免疫扩散法，免疫印迹试验(IBT)，免疫斑点技术和ELISA法等。一般采用兔胸腺或牛胸腺提取物或细胞提取物作为抗原。近年来，应用分子重组抗原制备的试剂盒已投入市场。,2020/5/20,免疫学检验,94,参考值阴性临床意义1.抗nRNP抗体：见于3540的SLE病人，在MCTD病人中阳性率可达95100，也可见于其他风湿性疾病。2.抗Sm抗体：主要见于SLE及重叠综合征，急性期病人75为阳性。一般SLE患者3040阳性率。但Sm抗体阳性者90以上为SLE，故称之为SLE的标记抗体。,2020/5/20,免疫学检验,95,3.抗SSA和抗SSB抗体：见于4045的SS病人。抗SSA抗体也可见于25的SLE病人及其他风湿性疾病；抗SSA抗体与新生儿狼疮和先天性传导阻滞有关。抗SSA抗体也可见于病毒感染等非风湿性疾病。抗SSB抗体对原发性干燥综合征较特异，但阳性率仅27左右。,2020/5/20,免疫学检验,96,4.抗Scl-70抗体：一般仅见于系统性硬化症病人，阳性率2060。5.抗Jol-1抗体见于30的多发性肌炎病人及10的皮肌炎病人。抗Jol-1抗体与多发性肌炎病人间质性肺炎的发生率增加有关。6.抗rRNP抗体：主要见于SLE患者，阳性率20%左右，与中枢神经系统病变有关，多在疾病活动期出现。,2020/5/20,免疫学检验,97,注意事项判断试验结果时要结合临床表现作出评价，也应根据试验方法来作出解释。对流免疫电泳法和双相扩散法敏感性低，但特异性较高；免疫印迹法、斑点免疫法及ELISA方法敏感性提高，但特异性相对减少。,2020/5/20,免疫学检验,98,三.抗双链DNA抗体（Antidouble-strandedDNA，A-dsDNA，)A-dsDNA对SLE有高度特异性，是针对细胞核脱氧核糖核酸的自身抗体。临床上常用的检测方法有：Farrs法：125IDNA与待检标本中的A-dsDNA形成免疫复合物，加饱和硫酸铵使复合物沉淀，以计数器分别测定上清中游离及沉淀物中已结合的125IDNA含量，可计算出血清中AdsDNA的结合活性。,ELISA法：将小牛胸腺DNA包被在微孔板中，加入病人血清，如有A-dsDNA则结合到微孔板上，加入酶标抗人IgG，加入底物显色后经酶标仪比色可知血清中A-dsDNA抗体的量。,2020/5/20,免疫学检验,100,免疫荧光法：采用马疫锥虫或短膜虫作为基质，加入病人血清。血清中的A-dsDNA与膜上的天然DNA结合，加入荧光标记抗人IgG。马疫锥虫和短膜虫的动基体会发出绿色荧光。金标斑点法：双链DNA包被于硝酸纤维膜上，加入病人血清，加入金标记抗人IgG，如有A-dsDNA存在，会显示红色斑点。,2020/5/20,免疫学检验,101,参考值依方法不同参考值也有不同。Farrs法：0.20免疫荧光法：1：32为阳性，ATGA和ATMAELISA：正常为阴性，P/N2.1为阳性,ATGA和ATMARIA：ATGA30%；ATMA15%,2020/5/20,免疫学检验,116,临床意义主要见于桥本甲状腺炎、甲亢、甲低患者，也可见于甲状腺瘤、恶性贫血、重症肌无力、Edison病和肝脏疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的阳性率。,正常人也可检出这两种抗体，并且随着年龄的增长，阳性率增加，特别是40岁以上妇女，可达18%左右。应该注意到，有的患者ATGA阴性，但ATMA阳性，因此两种抗体同时检测可提高抗甲状腺自身抗体的检出水平。,2020/5/20,免疫学检验,118,八.HLAB27测定HLAB27抗原为人类MHCI类抗原B位点的表达产物，可分为几种亚型。HLAB27的检测方法有多种，补体依赖性微量细胞毒法(CDMA)；流式细胞仪法；玫瑰花法；ELISA法；等电聚焦法等。近来应用PCR法检测HLAB27，敏感而特异，并且可进行B27亚型的分析。,参考值非洲美洲人：34%；高家索人：68%；亚洲人：1%。,2020/5/20,免疫学检验,120,临床意义强直性脊柱炎(AS)患者HLAB27阳性率为9095%。大约42%的青年类风湿关节炎(JRA)存在HLAB27，Reiters综合征患者阳性率大约79%。此外，肠病性关节炎、银屑病性关节炎也有一定的阳性率。RA病人阳性率不高。,注意事项在评价HLAB27阳性结果时应结合临床表现综合考虑，不能单纯依靠此结果作出诊断。,2020/5/20,免疫学检验,122,其他自身抗体及检测,C反应蛋白（C-ReactiveProtein，CRP）CRP是一种急性时相蛋白，由肝细胞合成，可与肺炎球菌细胞壁C多糖发生沉淀反应，故称CRP。在各种炎症的急性期或组织创伤时，血清CRP浓度急剧升高。CRP不仅可结合多种细菌（bacteria）,真菌(fungi)及原虫（protozoal)体内的多糖物质，而且在钙离子存在下，还可以结合磷脂酰胆碱和核酸。结合后的复合体具有激活补体(complement)的作用。,常用检测方法为单相免疫扩散（singleimmunodiffusiontest）、乳胶凝集实验（latexagglutinationtest)、火箭电泳法（rocketimmunoelectrophoresis)、酶联免疫吸附法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)、速率散射比浊法（ratenephelometry）等。,2020/5/20,免疫学检验,125,参考值1：32或更高时，或双份血清效价增长4倍以上时有诊断意义。一般发病后一周效价升高，24周达高峰，6周以后逐渐下降或消失。本试验无特异性，除肺炎支原体感染外，在冷凝集素病、慢性肝病、雷诺氏病、某些病毒感染以及少数恶性病患者也可检测出冷凝集素。,2020/5/20,免疫学检验,137,注意事项正常人也有低水平的冷凝集素。本试验敏感性不高，因此，怀疑肺炎支原体感染时可检测抗肺炎支原体抗体，方法有补体结合试验；ELISA等。,2020/5/20,免疫学检验,138,六.冷球蛋白（CryoglobulinCG，)冷球蛋白是一种球蛋白，4时发生沉淀，30易聚合，37又溶解。CG分为三类：1.I型(单克隆型)：大多为IgM或IgG型，无抗补体作用。2.II型(混合型)：两种或两种以上单克隆Ig混合，以IgM+IgG最常见，也可见IgA+IgG；IgG+IgM+IgA等。有抗补体作用。3.III型(多克隆型)：没有单克隆蛋白。其检测方法有血球压积管法(定性)和分光光度计法(定量)。,2020/5/20,免疫学检验,139,参考值定性法：阴性定量法：80g/ml。临床意义SLE病人血清中可出现混合型CG。在血管炎、肾小球肾炎、淋巴细胞增生性疾病也可阳性。在巨球蛋白血症或多发性骨髓瘤病人伴雷诺氏现象时与I型冷球蛋白血症有关。II型冷球蛋白血症与自身免疫病例如血管炎、肾小球肾炎、SLE、RA和SS有关。在某些感染如肝炎、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染和弓形虫病也可出现。,2020/5/20,免疫学检验,140,注意事项1.标本必须在37采集，并保持温度直至进行实验。2.一般不用于无冷球蛋白血症临床表现的人群过筛。3.冷凝集素可能引起某些自动血球计数仪的错误结果。,2020/5/20,免疫学检验,141,小结:总之，自身抗体的检测对诊断自身免疫病有着重要的意义。人血清中存在着多种自身抗体，有器官特异性的，也有非器官特异性的。因此，在选择自身抗体检测时应综合考虑，合理选用。,2020/5/20,免疫学检验,142,胞浆抗体Hep-2细胞具有许多胞浆抗原。如有特异性胞浆抗体存在，可出现强阳性胞浆荧光。包括抗线粒体抗体（AMA）、抗核糖体抗体、抗肌动蛋白抗体即抗平滑肌抗体（ASMA）、抗高尔基体抗体、抗丝抗体（如Vimentin）。一般最有意义的是AMA和ASMA，可是荧光染色Hep2细胞却不能鉴定这两种抗体，可应用鼠肾和鼠胃切片作进一步分析。、,2020/5/20,免疫学检验,143,系统性风湿病活动期的评价自身抗体检测以诊断全身性疾病比监测该病活动更有意义。但抗dsDNA抗体效价却与活动性有关。应定期检测抗dsDNA抗体的效价及C3、C4的含量。以及测定循环免疫复合物（CIC）的含量。ESR和CRP在炎症反应时常常升高。RA病情加重时，CRP明显增高。SLE活动期，CRP一般正常。,2020/5/20,免疫学检验,144,器官特异性自身免疫性疾病组织抗体许多自身抗体可采用IFA测定，用鼠肾和胃的切片能测出抗线粒体、平滑肌、肝肾微粒体和胃壁细胞的抗体。甲状腺组织切片可测定抗甲状腺自身抗体。,2020/5/20,免疫学检验,145,自身免疫性肝病在肝脏病变中，ANA阳性率可达40-80%。抗线粒体抗体（AMA）与原发性胆汁性肝硬变有关。特别是高效价的M2和M9线粒体抗原。约一半的自身免疫性肝炎的病人有较高效价的ASMA。此外，肝肾微粒体抗体（LKMAs），抗可溶性肝抗原（SLA）抗体，抗肝细胞膜抗体等也可用于自身免疫性肝病诊断和监测。,2020/5/20,免疫学检验,146,其他肾脏疾病常测定的抗体有抗dsDNA抗体，抗肾小球基底膜抗体等，还可测定CIC，以及作肾组织活检进行荧光染色。韦格纳肉芽肿病是一种发生于上下呼吸道的坏死性血管炎，也累及肾脏，病人常死于肾和肺衰竭。检查抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCAs）是诊断指标之一。也可通过ELISA测定抗髓过氧化物酶抗体，抗蛋白酶3抗体，有助于诊断和鉴别诊断。,2020/5/20,免疫学检验,147,胃肠道疾病中，恶性贫血与抗胃壁自身抗体有关，与抗内因子抗体的相关性达75%。抗胰岛细胞抗体（ICAs），抗谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）与I型糖尿病有一定关系。重症肌无力病人可出现抗骨骼肌抗体。多发性肌炎和皮肌炎可有抗Pm1和抗Jo-1抗体。抗心肌抗体常见于心肌梗死、心脏手术或心肌损伤后。,