机能学创新性实验

机能学实验学生设计性实验申请表实验名称 去甲肾上腺素和酚妥拉明对局部麻醉时间的影响 年级 10级 班级 K-7班 专业 临床 实验小组组别 第一组 所在实验室 第二实验室 指导教师 刘爱东 填表日期 2012年12月1日 立项背景普鲁卡因(procaine)为酯类局麻药，能暂时阻断神经纤维的传导而具有麻醉作用，本品对皮肤、粘膜穿透力弱，不适于表面麻醉。普鲁卡因能使细胞膜稳定，降低其对离子的通透性，使神经冲动达到时，钠、钾离子不能进出细胞膜产生去极化和动作电位，从而产生局麻作用。在临床多把普鲁卡因作局部麻醉药物使用，常局部注射用于浸润麻醉、传导麻醉、蛛网膜下腔麻醉和硬膜外麻醉。普鲁卡因对周围血管有明显的直接扩张作用，容易被吸收进入血液，且麻醉持续时间短，为减少吸收延长药效，减少毒副作用，临床上常加入少量的肾上腺素 (1200000500000)，时效可延长20%【1】。利用不同药物对血管收缩或舒张的作用，与普鲁卡因配伍注射，观察收缩血管的药物对麻醉时间是否都有延缓作用，而舒张血管的药物对机体吸收普鲁卡因的速度是否有促进作用，而缩短麻醉时长【2】。血管的收缩扩张影响麻醉药物的吸收的快慢，临床上可以根据需要而选用相应的药物与麻醉药配伍注射，能够较好地控制对病患的麻醉时间【3】。探究收缩血管物质是否都能延缓普鲁卡因的局部麻醉时间，并观察扩血管物质对其麻醉时间的影响。实验动物健康雄性小白鼠30只，体重1820g，年龄、体型相同。（由遵义医学院动物实验中心提供）主要仪器1ml注射器3支，RB-200智能热板仪，天平，加样枪，秒表。主要试剂和药品0.5盐酸普鲁卡因注射液、1/250000去甲肾上腺素、1/250000酚妥拉明。研究方案1、采用热板法测小鼠痛阈值：取雄性小鼠数只，依次放入智能热板仪内，测定其痛阈值，凡舔足时间在2030s者入选后续实验，共选30只。（热板法是将小鼠置于预知加热到54.555.5恒温的热金属板上，通过刺激小鼠局部产生疼痛反应，表现为舔后足。通过记录从放入热板后到出现舔后足所需时间，即小鼠的痛阈值)。【4】2、将入选的30只小鼠随机分成A、B、C三组，每组10只，分别编号为A1、A2、A10；B1、B2、B10；C1、C2、C10。A组为对照组，B、C为实验组。3、将分好组的小鼠放入天平中称出重量，按如下剂量腹腔注射给药： A组：0.5盐酸普鲁卡因注射液(0.1ml/10g)腹腔注射。B组：含有1/250000去甲肾上腺素的0.5盐酸普鲁卡因注射(0.1ml/10g)腹腔注射。C组：含有1/250000酚妥拉明的0.5盐酸普鲁卡因注射液(0.1ml/10g)腹腔注射。4、于给药后第20min将小鼠放入RB-200智能热板仪，每隔5min观察一次其状态，观察到第60min为止，每次观察30s，直到其出现舔后足，记下每只小鼠给药后至舔后足所经历的时间，并将其时间填入相应的组别内。观察指标注射药后到小鼠出现舔后足所经历的时间t。预期结果1、去甲肾上腺素是肾上腺素受体激动药，似肾上腺素也可使血管收缩，尤以皮肤黏膜血管收缩最明显，所以与麻醉药物配伍皮下注射，也能延长麻醉时间。去甲肾上腺素收缩血管的作用比肾上腺素要强，根据推测用去甲肾上腺素的麻醉时间比肾上腺素长。2、酚妥拉明是肾上腺素受体的阻断药，酚妥拉明具有阻断血管平滑肌1受体和直接扩张血管作用。使用酚妥拉明的可能结果有：血管扩张加快了组织对药物的吸收，缩短了麻醉药的作用时间。血管扩张对药物的吸收没有影响，麻醉时间没有明显变化。麻醉时间反而延长。数据的收集及处理方法表1 不同药物对小鼠局部麻醉时间的影响动物编号对照组实验组普鲁卡因(0.1ml/10g)含去甲肾上腺素的 含酚妥拉明的普普鲁卡因(0.1ml/10g) 鲁卡因(0.1ml/10g)123456789101、用SPSS统计软件【5】对数据进行统计学分析。根据本实验的设计方案，计量资料采用均数标准差表示，两组间差异的比较用t检验，显著性水准设置p0.05。2、求出各组每只小鼠痛阈药效平均时间。t=(A1+A2+A10)/10；t1=(B1+B2+B10)/10；t2=(C1+C2+C10)/10；3、计算B、C两组相对A组延长和缩短的百分率：公式：RB%=|t1平均值t平均值|/t平均值100%RC%=|t2平均值t平均值|/t平均值100%注：绝对值中减后为负数者，在结果中要带上负号。4、通过看其增加和缩短的百分率，来分析其对局麻药作用时间长短的影响。参考文献1、杨宝峰，苏定冯，周宏灏等.药理学.第7版.北京：人民卫生出版社，2012，128。2、胡安身，秦定英，张金堂等.盐酸普鲁卡因国内外合成工艺概述J，中国医药工业杂志，1982年02期。3、麻醉学J. 国外科技资料目录(医药卫生), 1997, (07)4、刘爱东，李利生，刘佳云等.机能学实验教程.第1版.西安：第四军医大学出版社，2009，123124。 5、王建华，王子元，袁聚祥等.预防医学.第2版.北京：北京大学医学出版社，2009, 96100。实验教师审核意见实验教师签名：年 月 日实验室审核意见实验室(副)主任签名：年 月 日答辩专家对选做实验的审核意见答辩专家签名：年 月 日