微波消煮ICP测定微量元素实验操作方法及注意事项

HNO3-H2O2微波消煮一ICP测定植物样品微量元素含量的操作方法及注意事项（中国农业大学植物微量元素营养与人体健康研究小组）一、 植 物样品的前处理1. 植物样品的洗涤 从田间或是其它地方取回的实验材料， 首先要进行清洗， 目的是去掉材料本 身所带的泥土等杂质，保证试验结果的真实性。洗涤步骤：用自来水快速洗 2-3 次后，用去离子水快速冲洗 2-3 次至干净。注意事项：（1）快速冲洗，避免长时间浸泡在水中； （2）样品尽量完整，避 免过多切口而造成污染和养分流失； （3）所有样品清洗的时间和步骤尽量一致； （ 4）对于籽粒样品，应放在塑料网筛中直接快速用去离子水冲洗； （ 5）特别注 意去掉杂质（非样品物质） 。2. 植物样品的烘干 清洗完毕后，甩干水后将实验材料装进信封内，放入烘箱进行烘干。温度为65 - 70C,连续烘48小时。如果是鲜样，应在105C下杀青30mi n,然后再按上 面的条件进行烘干。经检查样品烘干后，关掉烘箱，待温度降到室温后，再称取 干重，并将样品保持干燥状态。注意事项：（1）信封上应用铅笔注明样品编号、取样时间、取样地点、学生 姓名等；（2）烘箱要开排风设置；（3）湿样和干样应分开烘； （4）如果要杀青， 应事先将烘箱温度调到105C； （5）烘箱中样品不要放得太满。（6）样品烘干过 程中应注意防止金属粉末等的污染 , 使用不锈钢烘箱。3. 植物样品的粉碎 称取干重后，进行样品粉粹。原则上应将采取的所有样品进行粉碎，混匀后放在事先写好编号的小封口袋中注意事项：（ 1）如果样品较大，应先用剪刀剪粹后再进行粉粹； （2）如果样 品较多，应剪粹后混匀用四分法取适量样品进行粉粹； （3）用于微量元素测定的 样品应用不锈钢或玛瑙粉碎机粉样，避免用铁制品； （4）样品一定要磨细，保证 样品的均一性；（ 5）避免交叉污染，及在两个样品之间用喷枪清洗所有磨样用具； （ 6）磨好的样品放在封口袋中，应保持干燥状态。 （ 7）样品必需烘干后再粉。 最好及时测定，如果要重新测定以前的样品，最好再烘干一下。4.植物样品的消煮HNO3-H2O2微波消煮4.1 实验前药品及仪器准备4.1.1 实验材料（1）主要试剂：用于消煮样品的试剂：优级纯的浓HN03和30% H2O2用于清洗容器的试剂： 化学纯的 HNO3 或 HCl（2）其它用品 ：高纯水、烧杯、 25 ml 容量瓶、加样枪或 5ml 移液管（ 2个）、 天平（精确至 0.0001g）、10ml 离心管（一次性使用，用于存放消煮后的溶液） 、 吸水纸、洗瓶、小漏斗、称量纸、牛角匙、记号笔、塑料滴管、乳胶手套（无化 石粉）etc4.1.2 实验用具处理容量瓶、小漏斗、移液管等需洗涤的仪器在使用前需用 1： 10 硝酸（化学纯 即可）或 1： 8 盐酸（化学纯即可）浸泡 3 小时以上，然后用自来水冲洗 23 次后再用去离子水清洗干净，放在干净的密闭容器中。注意事项： 用于清洗的稀酸用一个固定的容器，最多洗两次后更换4.2 样品消煮4.2.1称样在分析天平（精确至O.OOOIg）上用牛角勺称取待测样品0.5g,各个样品之间称量控制在 0.001g 以内，记录数据。将样品小心转移至干净且干燥的消煮管内，放在管架上，按顺序放好。编号可以按此进行编号：如CK1 （1）、CK2（2）、标样1（ 3）、标样2（ 4）、待测样品（540）。注意事项：（1）称样时混匀样品；（2）称样时一定要避免交叉污染；（3）编号一 定要与管号对应。（4）称量纸应折成槽状，样品应放到消煮管底部，避免沾在壁 上;（ 5）每次（40个样）都要称取1个标样和2个空白。4.2.2 力卩 HNO3用移液管向消煮管内加入5ml优级纯的浓HNO3,摇匀后盖上盖子后过夜。 注意事项：（1）样品不要挂壁；（2）加完酸后一定要摇匀；（3）加完酸后一定要 过夜，且盖好盖子。4.2.3 力卩 H2O2第二天消煮前，每个消煮管中加 4ml优级纯的H2O2,摇匀后，拧紧管盖。注意事项：（1）加完H2O2后要注意摇匀，然后拧紧盖子；（2）各个消煮管的 盖子拧紧的程度要一致。4.2.4消煮将消煮管按顺序对称摆放在消煮炉转盘上，确保无误！开始进行消煮。消煮完毕后，取出消煮管并放在管架上，冷却 30min，轻轻拧开管盖放出内部气体。程序介绍：GEN 1200FE1 XpressstagepowerRAMPcontrolHOLD1120006:00120C02:00w2120004:00150C05:00w3120004:00185C20:00w整个过程包括4个阶段，除上述3个stage以外，之后还有一个冷却过程，大约需要25min。因此，一次消煮共需时间大约 70min。425定容将消煮液转移至25ml洗净的容量瓶（已编号）中，先用高纯水清洗盖子， 再少量多次用高纯水清洗消煮管 2次并转移入容量瓶中，最后用高纯水洗小漏斗 后再定容摇匀。静置1小时以上后转移上清液至10ml离心管内保存。注意事项：（1）离心管的管号一定与消煮管号一致；（2）容量瓶上放干净的小漏 斗；（3）注意不要撒漏，保证全部转移：（3）检查离心管的盖子是否盖紧；（4） 不能随便中途停机。（5）容量瓶一定要摇匀，至少10次以上。（6）转移到离心 管是可先用定容液润洗离心管5消煮管和容量瓶、小漏斗的清洗（1）容量瓶和小漏斗的清洗： 转移并检查无误后立即将容量瓶中溶液倒掉，并 用自来水冲洗2次以上后，再浸泡在10%的稀酸（1: 10的硝酸或盐酸）中至少 3个小时，然后再用自来水冲洗 3次，最后再用去离子水清洗3- 4次。注意事项：（1）用完后立即清洗；（2）洗净后放在干净的容器中，备下次用。（2）消煮管的清洗：消煮管中的溶液转移完后，立即用自来水冲洗，控干水分 后加10ml HNO3，拧紧管盖，然后按清洗管子的程序进行。程序如下：使用程序：XI XpressstagepowerRAMPcontrolHOLD11200w10:00180C10:00之后是25min的冷却阶段，一次消煮共需时间大约45min。消煮程序完毕后， 取出消煮管， 倒掉其中的溶液， 再用去离子水清洗管子 34次，倒扣晾干备用。 注意事项：（1）加酸之前要先用自来水洗； （2）加完酸后，一定要拧紧管盖，按 洗涤程序进行；（3）洗涤程序完后，立即用去离子水洗涤； （ 4）不能将消煮管放 在烘箱烘干，应倒扣后让其自然晾干。6. 样品测定用该方法消煮的样品可以直接测定 Fe、Zn、Mn、Cu、P、K、Ca、Mg 等 元素含量。可以用ICP，有些元素的测定也可以用 AAS6.1 配制标准曲线溶液： 最好自行配制， 标准溶液酸的浓度与消煮液中酸的浓度 接近最好，标准溶液平时应放置在冰箱中 （保鲜温度），但不宜放置时间过长；6.2测定方法的选择：与负责ICP仪器的老师共同确定测定方法，包括测定条件6.3 样品测定： 具体操作方法：（1） 机器预热约 2h；（2）测定water（ F5）和标准溶液（F6）;确定标准曲线（Calib）（3）样品测定（F7）;包括空白、标样和待测样品（4）打印结果： 定结果会按照样品顺序自动地打印出来，在打印结果中，可以得到如下信息：测定方法、测定时间、所测元 素种类、强度、元素含量、标准偏差等。（ 5） 结果计算X （mg/kg） = （ D B） X 25 （ml） / m其中，X:样品中养分含量（mg/kg） ;D:样品测定值 （mg/L）； B:空白值（mg/L） ； m：样品质量（g）注意事项： （1）样品消煮完后尽快进行测定，不宜放置时间太长； （2）测定时首 先要先空白和标样，确定没有问题后再开始样品的测定；（3）每测定 20 个样品后需要校准一次标准曲线；（4）必需做清楚和详尽的记录， 包括文字记录和文件 记录，切记在打印结果上注明日期、 测定样品性质、 样品编号等， 并做备份； （5） 测定完成后尽快整理结果，并与导师讨论； （6）如果空白和标样结果不可靠，则 与此相关的所有样品的测定结果无效； （7）测定样品时同时测定样品中 Al 的含量，用以判断样品是否有土壤污染7. 注意事项1在不清楚的时候一定问清楚后再进行； 2实验过程中的每一步都要小心可能存在的污染。实验操作需要规范、认真仔细。3标样应放置在密闭容器中，防止吸潮。并且每次用完后应立即盖好盖子。 4超纯水随用随取，用专用的容器存放；5每次消煮前需要先检查微波消煮炉的温度，如果温度高于60C，不能继续进行消煮。6 在使用ICP测定样品前，最好等到Fe标准溶液（1.5mg/kg）的强度达到8000 以上后再开始进行样品的测定，否则测定结果将会变高。