SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量

1会计学SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量分子量-SDS的性质与作用的性质与作用u 蛋白质变性 0.1-1% SDS 0.1 M 2-巯基乙醇u蛋白质变与SDS分子按比例结合 1 ：1.4SDSSDS的性质与作用的性质与作用聚丙烯酰胺凝胶性质XYZ+ SDSPAGESDS-PAGEXYZ-+-结果受分子量大小和电荷的影响结果受分子量大小和电荷的影响结果只与分子量大小有关结果只与分子量大小有关-+PAGE和SDS-PAGE的比较配制分离胶溶液v制备分离胶制备分离胶凝胶配制过程要迅速, 催化剂TEMED要在注胶前再加入。注胶过程要一次性完成,避免产生气泡。出现明显界面时，出现明显界面时，分离胶凝聚完成分离胶凝聚完成（ minh）倒出水或正丁醇，倒出水或正丁醇，并用滤纸吸干并用滤纸吸干v制备分离胶制备分离胶封水的目的是使分离胶上表面平直，并排除气泡。凝胶聚合好的标志是胶与水层之间形成清晰的界面。配制浓缩胶溶液v制备浓缩胶制备浓缩胶加入浓缩胶溶加入浓缩胶溶液液 pH 8.6v制备浓缩胶制备浓缩胶样梳需一次平稳插入样梳需一次平稳插入,梳梳口处不得有气泡口处不得有气泡,梳底需梳底需水平。水平。插入样品梳插入样品梳v上样及电泳上样及电泳= 蛋白样品距加样端迁移距离（cm）溴酚蓝区带中心距加样端距离（cm） 相对迁移率 以每个蛋白标准的分子量对数对它的相对迁移率作图得标准曲线，量出未知蛋白的迁移率即可测出其分于量。 u 蛋白质变性 0.1-1% SDS 0.1 M 2-巯基乙醇u蛋白质变与SDS分子按比例结合 1 ：1.4SDSSDS的性质与作用的性质与作用