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课时提能演练（四十二）（30分钟50分）一、选择题（每题4分，共5题，共20分）1. （易错题）如图为DNA分子的某一片段，其中分别表示某种酶的作用部位贝肪目应的酶依次是（）G AAT 11 111 1C TTA A|二二亠GA. DNA连接酶、限制性核酸内切酶、解旋酶B. 限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶C. 解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶D. 限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶2. 下列关于基因工程的叙述中，正确的是（）A. 目的基因的核苷酸序列都是已知的B. 接受外源基因的转基因植物成为一个新物种C. 可从人肝脏细胞中提取胰岛素原的 mRNA反转录获得人胰岛素原基因D. 培育转基因动物时常选择受精卵作为受体细胞3. （2012 萧山模拟）下列有关基因工程的叙述，正确的是（）A. 载体上的标记基因有利于促进目的基因在受体细胞中表达B. 用反转录法合成胰岛素基因时可以从胰岛 B细胞中提取相关的模板C. 目的基因导入受体细胞后，引起受体细胞的变异属于基因突变D. 限制性核酸内切酶和DNA聚合酶是基因工程中两类常用的工具酶4. （预测题）如图是用基因工程技术培育抗棉铃虫的转基因棉花过程，有关该过 程叙述错误的是（）目的基因 插入到染 色体DNA中 0- 倉 |il农杆菌受体细胞抗虫基因苏云金芽抱杆閨试管苗一抗虫棉Ti质粒A. 抗虫基因的表达产物为多肽B. 抗虫基因的插入不会改变受体细胞的结构C. 受体细胞除去细胞壁更利于基因的导入D. 通过Ti质粒上的抗性基因筛选试管苗5. （双选）利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（）A. 棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫蛋白B. 大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其 mRNAC. 山羊乳腺细胞中检测到人生长激素 DNA序列D. 酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白二、非选择题（共2题，共30分）6. （16分）（2012 珠海模拟）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏 松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、 半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷 酸序列，并人工合成了两条各含 72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基5*3y DNA单链5* DNA单链31亍| Klenmv酶二?：双链DNA在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:(1)Klenow 酶是酶，合成的双链DNA有个碱基对。 获得的双链DNA经EcoRI （识别序列和切割位点-G； AATTC-和BamH （识别序列和切割位点-G；GATCC-双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒 的大肠杆菌并进行DNA测序验证。 大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它 设计EcoRI禾口 BamI双酶切的目的是 。 要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有 。（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是。（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是 。7. （14分）转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素 A。由于含有可以生 成维生素A的B胡萝卜素，它呈现金黄色，故称“金色大米”。“金色大米” 的培育流程如图所示，请回答下列问题。（已知限制酶I的识别序列和切割位点 是一G GATC，限制酶H的识别序列和切割位点是一 GAT ）DNATH 1iTtItM TI 1 T I I I M I. b li 11LtLATl XTAGrCTAGG,? J b目的基因CCTAGG 冷、结合基因11注bl赊限制諏有Q聲水稻细胞懈?的识别序列放大V/的曲(1) 图中a、b所示获得目的基因的方法是 。据图分析，在构建c的过程中，需用 割目的基因，为检验重组质粒是否导入受体细胞，需要利用的标记基因是. 。(3)过程e运用了细胞工程中的 术，新个体是否符合要求，在个体水平上检测方法：。答案解析1. 【解析】选C。使碱基对内氢键断裂的是解旋酶；限制性核酸内切酶将特定部位的相邻两脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开；连接DNA片段间磷酸二酯键的是DNA连接酶。2. 【解析】选D。目的基因即我们所需要的基因，有的目的基因的核苷酸序列是 已知的，但许多目的基因的核苷酸序列是未知的。接受外源基因的生物只是发 生了基因重组，并未与原物种产生生殖 隔离，故并没有成为一个新物种。肝脏 细胞是高度分化的细胞，其核基因中的人胰岛素原基因不表达，故不可能从人 肝脏细胞中提取胰岛素原的 mRNA ;由于动物体细胞的全能性不易表达，所以 培育转基因动物时常选择受精卵作为受体细胞。3. 【解析】选B。载体上的标记基因是为了便于检测目的基因是否已导入受体细 胞；目的基因导入受体细胞后，弓I起受体细胞的变异属于基因重组；基因工程 中两类常用的工具酶是限制性核酸内切酶和 DNA连接酶。4. 【解析】选D。基因表达的产物是多肽，目的基因插入染色体后，不会改变细胞结构，不会影响细胞正常的生理活动，故 A、B对；受体细胞除去细胞壁更利 于基因的导入；筛选抗虫棉时一般通过是否抗虫来筛选，故D错。5. 【解析】选A、D。本题考查了目的基因的检测和目的基因的表达两个概念之间的区别。基因表达的产物是蛋白质，因此，只有在受体细胞中检测或提取到 了相应蛋白质才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达，C项只能说明完成了目的基因的导入，B项只能说明完成了目的基因的导入和目的基因的转录过 程。6. 【解析】Klenow酶催化了原料按照模板链通过碱基互补配对相连， 故属于DNA 聚合酶；合成双链后碱基对数是 72 X2 -18;大肠杆菌具有繁殖快、代谢旺盛等 特点；若只用一种限制酶处理，则目的基因和载体的末端可以任意连接，可形 成多种重组体、环状DNA等，用两种限制酶处理后可保证目的基因和载体定向 连接；题干中已给出提示“合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象”。答案：(1)DNA聚合 126(2) 繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少 保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发 生任意连接) 标记基因(3) 合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基(或脱氧核苷酸)的现象(4) 蛋白质工程7. 【解析】获取目的基因的方法是通过 mRNA得到DNA，存在反转录过程，是 反转录法。切割目的基因需用限制酶，基因I、H为标记基因，需要保留至少一个 标记基因以便于筛选，所以选用与-GGATCC-相应的限制酶I,插入目的基因后 基因I被破坏，故用基因H来检测。如果用与-GATC-相应的限制酶H,则标记基因 全部被破坏,无法进行筛选。个体水平上的检测是指通过观察个体的性状以确 定目的基因是否表达。答案：（1）反转录法（2）限制酶I 基因H（3）植物组织培养大米中是否含有可以生成维生素 A的B-胡萝卜素
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