waters2695-2487hplc仪器操作简明流程

WATERS2695-2487HPLC仪器操作简明流程WATERS2695-2487HPLC仪器操作简明流程1、 2487检测器开、关机及使用：打开电源仪器自检1-2min预热5min稳定约30min设定通道、波长模式、波长(也可在工作站上设置)回零(AutoZero)分析检测实验完毕关掉电源开关即退出。2、 2695分离单元使用操作：1) 开机自检打开电源开关，仪器开始自检(4-5min),待屏幕上方出现“Idle字样表示自检成功。2) 脱气(Degas)按面板右下方“Menu/StatuS键进入Status(1)”界面，移动光标至DegasseMode,按Enter选择OR,打开在线脱气。3) 设定柱温(可选项)在“Statu(s1)”界面，移动光标至“ColHtrSet，输入目标温按”Enter即可。(可在工作站方法中设置)4) PrimeSealWash(清洗柱塞杆)按“Menu/Status键回到“MenU界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键PrimeSealWsh，“Start,”冲洗12min后，“HAL”T，“CLOS”E。5) WetPrime在Status(1)界面中Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%,按液晶屏幕右下角DirectFunction键，”移动光标选择“2WetPrime，“”OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定(如：5ml/min，3min),“OK即可。将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。6) PurgeInjector(注射器排气泡及清洗)进入“DirectFunction界面后，选择”“3PurgeInjector，”“OK”，默认数值为6，“OK”。7) PrimeNeedleWash(清洗注射针)进入Diagnostics界面，按下排功能键之PrimeNdlWsh,Start,”默认30秒钟，Close,即可返回“Diagnostics#面。注：以上4)-7)为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。若发现注射器中有气泡，则可重复6)直至排除。如果流动相中含有盐类，则实验结束后必须用水清洗柱塞杆(即操作4)。8) 平衡柱子在Status(1)界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，再WetPrime操作一次，然后设置流速，平衡色谱柱30-60min。9) 放置样品拉开样品转盘舱门，将盛有待测样品溶液的样品瓶放入转盘中，记下样品瓶号，关上舱门。10) 检测样品打开工作站，设置仪器方法、方法组、自动进样序列等，监视基线、检测样品。11) 分析处理数据、打印报告12) 清洗注射器、针、柱塞杆参见上述4)、7)。13) 清洗色谱柱用水冲洗柱子40-60min(视柱子规格不同，流速通常1ml/min)；然后用甲醇或乙腈冲洗柱子40min(流速1ml/min)。14) 关机关掉电源开关。另外有相关注意资料1、 检测器波长范围：190-700nm2、 可以进行紫外扫描（scan），参考媒体播放3、 清洗柱塞杆的溶剂可以用水，或5%-10%甲醇（抑菌）4、 清洗针的溶剂可以根据样品溶解性选择，如甲醇，或异丙醇-水（1：1）5、清洗柱塞杆操作primesealwash后stOTt有溶液流出，持续一段时间后，按下“HALIT,CLOSE冲洗1-2min即可，1次。可以每天开机后进行，或结束实验时进行。流动相中有盐，结束实验时一定要清洗。仪器不自动进行。6、 每次仪器打开后，会自动进行的操作有：STARTUPDIAGNOSTICS;WATERSALLIANCESEPERATIONSMODULE,INITIALIZING;INITIALIZINGNEEDLESYRINGE;INITIALIZINGCAROUSELS;INITIALIZINGSOLVENTSYSTEM;IDLE（在屏幕上有显示）7、 “实验结束后要purgeinjector，1”次即可，包括了“purgesampleloop。”8、 在线脱气机打开后，开始时运行加速，使压力很快降到以下，然后维持在左右。9、 怀疑管路堵塞可卸下单向阀、在线过滤器进行清洗。单向阀安装注意方向。10、本仪器配置注射器体积250ul,样品环100ulo可在“CONFIG中查看。11、样品环体积可换；但同时注射器体积也应匹配。注射器体积有25、100、250、2500等。12、在检测器中“DIAG”中可以查看“SAMPLEENERGY、“REFERENCEENERGY等参数，了解紫外灯的使用情况。13、 检测器要经常用“SHIFT+3来校正波长，保证其准确性。每”1-2周检查1次。先清洗检测池。清洗检测池可以在线进行，不用卸下；具体操作是，用双向接头替代色谱柱，流速设置为1ml/min，用m滤膜过滤过的甲醇冲洗15min-30min即可达到清洗目的。14、 2台仪器可以共用一个工作站（工作站升级为多系统）；但2台仪器不能同时用一个项目采集样品。15、 基线平衡后纵坐标可达到小数点后第4位（很平稳）。16、 可单针自动进样，也可以成组进样；成组进样需要编辑样品组方法（包括瓶号、样品名、进样体积、进样次数、功能、方法组/报告方法、下一针延迟等）。样品组方法可保存、调用。（ctrl+D可以用于列复制是“下同”之意。）17、 样品组方法里的“功能”一项，有“平衡”及“平衡色谱柱”两个选项，其功能不同；若仪器方法选用梯度，用“平衡色谱柱”可以在进样前运行梯度来平衡柱子；而如果选用“平衡”则只是按照初始梯度条件等度平衡柱子。（当然，如果是用等度的流动相条件，则两者没有区别）18、 编辑仪器方法时注意：1） 2695逋用”标签下，单次输送体积”数值根据流动相流速不同有别：流速时，选25;流速在时，选50;流速时，选100。针头深度”除样品瓶选用内插管时设为2,其余均用默认值0。2） “脱气”标签下，“脱气模式”选择“开”即可。3） “流量”中编辑流动相比例及梯度条件；“温度”标签下，可以启用柱温设置“目标柱温”等。4） 溶“剂”为可选备注项。其余“事件”、“通道”不用设置。5） 2487在“通用”标签下选择“波长模式”，启用通道；在相应“通道1”或“通道2”下设置波长即可，其余不动。6） AUFS值在此仪器中没有启用，不改变面积大小。19、 注射器中的气泡快速有效排除方法：可以小心的卸下注射器抽吸甲醇排除气泡后，注射器中保留少量溶剂，做purgeinjector小心安装上，再做几次purgeinjector观察没有气泡即可。其他方法，如WATERS工程师讲可以在“purgeinjector开始后、注射器杆向上时，拧掉下”边螺丝，上下抽推排除气泡。溶剂用甲醇较好；不用同时拧掉上方注射器。20、 检测器开机自检结束时有时会提示“calibration这是仪器自检后提示与上一次自检结果有出入，原因”,很多，可能是检测池中有小气泡，检测池污染，也可能是流路中溶剂有变动。分析原因，清洗检测池，排气泡，或者请工程师帮助。21、 要注意样品瓶中死体积大小，防止供试液体积不足，针头吸不到。HPLC日常维护办法之一：压力异常操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。A、没有压力显示，没有流动相流动原因解决方法A、 电源问题1、接通电源，开机2、保险丝被烧坏2、更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败3、a、采取恰当的设定b、修理或更换控制器4、柱塞杆折断4、更换柱塞杆5、泵头内有空气5、溶剂脱气、启动泵抽出空气6、流动相不足6、a、补充流动相b、更换入口滤头7、单向阀损坏7、更换单向阀8、漏液8、拧紧或更换手紧接头B、流动相流动正常，但没有压力显示原因解决方法1、仪表损坏1、更换仪表2、压力传感器损坏2、更换压力传感器C、压力持续偏高原因解决方法1、流速设定过高1、调整流速设定2、柱前筛板堵塞2、a在允许情况下反冲色谱柱b、更换筛板c、更换色谱柱3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀3、a、使用恰当的流动相b、冲洗色谱柱4、色谱柱选择不当4、选择恰当的色谱柱5、进样阀损坏5、清洗或更换进样阀6、柱温过低6、提高温度7、控制器失常7、修理或更换控制器8、保护柱阻塞8、清洗或更换保护柱9、在线过滤器阻塞9、清洗或更换在线过滤器D、压力持续偏低原因解决方法1、流速设定过低1、调整流速2、系统漏液2、确定漏液位置并维修3、色谱柱选择不当3、选择恰当的色谱柱4、柱温过高4、降低温度5、控制器失常5、维修或更换控制器E、压力不断上升原因解决方法1、见列表C1、见列表CF、压力降为零原因解决方法1、见列表A、B1、见列表A、BG、压力不断下降，但不回零原因解决方法1、见列表D1、见列表DH、压力波动原因解决方法1、泵中有气体1、a、溶剂脱气b、从泵中除去气体2、单向阀损坏2、更换单向阀3、泵密封损坏3、更换泵密封4、脱气不充分4、a、溶剂脱气b、改变脱气方法（使用在线脱气法等）5、系统漏液5、确定漏液位置并维修6、使用梯度洗脱6、由于流动相粘度的变化引起的压力波动HPLC日常维护办法之二：漏液通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏（例如，卡套损坏、密封表面有杂质）；损坏的接头应该更换掉。A、接头处漏液原因解决方法1、接头松动1、拧紧2、接头磨损2、更换3、接头过紧3、&拧松，再重新拧紧b、更换4、接头被污染4、a、拆下清洗b、更换5、部件不匹配5、使用同一品牌的配件B、泵漏液原因解决方法1、单向阀松动1、a、拧紧单向阀（不必拧的过紧）b、更换单向阀2、接头松动2、拧紧接头（不必拧的过紧）3、混合器密封损坏3、a、更换混合器密封b、更换混合器4、泵密封损坏4、维修或更换泵密封件5、压力传感器损坏5、维修或更换压力传感器6、脉冲阻尼器损坏6、更换脉冲阻尼器7、比例阀损坏7、a、检查隔膜，如果漏液立即更换b、检查手紧接头，损坏的立即更换8、放空阀的损坏8、a拧紧放空阀b、更换放空阀C、进样阀漏液原因解决方法1、转子密封损坏1、重新安装或更换进样阀2、定量环阻塞2、更换定量环3、进样口密封松动3、调整4、进样针头尺寸不合适4、使用恰当的进样针5、废液管中产生虹吸5、保持废液管高于废液液面6、废液管阻塞6、更换或疏通废液管D、色谱柱漏液原因解决方法1、尾端接头松动1、拧紧接头2、卡套内有填料2、拆下、清洗卡套、重新安装3、筛板厚度不合适3、使用合适的筛板（参考下表）筛板选择指导物质粒径筛板孔径3-4u5-20u2uE、检测器漏液原因解决方法1、流通池垫片损坏1、a、避免过大的背景压力（压力降）b、更换垫片2、流通池窗破碎2、更换窗口3、手紧接头漏液3、拧紧或更换4、废液管阻塞4、更换废液管5、流通池阻塞5、重新安装或更换HPLC日常维护办法之三：谱图的各种问题液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。A、峰拖尾原因解决方法1、筛板阻塞1、a反冲色谱柱b、更换进口筛板c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷2、填充色谱柱3、干扰峰3、a、使用更长的色谱柱b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误4、调整PH值。对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰5、样品与填料表面的溶化点发生反应5、a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b更改色谱柱B、峰前延原因解决方法1、柱温低1、升高柱温2、样品溶剂选择不恰当2、使用流动相作为样品溶剂3、样品过载3、降低样品含量4、色谱柱损坏4、见A1、A2C、峰分叉原因解决方法1、保护柱或分析柱污染图1、取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。2、样品溶剂不溶于流动相2、改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。D、峰变形原因解决方法1、样品过载1、减少样品载量E、早出的峰变形原因解决方法1、样品溶剂选择不恰当1、a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解决方法1、柱外效应1、a调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）b、使用小体积的流通池G、K增加时，脱尾更严重原因解决方法1、二级保留效应，反相模式1、a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入盐或缓冲剂（或离子化样品）d、更换一支柱子2、二级保留效应，正相模式2、a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入水（或多官能团化合物）d、试用另一种方法3、二级保留效应，离子对3、加入三乙胺（或碱性样品）H、酸性或碱性化合物的峰拖尾原因解决方法1、缓冲不合适1、a、使用浓度50-100mM的缓冲液b使用Pka等于流动相PH值的缓冲液I、额外的峰原因解决方法1、样品中有其他组份1、正常2、前一次进样的洗脱峰2、a、增加运行时间或梯度斜率b、提高流速3、空位或鬼峰3、a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积J、保留时间波动原因解决方法1、温控不当1、调好柱温2、流动相组分变化2、防止变化（蒸发、反应等）3、色谱柱没有平衡3、在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱K、保留时间不断变化原因解决方法1、流速变化1、重新设定流速2、泵中有气泡2、从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当3、a更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相L、基线漂移原因解决方法1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。）1、控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。）2、使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。3、流通池被污染或有气体3、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸）4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线）4、取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。5、流动相配比不当或流速变化5、更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成7、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂8、样品中有强保留的物质（高K值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。8、使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。9、使用循环溶剂，但检测器未调整。9、重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。10、检测器没有设定在最大吸收波长处。10、将波长调整至最大吸收波长处M、基线噪音（规则的）原因解决方法1、在流动相、检测器1、流动相脱气。冲洗系统以除去或泵中有空气检测器或泵中的空气。2、漏液图2、见第三部分。检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。3、流动相混合不完全3、用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂4、温度影响（柱温过高，检测器未加热）4、减少差异或加上热交换器5、在同一条线上有其他电子设备5、断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。6、泵振动6、在系统中加入脉冲阻尼器N、基线噪音（不规则的）原因解决方法1、漏液图1、见第三部分。检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换密封。检查流通池是否漏液。2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成2、检查流动相的组成。3、流动相各溶剂不相溶3、选择互溶的流动相4、检测器/记录仪电子元件的问题4、断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。5、系统内有气泡5、用强极性溶液清洗系统6、检测器内有气泡6、清洗检测器，在检测器后面安装背景压力调节器7、流通池污染（即使是极少的污7、用1N的硝酸（不能用磷酸）染物也会产生噪音。）清洗流通池8、检测器灯能量不足8、更换灯9、色谱柱填料流失或阻塞9、更换色谱柱10、流动相混合不均匀或混合器工作不正常10、维修或更换混合器，在流动相不走梯度时，建议不使用泵的混合装置O、宽峰原因解决方法1、流动相组成变化1、重新制备新的流动相2、流动相流速太低2、调节流速3、漏液（特别是在柱子和检测器之间）3、见section3。检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。4、检测器设定不正确4、调整设定5、柱外效应影响a、柱子过载b、检测器对反应时间或池体积响应过大c、柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大d、记录仪响应时间太长图5、a、小体积进样（例如：10ul而不是100ul）以1:10或1:100的比例稀释样品b减少响应时间或使用更小的流通池c、使用内径为的短管路d、减少响应时间6、缓冲液浓度太低6、增加浓度7、保护柱污染或失效7、更换保护柱8、色谱柱污染或失效，塔板数较低8、更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称的色谱峰，则用强溶剂冲洗旧柱子。9、柱入口塌陷9、打开柱入口，填补塌陷或更换柱子10、呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰10、选择其它类型的色谱柱以改善分离效果11、柱温过低11、提高柱温。除非特殊情况，温度不宜超过7512、检测器时间常数太大12、使用较小的时间常数P、分离度降低原因解决方法1、流动相污染或变质（引起保留时间变化）1、重新配置流动相2、保护柱或分析柱阻塞图2、去掉保护柱进行分析。如果必要则更换保护柱。如果分析柱阻塞，可进行反冲。如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏，建议使用恰当的再生程序。如果问题仍然存在，进口可能阻塞了，更换入口处的筛板或更换色谱柱。Q、所有的峰面积都太小原因解决方法1、检测器衰减设定过高1、减少衰减的设定2、检测器时间常数设定太大2、设定较小的时间常数3、进样量太少3、增大进样量4、记录仪连接不当4、使用正确的连接R、所有的峰面积都太大原因解决方法1、检测器衰减设定过低1、采取较大的衰减2、进样过多2、减少进样量3、记录仪连接不正确3、正确连接记录仪HPLC日常维护办法之四：进样阀的问题以下问题在使用进样阀过程中有可能发生。A、手动进样阀，转动不灵原因解决方法1、转子密封损坏1、更换或调整转子密封2、转子太紧2、调整转子的松紧度B、手动进样阀，载样困难原因解决方法1、进样阀安装不当1、重新安装2、定量环阻塞2、清洗或更换定量环3、进样器污染3、清洗或更换进样器4、管路阻塞4、清洗或更换管路C、自动进样阀，不能转动原因解决方法1、无压力（或电源）1、提供恰当的压力（电源）2、转子太紧2、调整转子的松紧度3、进样阀安装不当3、重新安装D、自动进样阀，其它问题原因解决方法1、阻塞1、清洗或更换阻塞部件2、机械故障2、见随机维修手册3、控制器故障3、维修或更换控制器HPLC日常维护办法之五：由气味、景象和声音可以发现的问题你需要运用你所有的感官去发现液相色谱的问题。你最好养成习惯，每天花上几分钟运用你的感官（除了味觉）来“感觉”你的液相色谱是否存在问题，这样可以帮助你迅速找到问题所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先闻到它的气味。大部分的问题是可以通过眼睛看到。A、溶剂的气味原因解决方法1、漏液1、见section32、溅出2、a检查废液瓶是否已满b、找到溅出的部位并清洗干净B、热气味原因解决方法1、仪器过热1、a检查并调节通风设施b、检查并调节温度设定c、关掉仪器，查找维修手册C、读数不正常原因解决方法1、压力不正常1、见section22、柱温箱问题2、a、检查并调节设定b、参照用户手册3、检测器灯失效3、更换灯D、灯警告原因解决方法1、压力超出极限值1、a、检查是否阻塞b、检查并调节极限值的设定2、其它警示灯2、见用户手册E、警告音原因解决方法1、溶剂泄漏/溅出1、找到并解决2、其它警告音2、见用户手册F、刺耳的短音或长音原因解决方法1、轴承失效1、见用户手册2、润滑不够2、进行恰当的润滑3、机械故障3、见用户手册HPLC日常维护办法之六：常见故障及日常维护下表中列出了液相色谱常见的一些问题，右侧中则列出的日常维护的方法可以减少问题出现的频率。括号中的数字是建议进行维护的时间间隔。用户手册则提供您更多的维护方法。溶剂瓶问题维护1、进口筛板阻塞1、&更换（3-6个月）b过滤流动相，滤膜2、气泡2、流动相脱气泵问题维护1、气泡1、流动相脱气2、泵密封损坏2、更换（3个月）3、单向阀损坏3、过滤流动相，运用在线过滤，准备备用单向阀进样阀问题维护1、转子密封损坏1、&不要拧的过紧b、过滤样品色谱柱问题维护1、筛板阻塞1、a过滤流动相b、过滤样品c、运用在线过滤或保护柱2、柱头塌陷2、a避免使用PH>8的流动相（针对大部分硅胶的柱子）b、使用保护柱c、使用预柱（饱和色谱柱）检测器问题维护1、灯失效，检测器响应降低，噪音增大1、更换（6个月）或准备备用灯2、流通池有气泡2、a保持流通池清洁b、池后使用反压抑制器c、流动相脱气一般问题维护1、腐蚀/摩擦损坏1、在不使用时保持系统缓冲液的清洁HPLC日常维护办法之一：压力异常作者：-转贴自：-点击数：775更新时间：2003-11-10文章录入：剡压力异常操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。A、没有压力显示，没有流动相流动原因解决方法1、电源问题1、接通电源，开机2、保险丝被烧坏2、更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败3、a、采取恰当的设定b、修理或更换控制器4、柱塞杆折断4、更换柱塞杆5、泵头内有空气5、溶剂脱气、启动泵抽出空气6、流动相不足6、a、补充流动相b、更换入口滤头7、单向阀损坏7、更换单向阀8、漏液8、拧紧或更换手紧接头B、流动相流动正常，但没有压力显示原因解决方法1、仪表损坏1、更换仪表2、压力传感器损坏2、更换压力传感器C、压力持续偏高原因解决方法1、流速设定过高1、调整流速设定2、柱前筛板堵塞2、a在允许情况下反冲色谱柱b、更换筛板c、更换色谱柱3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀3、a、使用恰当的流动相b、冲洗色谱柱4、色谱柱选择不当4、选择恰当的色谱柱5、进样阀损坏5、清洗或更换进样阀6、柱温过低6、提高温度7、控制器失常7、修理或更换控制器8、保护柱阻塞8、清洗或更换保护柱9、在线过滤器阻塞9、清洗或更换在线过滤器D、压力持续偏低原因解决方法1、流速设定过低1、调整流速2、系统漏液2、确定漏液位置并维修3、色谱柱选择不当3、选择恰当的色谱柱4、柱温过高4、降低温度5、控制器失常5、维修或更换控制器E、压力不断上升原因解决方法1、见列表C1、见列表CF、 压力降为零原因解决方法1、见列表A、B1、见列表A、BG、 压力不断下降，但不回零原因解决方法1、见列表D1、见列表DH、压力波动原因解决方法1、泵中有气体1、a、溶剂脱气b、从泵中除去气体2、单向阀损坏2、更换单向阀3、泵密封损坏3、更换泵密封4、脱气不充分4、a、溶剂脱气b、改变脱气方法（使用在线脱气法等）5、系统漏液5、确定漏液位置并维修6、使用梯度洗脱6、由于流动相粘度的变化引起的压力波动