微生物学与免疫学：4-病毒

病病 毒毒Progression of SmallpoxDay 3Day 5Day 7天花病毒天花病毒 Pox virus 痘浆法痘浆法 痘衣接种痘衣接种乳头瘤病毒乳头瘤病毒 Papilloma viruses are also found associated with human penile, uterine and cervical carcinomas and are very likely to be their cause; moreover, genital warts can convert to carcinomas.DNA肿瘤病毒肿瘤病毒 DNA tumor viruses 腺病毒腺病毒 Adenovirus These viruses are highly oncogenic in animals and only a portion of the virus is integrated into the host genome.天花病毒 Pox virus脊髓灰质炎病毒脊髓灰质炎病毒 poliovirusHepatitis 轮状病毒轮状病毒 Rotavirus人人T-淋巴细胞病毒淋巴细胞病毒禽传染支气管炎病毒禽传染支气管炎病毒水生动物皮瘤中的红色水生动物皮瘤中的红色病毒病毒HIVHIVHIV感染人体组织感染人体组织HIV颗粒电镜颗粒电镜甲型甲型H1N1流感病毒流感病毒烟草花叶病毒烟草花叶病毒病毒侵染对花瓣颜色的影响病毒侵染对花瓣颜色的影响大大肠肠杆杆菌菌噬噬菌菌体体烟草花叶病毒烟草花叶病毒(TMV)n1892，俄国伊万诺夫斯基研究烟草花叶病，在给圣彼德，俄国伊万诺夫斯基研究烟草花叶病，在给圣彼德堡科学院简短报告中，结尾引人注目：堡科学院简短报告中，结尾引人注目：“本人已发现感染本人已发现感染花叶病的叶汁，即使通过了细菌过滤器，也仍具有传染的花叶病的叶汁，即使通过了细菌过滤器，也仍具有传染的性质性质”n证明了感染因子是过滤因子即过滤性病毒（证明了感染因子是过滤因子即过滤性病毒（virus）。）。n1935，美国学者斯坦来（，美国学者斯坦来（Stanley）从烟草花叶病病叶中）从烟草花叶病病叶中提取出病毒结晶，进一步试验证明病毒结晶具有致病力。提取出病毒结晶，进一步试验证明病毒结晶具有致病力。n获获1946诺贝尔化学奖。诺贝尔化学奖。第一节第一节 病毒的形态、结构、分类病毒的形态、结构、分类n概念概念病毒病毒(Virus)是一类比细菌更微是一类比细菌更微小小、只含只含一类核酸一类核酸(DNA or RNA)、在活细胞内进行、在活细胞内进行专性寄生的专性寄生的非细胞形态的微生物非细胞形态的微生物。基本特征基本特征1.个体极小个体极小，电镜下可见，电镜下可见，nm级。级。2.无细胞结构无细胞结构，化学组成简单，化学组成简单核酸（核酸（DNA或或RNA)和蛋和蛋白质白质。3.无独立的繁殖能力，只在特定寄主细胞内以无独立的繁殖能力，只在特定寄主细胞内以核酸复制方式核酸复制方式繁殖。繁殖。4.专性寄生专性寄生： 不含能量代谢、核酸复制、蛋白质合成的酶系，不不含能量代谢、核酸复制、蛋白质合成的酶系，不能独立地进行代谢活动，不能离开活体而生存。能独立地进行代谢活动，不能离开活体而生存。 不能在无生命的人工合成培养基生长。不能在无生命的人工合成培养基生长。5.在活体外只有化学大分子特性，不表现任何生命特征；可在活体外只有化学大分子特性，不表现任何生命特征；可长期保持浸染力长期保持浸染力。 这种潜在的感染能力很容易变性失活。这种潜在的感染能力很容易变性失活。6.对干扰素敏感，对抗生素不敏感对干扰素敏感，对抗生素不敏感。大小差别较大。最大的痘病毒大小差别较大。最大的痘病毒300nm；最小的鼻病毒；最小的鼻病毒30nm几种病毒的相对大小和形态几种病毒的相对大小和形态Vaccinia virusVaccinia virus 痘苗病毒（投影技术）痘苗病毒（投影技术）一、病毒的形态一、病毒的形态多面体状多面体状球、卵圆、砖形球、卵圆、砖形杆状杆状杆、线形杆、线形蝌蚪状蝌蚪状蝌蚪蝌蚪腺病毒腺病毒多瘤病毒多瘤病毒塞蒙利克森林塞蒙利克森林病毒病毒形态形态n病毒在病毒在衣壳衣壳上排列不同，有上排列不同，有3种形态结构：种形态结构： 螺旋对称螺旋对称 烟草花叶病毒烟草花叶病毒 二十面体对称二十面体对称 （容积大、居多）（容积大、居多） 腺病毒腺病毒 复合对称：螺旋对称复合对称：螺旋对称 +多面体对称多面体对称 T4 噬菌体噬菌体 螺旋对称螺旋对称 二十面体对称二十面体对称 复合对称复合对称螺旋对称型螺旋对称型： 蛋白质亚基有规律蛋白质亚基有规律地沿着中心轴地沿着中心轴（核酸）（核酸）呈螺旋排列，进而形成呈螺旋排列，进而形成高度有序、对称的稳定高度有序、对称的稳定结构。结构。以以TMVTMV为例，为例，21302130个成皮个成皮鞋状的蛋白质亚基（衣壳鞋状的蛋白质亚基（衣壳粒）逆时针方向螺旋排列，粒）逆时针方向螺旋排列，共共130130圈圈, ,每每3 3个核苷酸与个核苷酸与一个蛋白质亚基相结合。一个蛋白质亚基相结合。 二十面体对称型二十面体对称型：由由20个等边三角形围成，具个等边三角形围成，具12个顶角，个顶角，30条边。条边。五邻体：五邻体：12个顶角上的衣壳个顶角上的衣壳粒。粒。六邻体：平面上的衣壳粒。六邻体：平面上的衣壳粒。若以一定数目的亚基排列成具有一定表面积的立方对称实体，以若以一定数目的亚基排列成具有一定表面积的立方对称实体，以二十面体容积为最大，能包装更多的病毒核酸，所以病毒壳体多二十面体容积为最大，能包装更多的病毒核酸，所以病毒壳体多取二十面体对称结构。取二十面体对称结构。典型例子：腺病毒典型例子：腺病毒（adenovirus）、）、脊髓灰质炎病毒脊髓灰质炎病毒（poliovirus）、）、 多瘤病毒多瘤病毒（polyomavirus） 具有复合对称结构的典型例子是有尾噬菌体具有复合对称结构的典型例子是有尾噬菌体（tailed phage），），壳体由壳体由头部和尾部头部和尾部组成。包装有病毒核酸的头部组成。包装有病毒核酸的头部通常呈二十面体对称，尾部呈螺旋对称。砖形的通常呈二十面体对称，尾部呈螺旋对称。砖形的痘苗病毒痘苗病毒（Vaccinia virus），也属于复合对称形。，也属于复合对称形。二、病毒的结构二、病毒的结构 刺突（刺突（spike）：包膜或核衣壳上的突起。）：包膜或核衣壳上的突起。核心核心 DNA 或或 RNA 衣壳（粒）衣壳（粒） 蛋白质蛋白质核衣壳核衣壳裸露病毒裸露病毒 包膜包膜 （子粒）（子粒）脂双层膜和糖蛋白脂双层膜和糖蛋白包膜病毒包膜病毒病毒粒子：成熟、有感染性的结构完整的病毒颗粒。病毒粒子：成熟、有感染性的结构完整的病毒颗粒。spike protein衣壳粒衣壳粒衣壳衣壳核衣壳核衣壳刺突蛋白刺突蛋白包膜包膜三、病毒的化学组成三、病毒的化学组成蛋白质：蛋白质： DNA ( ds DNA, ss DNA ) 或或 RNA ( ds RNA, ss RNA ) 植物病毒多为植物病毒多为RNA 细菌病毒多为细菌病毒多为DNA 动物病毒（含昆虫病毒）部分为动物病毒（含昆虫病毒）部分为DNA，部分为，部分为RNA 核酸有正链、负链的区别。核酸有正链、负链的区别。 凡碱基序列与凡碱基序列与mRNA相同，相同，为正链。为正链。 凡碱基序列与凡碱基序列与mRNA互补，互补，为负链。为负链。作用：（作用：（1）构成衣壳，保护内部核酸。）构成衣壳，保护内部核酸。 （2）决定感染寄主的专一性。）决定感染寄主的专一性。 （3） 决定病毒的抗原性。决定病毒的抗原性。 （4）有些是酶，与感染和复制有关。）有些是酶，与感染和复制有关。脂类和糖类脂类和糖类: 包膜中包膜中病毒核酸：病毒核酸：(1)按核酸结构分为按核酸结构分为8个群：个群：单链单链DNA病毒（病毒（ssDNA）双链双链DNA病毒（病毒（dsDNA）DNA和和 RNA反转录病毒反转录病毒双链双链RNA病毒（病毒（dsRNA）负链单链负链单链RNA病毒（病毒（-ssRNA）正链单链正链单链RNA病毒（病毒（+ssRNA）裸露裸露RNA病毒病毒亚病毒因子亚病毒因子(2)病毒病毒蛋白质蛋白质结构蛋白结构蛋白非结构蛋白非结构蛋白病毒基因组编码的，在病毒复制过程中产生并病毒基因组编码的，在病毒复制过程中产生并具有一定功能，但并不结合于毒粒中的蛋白质。具有一定功能，但并不结合于毒粒中的蛋白质。如如复制酶复制酶和和装配酶装配酶等。等。构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质。如需的蛋白质。如壳体蛋白壳体蛋白、包膜蛋白包膜蛋白、存在于、存在于毒粒中的酶等。毒粒中的酶等。包膜包膜（envelope）：）：有些病毒核衣壳包裹着的一层脂蛋白有些病毒核衣壳包裹着的一层脂蛋白膜，膜，是病毒以出芽（是病毒以出芽（budding）方式成熟时，由细胞膜衍方式成熟时，由细胞膜衍生而来的生而来的。有维系毒粒结构，保护病毒核壳的作用。有维系毒粒结构，保护病毒核壳的作用。包膜子粒包膜子粒（peplomer）：）：病毒包膜上具有功能性的突起物，病毒包膜上具有功能性的突起物，又叫刺突蛋白（又叫刺突蛋白（spike protein），），往往是由糖蛋白构成，往往是由糖蛋白构成，具有多种生物学活性，是启动病毒感染所必需的，也是很具有多种生物学活性，是启动病毒感染所必需的，也是很重要的抗原性物质。重要的抗原性物质。（3）包膜结构（脂质和糖类）包膜结构（脂质和糖类）有包膜的螺旋毒粒有包膜的螺旋毒粒非细胞生物非细胞生物病毒：至少含有病毒：至少含有核酸和蛋白质核酸和蛋白质两种成分两种成分亚病毒亚病毒类病毒类病毒:只含只含具单独侵染性具单独侵染性的的RNA组分组分拟病毒拟病毒:只含只含不具单独侵染性不具单独侵染性的的RNA组分组分朊病毒朊病毒:只含只含蛋白质蛋白质一种组分一种组分四、病毒的分类四、病毒的分类真病毒真病毒含核酸和蛋白质的一类病毒。含核酸和蛋白质的一类病毒。亚病毒亚病毒只有侵染性只有侵染性RNA分子、只有侵染性蛋白质分子或分子、只有侵染性蛋白质分子或包裹在真病毒颗粒中的卫星病毒（或卫星核酸）。包裹在真病毒颗粒中的卫星病毒（或卫星核酸）。马铃薯纺锤病马铃薯纺锤病类病毒侵染类病毒侵染的植物的植物第二节第二节 病毒的增殖病毒的增殖 吸附吸附 穿入穿入生物合成生物合成（核酸复制、蛋白质的合成）（核酸复制、蛋白质的合成）释放（释放（ 寄主细胞裂解）寄主细胞裂解）步骤：步骤：脱壳脱壳装配装配（成熟）（成熟）病毒表面结构与宿主特异性位点结合病毒表面结构与宿主特异性位点结合（非）特异性吸附（非）特异性吸附直接穿入；融合；吞饮直接穿入；融合；吞饮核酸复制、核酸复制、mRNA转录、转录、蛋白质的合成蛋白质的合成在宿主细胞内，将核酸在宿主细胞内，将核酸和蛋白质组装为成熟的和蛋白质组装为成熟的病毒粒子（毒粒）病毒粒子（毒粒）破胞释放（无包膜）；破胞释放（无包膜）；出芽释放（有包膜）出芽释放（有包膜）n病毒感染敏感宿主细胞后，病毒核酸进入病毒感染敏感宿主细胞后，病毒核酸进入细胞，通过其复制与表达产生子代病毒基细胞，通过其复制与表达产生子代病毒基因组和新的蛋白质，然后由这些新合成的因组和新的蛋白质，然后由这些新合成的病毒组分装配（病毒组分装配（assembly）成子代毒粒，）成子代毒粒，并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种特殊繁殖方式称做特殊繁殖方式称做复制（复制（replication）。）。 1. 吸附吸附 直接穿入直接穿入 融合融合 胞吞胞吞 2. 穿入和脱壳穿入和脱壳 dsDNA 病毒病毒：痘病毒、疱疹病毒、腺病毒、痘病毒、疱疹病毒、腺病毒、T-even噬菌体等噬菌体等亲代亲代 DNA早期转录早期转录mRNA早期翻译早期翻译早期蛋白早期蛋白子代子代DNA复制复制装装配配成成熟熟子代病毒粒子子代病毒粒子晚期转录晚期转录mRNA晚期翻译晚期翻译晚期蛋白晚期蛋白亲代亲代 子代子代 3. 生物合成生物合成 烟草花叶病毒的装配：烟草花叶病毒的装配：RNA穿过螺旋的中心孔并在生长端形成一个穿过螺旋的中心孔并在生长端形成一个可移动的环。可移动的环。 4. 装配装配 大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放 5. 释放释放 有包膜病毒的装配与释放有时有包膜病毒的装配与释放有时也是同时完成的也是同时完成的有包膜的动物病毒是在从宿主细胞核芽出或细胞质膜芽出的过程有包膜的动物病毒是在从宿主细胞核芽出或细胞质膜芽出的过程中裹上包膜而形成包膜病毒中裹上包膜而形成包膜病毒动物接种动物接种 鸡胚培养鸡胚培养细胞培养细胞培养第三节第三节 病毒的培养病毒的培养n 细胞病变效应（细胞病变效应（CPE）n 红细胞吸附红细胞吸附n 被感染的细胞出现包涵体被感染的细胞出现包涵体n 干扰现象干扰现象n 细胞代谢改变细胞代谢改变病毒在细胞内增殖病毒在细胞内增殖CPE正常细胞正常细胞CPE（cytopathogenic effect） ：病毒感染细胞后造成细胞死：病毒感染细胞后造成细胞死亡，溶解，细胞质空泡形成（空斑）、细胞变圆、脱落、凝集亡，溶解，细胞质空泡形成（空斑）、细胞变圆、脱落、凝集或互相融合。或互相融合。狂犬病毒包涵体（狂犬病毒包涵体（Negri body）巨细胞病毒包涵体巨细胞病毒包涵体n干扰现象干扰现象：两种病毒同时或先后感染：两种病毒同时或先后感染同一细胞同一细胞，一种病，一种病毒增殖可抑制另一种的增殖。毒增殖可抑制另一种的增殖。n干扰素干扰素（interferon，IFN）：病毒诱导细胞产生抑制病：病毒诱导细胞产生抑制病毒复制的糖蛋白。毒复制的糖蛋白。类型类型名称名称商品名商品名生产公司生产公司自然干扰素自然干扰素人体淋巴母细胞人体淋巴母细胞样多亚型样多亚型IFN-N1惠福仁惠福仁葛兰素威康公司（英葛兰素威康公司（英国）国）人体白细胞重组人体白细胞重组干扰素干扰素中国人干扰素基中国人干扰素基因克隆因克隆IFN1b赛若金赛若金深圳科兴生物制品有深圳科兴生物制品有限公司限公司IFN-2a罗扰素罗扰素罗氏公司（瑞士）罗氏公司（瑞士）IFN2b干扰能干扰能先灵葆雅（美国）先灵葆雅（美国）复合干扰素复合干扰素C-IFN干复津干复津安进公司（美国）安进公司（美国）第四节第四节 干扰现象和干扰素干扰现象和干扰素 IFN 种类种类 nIFN-：由白细胞产生：由白细胞产生 nIFN-：由成纤维细胞产生：由成纤维细胞产生 nIFN-：由活化的：由活化的T淋巴细胞产生淋巴细胞产生 IFN 性质性质 n抗病毒范围广抗病毒范围广 n抗病毒作用有种属特异性（同种细胞高于异抗病毒作用有种属特异性（同种细胞高于异种细胞，人，灵长类动物产生的种细胞，人，灵长类动物产生的IFN才对人才对人起作用）起作用） n对病毒的增殖有干扰作用对病毒的增殖有干扰作用 n对病毒的蛋白质合成起作用对病毒的蛋白质合成起作用 n免疫调节和抗肿瘤作用免疫调节和抗肿瘤作用1、组成：、组成：蛋白质和核酸蛋白质和核酸2、基本形态：、基本形态：蝌蚪形蝌蚪形、微球形（无尾）和纤丝微球形（无尾）和纤丝形（无头）。形（无头）。n尾髓尾髓:中空，中空，DNA由此由此进入细胞。进入细胞。n基板基板: 六角形盘状物，六角形盘状物，其上有刺突、尾丝。其上有刺突、尾丝。n刺突刺突: 有吸附功能。有吸附功能。n尾丝尾丝: 有识别吸附功能有识别吸附功能第五节第五节 噬菌体噬菌体噬菌体与宿主菌噬菌体与宿主菌n根据噬菌体对寄主细胞的反应，区分为：根据噬菌体对寄主细胞的反应，区分为： 毒（烈）性噬菌体（毒（烈）性噬菌体（virulent phage） 温和噬菌体（温和噬菌体（temperate phage）1.毒性噬菌体的复制周期毒性噬菌体的复制周期 吸附吸附 侵入侵入病毒大分子的合成病毒大分子的合成（核酸复制、蛋白质的合成）（核酸复制、蛋白质的合成）组装（成熟）组装（成熟）释放（释放（ 寄主细胞裂解）寄主细胞裂解）T4噬菌体感染噬菌体感染E.coli的扫描电镜照片的扫描电镜照片吸附吸附尾钉固着尾钉固着尾鞘收缩尾鞘收缩尾管穿入尾管穿入DNA注入注入1.mRNA转录转录2.早期蛋白质翻译早期蛋白质翻译3.病毒病毒DNA复制复制4.mRNA转录转录5.晚期蛋白质翻译晚期蛋白质翻译酶酶结构蛋白结构蛋白T4噬菌体的装配是噬菌体的装配是一个极为复杂的自一个极为复杂的自我装配的过程我装配的过程噬菌体的效价噬菌体的效价n噬菌斑（噬菌斑（plaque）：毒性噬菌体感染敏感细菌，毒性噬菌体感染敏感细菌，在营养琼脂平板上形成一个个透明的空斑。在营养琼脂平板上形成一个个透明的空斑。n噬菌体的效价噬菌体的效价：每毫升试样噬菌斑形成单位：每毫升试样噬菌斑形成单位（plaque forming unit，PFU）数）数。大肠杆菌大肠杆菌噬菌体的噬菌体的噬菌斑噬菌斑荧光假单荧光假单胞菌的噬胞菌的噬菌斑菌斑效价测定效价测定-双层平板法双层平板法噬菌体噬菌体细菌培养物细菌培养物培养液培养液营养琼脂平板营养琼脂平板细菌培养细菌培养液变清亮液变清亮细菌平板成细菌平板成为残迹平板为残迹平板2%琼脂琼脂培养基培养基0.8%琼脂琼脂培养基培养基1939年，年，Max Delbruck & Emory Ellis：E. coli / bacteriopage1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞；、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞；2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体中和未吸附的噬菌体）；3、将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新释放、将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新释放 的噬菌体感染其它细胞；的噬菌体感染其它细胞；4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体含量对噬菌体含量 进行计数进行计数）；）；5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出 病毒特征性的繁殖曲线；病毒特征性的繁殖曲线；该实验标志着分子病毒学、分子生物学和分子遗传学的建立该实验标志着分子病毒学、分子生物学和分子遗传学的建立Max Delbruck因此荣获因此荣获1969年年Nobel Prize。一步生长曲线一步生长曲线潜伏期：潜伏期：从噬菌体吸附细菌从噬菌体吸附细菌到细菌细胞释放新的噬菌体到细菌细胞释放新的噬菌体前的时期前的时期.(.(噬菌斑数是噬菌噬菌斑数是噬菌体数体数, ,也就是感染噬菌体的也就是感染噬菌体的细菌数细菌数).).裂解期：裂解期：曲线直线上升曲线直线上升, ,子子代噬菌体不断释放到培养基代噬菌体不断释放到培养基中中, ,直到达到极限直到达到极限. .稳定期稳定期: :感染细胞后复制的感染细胞后复制的子代噬菌体全部释放，噬菌子代噬菌体全部释放，噬菌斑数稳定，一次感染结束。斑数稳定，一次感染结束。n裂解量裂解量: :每一受感染细胞所释放的新的噬菌每一受感染细胞所释放的新的噬菌体的平均数。体的平均数。 稳定期噬菌斑数稳定期噬菌斑数 裂解量裂解量 = = 潜伏期噬菌斑数潜伏期噬菌斑数n不同的噬菌体或同不同的噬菌体或同种噬菌体感染敏感菌后种噬菌体感染敏感菌后所释放的噬菌体数不同所释放的噬菌体数不同, ,与噬菌体种类、宿与噬菌体种类、宿主细胞菌龄以及环境因数有关。主细胞菌龄以及环境因数有关。温和噬菌体（溶源性噬菌体）的复制周期温和噬菌体（溶源性噬菌体）的复制周期n温和噬菌体：温和噬菌体：噬菌体感染细胞后，核酸整噬菌体感染细胞后，核酸整合到宿主的核合到宿主的核DNA上，随宿主上，随宿主DNA复制而复制而同步复制同步复制。一般情况。一般情况不引起寄主细胞裂解不引起寄主细胞裂解。n原噬菌体（或前噬菌体）：原噬菌体（或前噬菌体）：整合在宿主核整合在宿主核DNA上的噬菌体的核酸。上的噬菌体的核酸。 n溶原性细菌：溶原性细菌：核染色体上整合有前噬菌体核染色体上整合有前噬菌体的细菌。可正常生长繁殖而不被裂解。的细菌。可正常生长繁殖而不被裂解。 n特性特性：1. 可稳定遗传。可稳定遗传。子代细菌都含有子代细菌都含有原噬菌体，原噬菌体，均具有溶原性。均具有溶原性。n 2. 可自发或诱发细胞裂解，或自然遗失前噬可自发或诱发细胞裂解，或自然遗失前噬菌体（复愈）菌体（复愈）n自发自发:温和噬菌体的核酸也可从宿主温和噬菌体的核酸也可从宿主DNADNA上脱落下上脱落下来，恢复原来的状态，进行大量的复制，变成烈来，恢复原来的状态，进行大量的复制，变成烈性噬菌体，自发裂解几率性噬菌体，自发裂解几率1010-2-21010-5 -5 。n诱发诱发:用化学、物理方法诱导用化学、物理方法诱导n复愈复愈:自然遗失前噬菌体，但不发生自发裂解和诱自然遗失前噬菌体，但不发生自发裂解和诱导裂解导裂解 n3. 溶原性细菌对同源噬菌体具有免疫性。溶原性细菌对同源噬菌体具有免疫性。溶原菌溶原菌对其本身产生的噬菌体或外来的同源的噬菌体不对其本身产生的噬菌体或外来的同源的噬菌体不敏感，对同源噬菌体具免疫性，对非同源噬菌体敏感，对同源噬菌体具免疫性，对非同源噬菌体没有免疫性。没有免疫性。 n4. 溶源转变溶源转变溶原菌整合了温和噬菌体的核酸溶原菌整合了温和噬菌体的核酸而使自己产生一些新的生理特征。而使自己产生一些新的生理特征。温和噬菌体的代表温和噬菌体的代表噬菌体：噬菌体： 整合状态存在整合状态存在 插入寄主细胞染色体的特定位点插入寄主细胞染色体的特定位点 （gal 和和 bio之间）之间）Pi噬菌体：噬菌体： 独立存在于寄主细胞中独立存在于寄主细胞中 随机插入随机插入寄主细胞的染色体上寄主细胞的染色体上噬菌体的应用噬菌体的应用n1.细菌的鉴定和分型细菌的鉴定和分型n2.耐药性细菌的治疗耐药性细菌的治疗n3.分子生物学研究工具分子生物学研究工具基因克隆载体基因克隆载体n4.遗传工程遗传工程噬菌体展呈文库，人工筛选抗体噬菌体展呈文库，人工筛选抗体n5.发酵中严防噬菌体污染发酵中严防噬菌体污染六、流感病毒、乙肝病毒、六、流感病毒、乙肝病毒、HIV（血凝素刺突）（血凝素刺突）（神经氨酸酶刺突）（神经氨酸酶刺突）（基质蛋白）（基质蛋白）（脂双分子层）（脂双分子层）（多聚酶）（多聚酶）（核糖核蛋白）（核糖核蛋白）流感流感病毒病毒1 2435 6 7 8PB2PB1RNPRNAM2M1NAHA分节段的分节段的（-） SSRNAPARNA多聚酶多聚酶核糖核蛋白（核糖核蛋白（RNP）流感病毒的形态与结构流感病毒的形态与结构流感病毒分型流感病毒分型n根据RNP和M蛋白（基质蛋白）的不同，可分为甲（A），乙（B），丙（C）型。n根据HA和NA分为若干亚型 （H1H13，N1N9）。 HA，NA易变异，而引起大流行。 1997年，香港地区禽类流感病毒（H5N1）传染给人，引起全球恐慌。H7N9H3N2 H1N1基因轉移禽禽人人 ( H7N9具人體接受器具人體接受器 )豬豬致病性：致病性： 传染源传染源-病人或病毒携带者病人或病毒携带者致病机理致病机理-病毒不入血病毒不入血病毒病毒-呼吸道呼吸道-毒素样物质进入血液毒素样物质进入血液全身中毒症状全身中毒症状局部粘膜上皮炎症局部粘膜上皮炎症 同型有同型有1-2年免疫力年免疫力 免疫物质为免疫物质为sIgA及中和抗体（及中和抗体（IgG 、IgM） 免疫性：免疫性：流感病毒的致病性与免疫流感病毒的致病性与免疫n药物治疗药物治疗l离子通道阻断剂：金刚烷胺 l神经氨酸酶（NA）抑制剂 ：达菲l以血凝素为靶点的抗流感药物：Stachyflin n接种疫苗接种疫苗 流感病毒灭活疫苗 病毒表面抗原疫苗 减毒活疫苗流感病毒的防治流感病毒的防治乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus）三种颗粒结构模式图和电镜照片）三种颗粒结构模式图和电镜照片管形颗粒管形颗粒小球形颗粒小球形颗粒 Dane颗粒颗粒大球形颗粒大球形颗粒有感染性有感染性易发展成慢性肝炎，部分可转化为肝硬化或肝易发展成慢性肝炎，部分可转化为肝硬化或肝癌，全球癌，全球HBVHBV携带者超携带者超2 2亿，中国亿，中国1.21.2亿。亿。1 1、形态结构：电镜下呈、形态结构：电镜下呈3 3种颗粒种颗粒 球状，直径约球状，直径约42nm42nm，是完整的，是完整的HBVHBV颗粒；颗粒； 小球形颗粒，直径约小球形颗粒，直径约22nm22nm，仅由表面抗原，仅由表面抗原 HBsAg HBsAg 组成，不含组成，不含DNADNA，无感染性；，无感染性； 管形颗粒，聚合的小球形颗粒。管形颗粒，聚合的小球形颗粒。检查检查“两对半两对半”HBsAgHBsAg，抗，抗-HBs-HBs：表面抗原及其抗体：表面抗原及其抗体 HBeAgHBeAg，抗，抗-HBe-HBe：e e抗原及其抗体抗原及其抗体 抗抗-HBc-HBc：核心抗原：核心抗原抗原组成：具有双层的衣壳，外衣壳相当于包膜，上有抗原组成：具有双层的衣壳，外衣壳相当于包膜，上有HBsAgHBsAg，内衣壳上有内衣壳上有HBcAgHBcAg、HBeAgHBeAg HBsAgHBsAg ：乙肝表面抗原，又称：乙肝表面抗原，又称“澳抗澳抗”，HBsAgHBsAg是是HBVHBV感染的感染的主要标志，可刺激机体产生保护性抗体；主要标志，可刺激机体产生保护性抗体； HBcAgHBcAg ：核心抗原：核心抗原, ,抗原性强，抗原性强，不易在血清中查到不易在血清中查到，刺激机，刺激机体产生抗体产生抗- -HBcHBc 。 HBeAgHBeAg： 可溶性蛋白，游离于血清中。可溶性蛋白，游离于血清中。人类免疫缺陷病毒（人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency human immunodeficiency virusvirus，HIVHIV） 属于反转录病毒科（属于反转录病毒科（RetroviridaeRetroviridae），导致人类免疫缺失），导致人类免疫缺失病，又称病，又称获得性免疫缺失综合症获得性免疫缺失综合症（acquired immune acquired immune deficiency syndromedeficiency syndrome，AIDSAIDS）。）。19831983年由法国巴斯德研年由法国巴斯德研究所究所MontagnierMontagnier发现。发现。1 1、形态结构：球状，直径约、形态结构：球状，直径约100-120nm100-120nm；2 2、核心：两条相同的、核心：两条相同的RNARNA链；同时含有反转录酶、链；同时含有反转录酶、RNARNA酶酶H H等；等；3 3、衣壳：两层衣壳，内层衣壳含、衣壳：两层衣壳，内层衣壳含p24p24蛋白，外层衣壳含蛋白，外层衣壳含p17p17蛋白；蛋白；4 4、刺突：糖蛋白（、刺突：糖蛋白（glycoproteinglycoprotein，gpgp）刺突，）刺突，gp120gp120和和gp41gp41，分子量分别为分子量分别为120 000120 000和和41 00041 000，感染时首先通过，感染时首先通过gp120gp120与与淋巴细胞表面的淋巴细胞表面的CD4CD4受体结合，再经膜融合进入。受体结合，再经膜融合进入。HIVvirus反转录病毒反转录病毒gp120gp41刺突刺突2条条HIVHIV感染人体组织感染人体组织病毒与细胞生物的比较病毒与细胞生物的比较 细胞生物细胞生物 病毒病毒n个体大小个体大小 一般一般0.2 m 一般一般0.2 mn细胞结构细胞结构 有有 无无n核酸类型核酸类型 DNA和和RNA DNA或或RNAn独立代谢独立代谢 能能 不能不能n营养类型营养类型 自养自养n 异养（寄生、腐生和兼性）异养（寄生、腐生和兼性） 异养（寄生）异养（寄生）n繁殖方式繁殖方式 细胞分裂细胞分裂 复制后装配复制后装配 n对抗生素对抗生素 敏感敏感 不敏感不敏感n对干扰素对干扰素 不敏感不敏感 敏感敏感 项目项目细菌细菌立克次体立克次体衣原体衣原体支原体支原体病毒病毒1、个体大小、个体大小（nm）2、显微镜可、显微镜可见性见性3、能否通过、能否通过细菌滤器细菌滤器4、格兰氏染、格兰氏染色反应色反应5、细胞壁、细胞壁6、繁殖方式、繁殖方式7、培养方法、培养方法8、核酸种类、核酸种类9、对抗生素、对抗生素反应反应10、对干扰、对干扰素反应素反应500-2000光镜可见光镜可见不能通过不能通过G+或或G胞壁坚韧胞壁坚韧二分法裂殖二分法裂殖人工培养基人工培养基DNA和和RNA敏感敏感敏感敏感200500光镜可见光镜可见不能通过不能通过G同细菌相似同细菌相似二分法裂殖二分法裂殖宿主细胞宿主细胞DNA和和RNA敏感敏感不敏感不敏感200300光镜可见光镜可见能过滤能过滤G同细菌相似同细菌相似二分法裂殖二分法裂殖宿主细胞宿主细胞DNA和和RNA敏感敏感敏感敏感125250光镜勉强可光镜勉强可见见能过滤能过滤G无胞壁无胞壁二分法裂殖二分法裂殖人工培养基人工培养基DNA和和RNA敏感（青霉敏感（青霉素例外）素例外）不敏感不敏感250需电镜观需电镜观察察能过滤能过滤无细胞结无细胞结构构复制复制宿主细胞宿主细胞DNA或或RNA不敏感不敏感敏感敏感掌握：掌握：n病毒的概念，形态、结构和分类；病毒的概念，形态、结构和分类；n病毒的增殖；病毒的增殖；n病毒的干扰现象和干扰素；病毒的干扰现象和干扰素；n噬菌体的生物学性状、噬菌体与宿主菌细胞的关系。噬菌体的生物学性状、噬菌体与宿主菌细胞的关系。熟悉：熟悉：n病毒感染的检查方法和防治；病毒感染的检查方法和防治；n常见病毒。常见病毒。了解：了解：n病毒的人工培养；病毒的人工培养；n病毒的致病性和机体的免疫性；病毒的致病性和机体的免疫性；n病毒对理化因素的抵抗力及抗病毒的化学治疗剂；病毒对理化因素的抵抗力及抗病毒的化学治疗剂；n噬菌体的分离与测定，噬菌体的应用。噬菌体的分离与测定，噬菌体的应用。主要内容主要内容