水稻品种抗水稻黑条矮缩病鉴定和介体飞虱体内病毒的定量测定

水稻品种抗水稻黑条矮缩病鉴定和介体飞虱体内病毒的定量测士定水稻黑条次8缩病毒(RBSDV属于呼肠孤病毒科，斐济病毒属，引起的水稻黑条矮缩病是东亚和东南亚地区最严重的水稻病害之一。近年来该病害尤其在稻麦轮作区的发病率迅速上升,严重威胁水稻、小麦和玉米的安全生产。灰飞虱(LaodelphaxstriatellusFallen)和其他2种飞虱白脊飞虱(UnkanodessapporonaMatsumura)白带飞虱(U.albifasciaMatsumura)均以持久增殖型方式传播RBSDV此外，由白背飞虱(SogatellafurciferaHorvath)传播的南方黑条矮缩病毒(SRBSDV于2001年在中国广东省阳江市首次发现，已经传播蔓延到中国南部、越南和日本,成为杂交水稻的主要威胁。本研究旨在通过筛选的水稻品种对RBSDV勺抗病性，并探索不同介体飞虱体内病毒含量的时空动态。在温室对收集自河南、山东和辽宁等地的66个水稻品种进行了抗RBSD除定。结果表明，两优3399、大粮207、X00&宁粳4号、圣稻301和两优1129等7个水稻品种表现抗病；沈农1406、D264博377、中稻1号、春潮88、临香1号、圣稻15号、苏秀9号、苏秀10号、郑稻19、徐稻7号、津优9702、原稻108、苏秀326、原早稻3号、X007和扬两优6号等16个水稻品种表现为中抗,其他品种表现为中感或高感。大田抗病性鉴定与温室抗病性鉴定具有明显的正相关性(P=0.0003)。另外，本研究成功利用实时定量PCR(qRT-PCR)TaqMant针法检测定量了水稻中RBSDV勺拷贝数，抗感水稻品种中RBSDV勺拷贝数与其抗病性具有显著的相关性。利用绝对定量qRT-PCR寸整头介体昆虫或其不同器官进行定量检测RBSDV的拷贝数，结果表明，仅在灰飞虱中检测到RBSDV头灰飞虱中RBSDV勺拷贝数随时间延长增多，说明了RBSDVE介体灰飞虱体内存在明显的复制。与其它器官相比，在灰飞虱的后肠中RBSDV勺拷贝数最大。从后肠中检测到病毒的4天后，在血淋巴和脂肪体检测到RBSDV,跃后可在唾液腺中检测到。所有器官中的拷贝数呈线性相关，说明了RBSDVfc不断的增殖移动。传毒试验表明,经8天的潜伏期后RBSDVHS到了健康植株。灰飞虱唾液腺的病毒拷贝数与传毒效率表现为显著的相关性(r2=0.9351,P<0.0001)。使用qRT-PCR或常规RT-PCRft另外两种非介体昆虫白背飞虱和体内检测不到RBSDV对不同介体飞虱体内的SRBSD也进行了定量检测，结果表明灰飞虱和白背飞虱均可获得SRBSDVB是与白背飞虱相比灰飞虱体内的病毒拷贝数较低。另外,灰飞虱和白背飞虱的后肠中SRBSD骑贝数具有显著差异(P<0.0001)。第6天SRBSDV扩散到白背飞虱的血淋巴和脂肪体，但是不能扩散到灰飞虱的血淋巴和脂肪体。这些结果说明了因为灰飞虱后肠中SRBSD较低拷贝数是灰飞虱不能传播SRBSDVJ原因。传毒试马表明,8天获毒期后仅有白背飞虱能传播SRBSDVP灰飞虱不能传毒。此外，白背飞虱唾液腺的SRBSD据贝数与传毒效率具有显著的相关性(r2=0.7808,P=0.0036)。本文所获得的这些结果为水稻品种的合理利用提供了科学依据。不同介体飞虱体内病毒含量的时空动态研究明确了昆虫介体内的病毒拷贝数需要达到一定,为阐明介体昆虫传毒的机理奠定了基础。