生物生物技术实践 4、5 DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取 选修1

专题4、5DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取考纲内容能力要求命题分析实验：(1) 蛋白质的提取和分离(2)DNA 的粗提取与鉴定(3) 从生物材料中提取某些特定的成分实验与探究能力实验与探究能力实验与探究能力新课标卷以非选择题的形式考查本部分内容，特别是生物材料中某些成分的提取考查相对较多。2017 年考查了植物有效成分提取的相关内容。考纲导读一、DNA 和蛋白质技术1.DNA 的粗提取与鉴定(1)实验原理0.14 mol/LDNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同，浓度为_时其溶解度最小。DNA 不溶于酒精溶液。蓝色杂质DNA 与二苯胺在沸水浴中呈_。(2)实验步骤：选材、制备鸡血细胞液破碎细胞，获取含DNA 的滤液去除滤液中的_DNA 的析出与鉴定。2.多聚酶链式反应扩增 DNA 片段(1)PCR 原理：在一定的缓冲溶液中提供_、分别与两条模板链结合的两种引物、_、耐热的DNA 聚合酶，同时控制温度使 DNA 复制在_反复进行。(2)PCR 的反应过程：变性_延伸。DNA 模板四种脱氧核苷酸体外复性3.血红蛋白的提取和分离相对分子质(1)凝胶色谱法：也称分配色谱法，是根据_分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的移动速度较慢，而相对分子质量较大的无法_，移动速度较快。进入凝胶内部(2)缓冲溶液：能够抵制外界的_对溶液 pH的影响，维持 pH 基本不变。酸和碱电场(3)电泳：带电粒子在_的作用下发生迁移的过程。量的大小(4)实验操作：凝胶色谱柱的装填样品处理及粗分离：红细胞的洗涤血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液透析。凝胶色谱柱操作：凝胶色谱柱的制作_样品的加入和洗脱。纯度鉴定：用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。提取成分提取方法实验流程玫瑰精油的提取水蒸气蒸馏法鲜玫瑰花清水水蒸气蒸馏油水混合物 分离油层 除水 玫瑰油橘皮精油的提取压榨法石灰水浸泡漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮油胡萝卜素的提取萃取法胡 萝 卜 粉 碎 干 燥 萃取过滤浓缩胡萝卜素二、植物有效成分的提取判断正误1.蒸馏法的实验原理是利用水蒸气将芳香油溶解下来，再把水蒸发掉，剩余的就是芳香油。()2.提炼玫瑰精油的玫瑰花应在花开的初期采取，因为此阶段的花含油量最高。()3.油水混合物中加入无水 Na2SO4，有利于分离油层。()4.乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取。()5.萃取的效率主要取决于萃取时的温度和时间。()答案：1.2.3.4.5.方法步骤添加物质及目的操作要求及目的取用与要求目的要求目的1.制备鸡血细胞液取0.1 g/mL的柠檬酸钠100 mL于500 mL烧杯中，加鸡血180 mL柠檬酸钠可防止凝血缓慢搅拌混 匀 血 液 与柠 檬 酸 钠 ，防凝血离心或置于冰箱使 血 细 胞 与血浆分离考点一DNA 的粗提取与鉴定考点梳理1.实验流程方法步骤添加物质及目的操作要求及目的取用与要求目的要求目的2.提取鸡血细胞的细胞核物质20 mL蒸馏水使血细胞吸水涨破，释放核物质搅拌：单向、快速、5 min加 速 血 细 胞破裂过滤：12层纱布滤取含DNA的滤液3.溶解细胞核内的DNA2 m o l / L 的 NaCl溶液40 mL溶解DNA搅拌：单向、缓慢、1 min促进DNA溶解4.析出含DNA的黏稠物加蒸馏水至黏稠物不再增加为止降低NaCl溶液浓度，析出DNA搅拌：单向、轻缓混 匀 溶 液 ，促 进 析 出 完整DNA分子5.滤取含DNA的黏稠物34层纱布过滤获取含DNA的黏稠物(续表)方法步骤添加物质及目的操作要求及目的取用与要求目的要求目的6.将DNA的黏稠物再溶解2 m o l / L 的 NaCl溶液20 mL再溶解DNA单向搅拌使 黏 稠 物 尽可 能 多 地 溶解于溶液中7 . 过 滤 含 有DNA的NaCl溶液34层纱布过滤滤取含DNA的滤液8.提取含杂质较少的DNA加入冷却的、体 积 分 数 为95%的酒精50 mL让部分杂质溶于酒精，析出含杂质较少的DNA搅拌：单向促 进 杂 质 溶解、DNA析出用玻璃棒卷起丝状物，用滤纸吸水获得DNA(白色 乳 状 丝 状物)(续表)方法步骤添加物质及目的操作要求及目的取用与要求目的要求目的9.DNA的鉴定向2支20 mL试管各加0.015 mol/L的NaCl溶液一支对照，一 支 溶 解DNA(作溶媒)搅拌促进DNA溶解各加4 mL二苯胺试剂作 为 D N A鉴定剂沸水浴5 min，冷却观察颜色DNA所在试管 溶 液 变 蓝色(续表)2.实验关键(1)取材不能用哺乳动物的血细胞，原因是其成熟红细胞无细胞核。(2)获取 DNA 时要向鸡血细胞液中加入足量的蒸馏水，以使细胞膜和核膜破裂，把核内物质释放出来。(3)实验中有 6 次搅拌，除最后一次搅拌外，前 5 次搅拌均要朝一个方向。并且在析出 DNA、DNA 再溶解和提取 DNA 中，各步骤搅拌都要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，防止 DNA分子断裂。(4)两次加蒸馏水的目的：第一次加蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂(注：植物细胞是用洗涤剂溶解细胞膜)。第二次加蒸馏水是为了稀释 NaCl 溶液，析出 DNA。(5)用纱布过滤 3 次的目的：过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，提取细胞核物质(滤液)。滤取0.14 molL1NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)。过滤溶有DNA的2 molL1NaCl溶液(滤液)。(6)4 次用 NaCl 溶液的目的：(7)DNA 易吸附在玻璃容器上，所以实验中最好使用塑料烧杯、试管、容器，以减少 DNA 的损失。加2 molL1NaCl溶液，溶解提取的细胞核物质。(加蒸馏水)0.14 molL1NaCl溶液使DNA析出。加2 molL1NaCl溶液，溶解滤取的DNA黏稠物。用2 molL1NaCl溶液，溶解丝状物用于鉴定DNA。3.去除滤液中杂质的其他方案(1)方案一：用嫩肉粉(蛋白酶)，它能水解蛋白质，但对 DNA没有影响。(2)方案二：加热至 60 75 ，大多数蛋白质不能忍受60 75 的高温而变性，但 DNA 不变性。高考探究考向DNA 的粗提取与鉴定典例 1某实验小组以洋葱组织为实验材料，进行“DNA粗提取与鉴定”的实验，实验主要过程如下图所示，请回答下列问题：(1) 步骤一中需加入一定量的洗涤剂和_ 对洋葱组织进行处理，加入前者是为了瓦解细胞膜结构，加入后者的目的是_。将搅拌和研磨后的物质进行过滤，即可得到含有 DNA 的滤液。(2)步骤二是 DNA 纯化过程中的关键步骤，可以采用以下几种不同的方法：滤液中 NaCl 浓度在 0.14 mol/L 时可分离出 DNA，若要再次提纯，需要将其溶解在_mol/L 的 NaCl 溶液中；通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，其目的是_；将得到的 DNA 粗提取物放在 6075 水浴中保温 1015 min，蛋白质被破坏，但仍能得到纯度较高的 DNA，说明了DNA_。(3)步骤三中向滤液中加入体积分数为 95%的酒精的目的是_，依据的原理是_。得到纯净的 DNA 后，可利用 DNA 与_在沸水浴条件下发生显色反应来对其进行鉴定。答案(1)食盐(氯化钠)溶解 DNA分解其中的蛋白质具有较高的稳定性(或耐(2)2较高温度)(3)析出 DNA性并与 DNA 分离DNA 不溶于酒精，但酒精可以使蛋白质变二苯胺考向预测1.自 1973 年博耶和科恩成功地使外源基因在原核细胞中表达开始，基因工程正式问世了，人们对 DNA 的关注也越来越多。分析并回答下列问题：(1)从生物组织中提取 DNA 时，若要获取含有 DNA 的滤液，需破碎细胞；若为鸡的成熟红细胞，可以加入一定量的蒸馏水，原因是细胞_而涨破；若为植物细胞可以加入一定量的洗涤剂。(2)利用 DNA 和 RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，可以将它们分离。如 DNA 的溶解度在 NaCl 溶液浓度为_时最小，可以使 DNA 与其他杂质初步分离。(3)为了纯化提取的 DNA，可以用体积分数为 95%的酒精去除滤液中的杂质。其原理是 DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，可以推测溶于酒精中的物质可能有_。(4)一般 DNA 的鉴定试剂为_，沸水浴后溶液中有DNA 则颜色为_。解析：(1)常采用吸水的方法使动物细胞涨破。(2)当 NaCl溶液浓度为 0.14 mol/L 时，DNA 溶解度最低。(3)DNA 不溶于酒精，而蛋白质、脂质等杂质溶于酒精。(4)DNA 在沸水浴条件下与二苯胺反应呈蓝色。答案：(1)吸水(2)0.14 mol/L (3)蛋白质、脂质(4)二苯胺蓝色2.某生物兴趣小组开展 DNA 粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各 2 份，每份 10g。剪碎后分成两组，一组置于 20 ，另一组置于20 条件下保存 24 h。DNA 粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入 15 mL 研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第二步：先向 6 只小烧杯中分别注入 10 mL 滤液，再加入20 mL 体积分数为 95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。保存温度/材料花菜辣椒蒜黄2020第三步：取 6 支试管，分别加入等量的 2 mol/L NaCl 溶液溶解上述絮状物。DNA 检测：在上述试管中各加入 4 mL 二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热 5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。注：“”越多表示蓝色越深。分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题名称是_。(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少_。(3)根据实验结果，得出结论并分析。结论 1：与 20 相比，相同实验材料在20 条件下保存，DNA 的提取量较多。结论 2：_。针对结论 1，请提出合理的解释：_。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和 DNA均不相溶，且对 DNA 影响极小。为了进一步提高 DNA 纯度，依据氯仿的特性，在 DNA 粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：_，然后用体积分数为 95%的冷酒精溶液使 DNA 析出。解析：(1)从表格可以看出，该实验有两个自变量：材料和保存温度。所以该探究性实验课题名称为探究不同材料和不同保存温度对 DNA 提取量的影响。低温抑制了相关酶的活性，DNA 降解速度慢，提取的 DNA 较多。(2)第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取 DNA 絮状物，所以若速度快，易造成 DNA 断裂。(3)本实验的结论可从两个方面来考虑：相同材料在不同温度下的结论；不同材料在相同温度下的结论。(4)氯仿能使蛋白质变性，而对 DNA 影响极小，所以可将第三步获得的溶液与氯仿混合，又因为氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，DNA 位于上清液中。答案：(1)探究不同材料和不同保存温度对 DNA 提取量的影响(2)DNA 断裂(3)等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的 DNA 量最多低温抑制了相关酶的活性，DNA 降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液考点二蛋白质的提取和分离(以血红蛋白的提取和分离为例)、PCR 反应的过程及结果考点梳理1.蛋白质的提取和分离(1)样品处理红细胞的洗涤：目的是去除杂蛋白，分离时采用低速短时间离心，直至上清液不再呈现黄色，表明红细胞已洗涤干净。血红蛋白的释放：在蒸馏水和甲苯(溶解细胞膜)的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。(2)粗分离分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合溶液离心后，将试管中的液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。透析：取 1 mL 的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有 300 mL 的物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液中，透析 12 h，去除样品中相对分子质量较小的杂质。分离的种类相对分子质量直径大小运动方式运动速度运动路程洗脱次序大分子物质大大于凝胶颗粒空隙垂直向下的运动较快较短先小分子物质小小于凝胶颗粒空隙垂直向下、无规则扩散的运动较慢较长后(3)纯化：利用凝胶色谱柱可对血红蛋白进行纯化。凝胶色谱法分离蛋白质的原理，见下表：(4)纯度鉴定：使用最多的是 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(可测定蛋白质的相对分子质量)。项目DNA粗提取与鉴定血红蛋白的提取与分离材料选择鸡血细胞等含DNA丰富的生物组织哺乳动物成熟的红细胞破碎细胞方式动物细胞：吸水涨破植物细胞：洗涤剂、食盐搅拌研磨等加蒸馏水和甲苯搅拌去除杂质方式用不同浓度的NaCl溶液处理用酒精处理用蛋白酶处理等透析处理纯化处理鉴定方式二苯胺，沸水浴SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法DNA 与血红蛋白的提取和分离过程的比较2.PCR 反应的过程及结果(1)过程变性：当温度上升到 90 以上时，双链 DNA 解聚为单链。复性：温度下降到 50 左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链 DNA 结合。延伸：温度上升到 72 左右，溶液中的四种脱氧核苷酸(A，T，G，C)在 DNA 聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的 DNA 链。(2)结果PCR 一般要经历三十多次循环，每次循环都包括变性、复性、延伸三步。两引物之间的固定长度的 DNA 序列呈指数扩增。项目细胞内DNA复制PCR技术不同点解旋在解旋酶作用下边解旋边复制80 100 高温解旋，双链完全分开酶DNA解旋酶、DNA聚合酶Taq DNA聚合酶引物RNADNA或RNA温度体内温和条件高温相同点需提供DNA复制的模板四种脱氧核苷酸作原料子链延伸的方向都是从5端到3端(3)细胞内 DNA 复制与 PCR 技术的比较高考探究考向蛋白质的提取和分离、PCR 反应的过程及结果典例 2随着人类基因组计划的推进和多种生物基因组测序工作的完成，人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质进行研究时，首先要获得纯度较高的蛋白质。下图是某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”：请回答下列有关问题：(1)样品处理中红细胞的洗涤要用_反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度 pH 7.0 的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是_。(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是_，若要尽快达到理想的透析效果，可以_(写出一种方法)。(3) 血红蛋白的纯化是通过_ 法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。(4)电泳利用了待分离样品中各种分子的_等的差异产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。(5)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如下图所示，由图可知携带者有_种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是_。解析(1)洗涤红细胞所用的溶液是生理盐水，根据渗透作用原理，将红细胞置于低渗溶液中，红细胞会吸水涨破，释放出血红蛋白。(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是除去样品中的小分子杂质；可通过增加缓冲液的量或及时更换缓冲液等方法缩短透析时间，能尽快达到理想的透析效果。(3)样品纯化是通过凝胶色谱法去掉分子量较大的杂质。凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢；相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快。(4)由于各种分子带电性质以及分子大小、形状等的差异，在电泳过程中会产生不同的迁移速度，从而实现各种分子的分离。(5)根据图示可知，镰刀型细胞贫血症的携带者含有两种血红蛋白，原因是携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，分别控制合成两种不同的蛋白质。答案(1)生理盐水(2)除去小分子杂质渗透(作用)原理增加缓冲液的量或及时更换缓冲液(3)凝胶色谱法(4)带电性质以及分子大小、形状携带者具有一对等位基因，可以控制合成两种不同(5)2的蛋白质考向预测3.红细胞中含有大量的血红蛋白，红细胞的功能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带 O2 和 CO2，可选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：_ 、 _ 、 _ 和_。(2)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是_。以上所述的过程即是样品处理，它包括_、_、收集血红蛋白溶液。(3)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定。样品纯化的目的是_。(4)电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及_、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。解析：血红蛋白提取和分离的程序可分为四步，分别是：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。在实验中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固；样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、收集血红蛋白溶液。样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去。电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。答案：(1)样品处理粗分离纯化纯度鉴定(2)防止血液凝固红细胞的洗涤血红蛋白的释放(3)通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去(4)分子的大小提取方法水蒸气蒸馏法压榨法有机溶剂萃取法实验原理利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂获得芳香油方法步骤水蒸气蒸馏分离油层除水过滤石灰水浸泡、漂洗压榨、过滤、静置再次过滤粉碎、干燥萃取、过滤浓缩考点三植物有效成分的提取考点梳理1.植物有效成分提取的三种方法的比较提取方法水蒸气蒸馏法压榨法有机溶剂萃取法适用范围适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中优点简单易行，便于分离生产成本低，易保持原料原有的结构和功能出油率高，易分离局限性水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题分离较为困难，出油率相对较低使用的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量(续表)(1)水蒸气蒸馏法要适当延长蒸馏时间，温度不能太高。(2)压榨法必须在常温条件下进行，否则会影响产物的产量和质量；压榨时原料必须要浸透，这样压榨时不会滑脱，出油率高，不堵塞筛眼；使用石灰水充分浸泡原料的目的是破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。高考探究考向植物有效成分的提取方法和过程典例 3(2015 年新课标卷)回答与胡萝卜素有关的问题：(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是_(填“-胡萝卜素”“-胡萝卜素”或“-胡萝卜素”)，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子_，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为_，胡萝卜素是_(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。(2)工业生产上，用养殖的盐藻作为原料提取胡萝卜素时，_(填“需要”或“不需要”)将鲜活的盐藻干燥。(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的_作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是_。答案(1)-胡萝卜素维生素 A 夜盲症非挥发性(2)需要(3)乙酸乙酯萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂考向预测4.(2017 年新课标卷)绿色植物甲含有物质 W，该物质为无色针状晶体，易溶于极性有机溶剂，难溶于水，且受热、受潮易分解。其提取流程为：植物甲粉碎加溶剂振荡收集提取液活性炭处理过滤去除活性炭蒸馏( 含回收溶剂)重结晶成品。回答下列问题：(1)在提取物质 W 时，最好应选用的一种原料是_(填“高温烘干”“晾干”或“新鲜”)的植物甲，不宜选用其他两种的原因是_。(2)提取物质 W 时，振荡的作用是_。(3)活性炭具有很强的吸附能力，在提取过程中，用活性炭处理提取液的目的是_。(4)现有丙酮(沸点 56 )、乙醇(沸点约 78 )两种溶剂，在提取物质 W 时，应选用丙酮作用提取剂，理由是_。(5)该实验操作过程中应注意的事项是_(答出两点即可)。解析：(1)依据题干信息(受热、受潮易分解)进行推断即可得知。(2)振荡易于溶解，是基本实验知识。(3)根据题干信息可知，活性炭具有吸附能力，杂质色素易被吸附。(4)根据题干信息，受热易分解，所以选择沸点低的丙酮。(5)根据题干信息，受热易分解，所以注意温度控制；丙酮易挥发，对人体有害，所以操作时注意通风；因为要减少物质 W 的分解，所以操作要快。答案：(1)晾干高温烘干过程中，植物甲中的物质 W 易被破坏；新鲜的植物甲含水量高，用于提取的极性有机溶剂会被稀释，进而降低对物质 W 的提取效果(2)使原料和溶剂充分混匀(3)去除提取液中的色素(4)丙酮沸点低于乙醇，蒸馏时物质 W 分解较少(5)在温度较低的情况下操作，注意通风5.(2016 年吉林长春质检)玫瑰在人们生活中具有多种用途。某同学进行玫瑰的组织培养和玫瑰精油的提取实验，请回答下列问题：(1)在进行玫瑰组织培养时，可以选取生长旺盛的嫩枝作_，并要进行_处理。(2)玫瑰组织培养接种操作前，用体积分数为 70%的_将工作台擦拭一遍。接种后，还要经过_、_和栽培才能得到开花的玫瑰。(3)某同学用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油，简便易行的是_(填“水中”“水上”或“水气”)蒸馏的方法。蒸馏过程中需要监控蒸馏温度和时间，原因是_。(4)使收集的乳浊液水油分层，需向其中加入_。要除去分液得到的油层中的水分，需向其中加入无水_。解析：(1)植物组织培养时，应选取生长旺盛的嫩枝作外植体，并对外植体进行消毒处理。(2)在接种操作前要用体积分数为 70%的酒精擦拭工作台，接种完成后还要经过培养、移栽和栽培等过程。(3)用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油时，最简便易行的是水中蒸馏的方法，在蒸馏过程中，如果蒸馏温度太高、时间太短，产品品质就较差，因此要控制好蒸馏温度和时间。(4)向收集的乳浊液中加入 NaCl，可以增加水层的密度，利于油水分层，向分离出的油层中加入无水 Na2SO4 可以除去油层中的水分。答案：(1)外植体消毒(2)酒精培养移栽(3)水中如果温度太高，时间太短，产品质量就比较差(4)NaCl Na2SO46.(2017 年广西桂林考前模拟)根据相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：(1)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和_，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏法_(填“适合”或“不适合”)胡萝卜素的提取，原因是_；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用_法，并以_样品作为对照。(2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是_，原理是_。用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入 NaCl 的作用是_。常用于分离油层和水层的器皿是_，分离出的油层中加入无水 Na2SO4 的作用是_。解析：(1)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前将胡萝卜粉碎和干燥。粉碎是为了增加胡萝卜与萃取剂的接触面积，干燥是为了去掉水分，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏法不适合胡萝卜素的提取，因为水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出；胡萝卜素的鉴定通常采用纸层析法；胡萝卜素能够溶解在层析液中，并随层析液在滤纸上扩散。同一物质在层析液中的溶解度相同，在滤纸上的扩散速率也相同；不同物质在层析液中的溶解度不同，在滤纸上的扩散速率也不同。因此，可以用标准样品(胡萝卜素)做对照，分析出萃取样品是否含胡萝卜素和杂质。(2)由于薄荷油易溶于酒精等有机溶剂，因此提取薄荷油可以用萃取法，萃取时可以以酒精作为萃取剂；用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入 NaCl 的作用是使溶液分层；常用于分离油层和水层的器皿是分液漏斗；分离出的油层中含有少量水分，可以加入无水 Na2SO4 吸去水分。答案：(1)干燥不适合水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出纸层析标准的胡萝卜素(2) 酒精薄荷油易溶于有机溶剂酒精中使溶液分层分液漏斗除水7.请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题：(1)植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、蒸馏法和_。(2)芳香油溶解性的特点是_。(3)对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物质获得乳状液可采用的方法是_。(4)得到的乳状液加入 NaCl 并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的上层，原因是油层的密度比_。加入 NaCl的作用是_。(5)从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水 Na2SO4，该试剂的作用是_。(6)某同学在实验中设计了下图所示装置提取玫瑰精油，指出该装置中的两个错误。错误 1：_。错误 2：_。解析：题图为水蒸气蒸馏装置，温度计用来测定水蒸气的温度，图中温度计位置过低，应将温度计的下端与蒸馏烧瓶的支管口下沿保持水平。图中冷凝管进水口、出水口接错，冷凝管进水口应在下，出水口在上。(2)不溶于水，易溶于有机溶剂答案：(1)萃取法(3)过滤(4)水层小增加水层密度，促使油和水分层(或增加盐的浓度，促使油和水分层)(5)吸收芳香油中残留的水分(6)温度计位置太靠下冷凝器进水口、出水口接错