常规HE染色过程中分色蓝化透明方法的改良

| 维普资讯 h ttp:/江西医学醍学握 閃时 年第 翻 卷荃P朋心锂d吕曲血前砂JiMgjfi 20ti氛屮1翻用唱常规HE染色过程中分色蓝化透明方法的改良章克萍x龙飞s汪雁*（南药丸学孔医学院组织胚胎实验室；b.医学院医学生物学实验皇，南昌330006）关锂词】分色匸蓝也丁透朋方法t改* HF染色中图分类号匕R329-33文献标识码 B 文章编号.1000-2294(2008)04-008501普通HE坯色是纽织学、擒理常技术员最龜本讷技术技 能，也是组织学，柄理学等形応学教学与科研杓最基本方法, HE染色步骤往组织切片制那过理中显得尤其啦薑* 一张 HE離色切片的质撬好坏不仪堰决于苏木精、伊红业履的质 忻*期色时间，染色温匪在髄大程摩上还取决于染怛过程中 分色潘、蓝化锻釣性质和类型的选掙反分色，蓝化的时间* 传蜒的分色酸为九5】的盐酸酒精打蓝化殺为】虱 水薄我口讥左底期组织切片HE期枚过程中作者卷现*虽 然组织切片在苏木精染液中苕芭较好，但一旦经竝6$ 、滋盐酸洒梢分牝液分色后堀胞檢若色偏鞭*啊代用盐酸洒 带分色时间砸也不好華握分色时间t分色后的切片再进人 】的融水申蓝代，娴胞搔虽憨能返蓝但冇些切片出现脱薄 现象.尤其是进行免疫粗化的切片脱落也其*为r克麗这些 不口塞响因我和现彖越免技术人刖接触过務的二甲址，柞者 反复实验+摸索出用5%杓冰醋酸洒梢溶敌代替1%的熬酸 洒幣作分色槪卡用本地普通白来水或5H为7. 2的慕懾40 代瞽1帰的氮水魁行蓝化切片染色脱水后不经二甲笨透明 克接用中性树脸透明与封片方法，取得较好效果。现报皆如 下.1材料与方法L1材料水!K心肌纽织切片石蜡切片（5 pm）.冰冻切片（5】2 pTEjfHE 色常用试刑：酒蒂，苏木梢坯我.复制伊虹染 液m、5%刖冰醋醜洒带溶液*普通自米水、5%1%盐酸 酒帝、】蚓飙水、蕪谓水、中tt树胶.1.2方法石蜡切片常规二甲苯脱蜡、下打酒梢水化至自来水冲 抚、糕懦水標Stf?人苏乐権染色从5 mb.白来水冲洗 1 mim人5蜒的冰酣酸分化諦潼中分化30-40 sh再白来水 冲探冰醋酸分化液*放趾白米水中蓝化至細胞孩显醉艳的蓝 色遊1 h且上人伊红染色2-3 m讪上行樺度酒稍U0%、 80% .95% 100%）脱水*吹干或滩址吸干俎织切片.中性树 胶透明与期片。同时对黑组用0. 5%1蜒盐酸酒梢分化 廉J %奴水蓝化*上行梯度酒帝脱水，二甲笨透明，中性树胶 掛片2结眾用改隧袪进行细胞核分色和蓝比染芭出米的切片和用 传统方袪的组职切片相比*有明显的优毎：细胞檯染強成鲜 艳胸蓝色*胞啓胞盾对比层次分明（见封二图】八染色右的 组织切片検时间陞用不易掉色*保存时间较疑而且切片在 染色过觀中很少出现脱片现誥用来做免疫组化的切片邮腿 谏持旳不掉片.切片染色脱水JS不经二甲韭透明*盲接 用中性树胶封片姑果不比传统制柞切片效黑建3讨论组织HE坯色帯的分色是染色成败的关魅之一，苏木梢 染色用，必须经过權性分色液分芭分色就是利用低灌庭的 战能阳止苏木带的色羸根勺铝毗物压成蓝色处淀色武分色 剂是在组织染色后用于除去姐织切片上过農的染料*在分 色过程中甫于水合氮离子及氮氮离于在用于分芭的幡媒 内常比枉何染料离子的弥散分化快，因血使应染色部分看 色恰当，蛋染的组织结构显色均匀晴晰，苴它成分老芭达到 量低限度幻传统使用6 5%1%盐酸洒梢柞分色制它 与组织切片作用时间短.一股只需10-20 s不辱，在染脸过 程中比妆难卒擴组規分化程度尤耳足初学者.面采用5% 的冰醋战藕梢柞分色刑，虽时间荊长点，它和凱駅柞用比勰 酸温利容沏第握其分色程度井貝经它分邑后的纽织切片， 细胞核蜒色比盐酸分色的更加鲜艳，因为少址杓冰耕酸在细 施樓染色中能起蝶染柞用.蓝化是指用苏木梢樂液染色的组织切片因经过酸性液 分化百细胞檢由原来的障蓝色*变成紫蓝色*需用翱粧性水 蒋就潦洗羸存的開酸恒具由紫蓝懂为应冇的鮮艳蓝色苏 木轻染色这一晁蓝过程是HE染色所必需的，蓝化的冃的是 为了确运苏木精染色程度和确矩分北是否恰当.同时还能 増强染色的强度他苏木稱色素根与细胞複右色部分结舍得 扯加牢固.蓝化是H1- &色中灼一个觅燮环节.蓝化灌般 偏剰縄性.但切片组织在算性帑淞中睜易脫落尤其在】烯 私水中.冋为1 %的氮水的pH值为了.6左右，切片绍织械容 弱脱笫，有人用PBS Kit I妬帆肚腔行蓝化* 做果也较好* 但PRS成本鬲，带冇等离子，对粥红处色不利. 而本地普逊自来水的PH價一般为人2左右*带微弱的贓 性.不容励引起切片组织胶耕，不过甫鑒蓝化的吋间较丧，但 它径济卖嵐*无不H影响经白来水蓝化曲切片不容易荐色. 因为组织切片在口来水中提泡的时间校按.能沏底洗脱切片 经分化所带的残存妁酸.本察爭年来用普逋口来水蓝化，切 片第鱼质St优底染色脱水后的切片可无需经二甲苯透明吹于诫用滤紙 吸干后頁接用中性man即可后显微税检效果和蛭下转第89页）