中科院生物化学与分子生物学历年考研真题(1996年)

中科院1996生化与分子一、是非题：10分。每题答对得1分，打错到扣半分，不答者倒扣。1、米氏常数（Km）是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。2、与肌红蛋白不同，血红蛋白由四个亚基组成，因此提高了它与氧的结合能力，从而增加了输氧的功能。3、维生素D和甲状腺激素的受体都在靶细胞核内。4、凝胶过滤法可用于测定蛋白的分子量，分子量小的蛋白质先从柱上流出，分子量大的后流出。5、两条单独肽链经链间二硫交联，组成蛋白质分子，这两条肽链是该蛋白的两个亚基。6、哺乳动物无氧下不能存活，因为葡萄糖酵解不能合成ATP。7、体细胞（双倍体）DNA含量约为生殖细胞DNA含量的两倍。8、真核生物的基因不组成操纵子，不形成多顺子mRNA。9、光合作用的总反应中，H2O中的氧参入到葡萄糖中去。10、真核细胞和原核细胞核糖体中的RNA的数目和种类是相同的。二、选择题：20分。答错不倒扣分。1、从血红蛋白规水解得到的氨基酸的手性光学性质：A都是L型的； B。都是左旋的； C。并非都是L型的； D。有D型的也有L型的。2、生物膜的厚度在 A100nm左右 B10nm左右 C1nm左右3、真核生物中经RNA聚合酶催化转录的产物是 AmRNA BhnRNA CrRNA和5SRNA DtRNA和5SRNA4、消化系统的水解酶，大多是以非活性的酶原形式合成出来的，但也有例外，如A核糖核酸酶 B羟肽酶 C胃蛋白酶5、在染色体中DNA的构型主要是 AA型 BB型 CC型 DZ型6、超过滤于凝胶过滤A是两种性质不同，用处不同的蛋白质制备方法 B是一种性质，但表现方法不同的蛋白质制备方法C是同一种方法的两种名词7、研究蛋白质结构常用氧化法打开二硫键，所用的化学试剂是 A亚硝酸 B过氯酸 C硫酸 D过甲酸 8、雄激素对物质代谢最显著的一项重要作用是A促进肝脏糖原分解 B增加脂肪贮存 C加强蛋白质的同化作用 D。钾、钙、磷等物质的吸收9、核苷酸从头合成中，嘧啶环的1位氮原子来自 A天冬氨酸B赖氨酸C谷氨酰胺 D甘氨酸10、羧肽酶C专门水解C端倒数第二位是哪个氨基酸形成的肽链 A精氨酸 B赖氨酸 C脯氨酸11、将RNA转移到硝基纤维素膜上的技术叫ASouthern blotting BNorthern blotting CWestern blotting DEastern blotting12、甘氨酸的解离常数分别为K1=2.34和K2=9.60，它的等电点（PI）是A7.26 B5.97 C7.14 D10.7713、对一个克隆的DNA片段做物理图谱分析，需要用A核酸外切酶 B限制性内切酶 CDNA连接酶 D脱氧核糖核酸酶14、原核生物基因上游的TATA盒一般处于什么区 A-10 B-35 C-200 D1K15、通常使用什么测定多肽链的氨基末端 ACNBr B丹磺酰氯 C6N HCl D胰蛋白酶16、蛋白质的变形伴随着结构上的变化是A肽键的断裂 B丹基酸残基的化学修饰 C一些侧链基团的暴露 D二硫键的折开17、生物膜主要成分是脂质蛋白质，其主要通过什么相连接A氢键 B离子键 C疏水作用 D共价键18、粗糙型内质网系的主要功能是A糖类的合成 B脂类的合成 C分泌性蛋白质的合成 D必需氨基酸的合成19、脂肪酸的合成中，每次肽链的延长都需要什么参加A乙酰辅酶A B草酰乙酸 C丙二酸单酰辅酶A D甲硫氨酸20、PPGPP在下列情况下被合成A细菌缺乏氮源时 B细菌缺乏碳源时 C细菌在环境温度太高时 D细菌在环境温度太低时三、填空题 （6题共40空格，共40分）1、按劳取酬Michaelis公式，当V分别为0.9vmax和0.1Vmax时，它们相应的底物浓度的比值S0.9/S0.1应为 。2、染色质中的DNA主要是以与 结合成复合体的形式存在，并形成串珠状的 结构。3、一个有效的自杀性抑制必须具备： 。4、核酸中的嘌呤环有四个氮原子，生物合成时分别来自 、 和 。5、低密度脂蛋白的主要生理功能是 。6、核苷三磷酸在代谢中起着重要的作用。 是能量和磷酸基团转移的重要物质， 参与单糖的转变和多糖的合成， 参与卵磷脂的合成， 供给肽链合成时所需要的能量。7、镰刀性红细胞贫血症是一种先天遗传分子病，其病是由于正常血红蛋白分子中的一个 被 所置换。8、糖原酵解过程中的第一个酶是 ；它有A和B两种形式，有活性的是 形式，A和B的差别在于A形式是 。9、DNA B型右螺旋模型的螺距为 ，碱基转角为 ，碱基倾角为 。10、磷脂的脂肪酰链长度愈 ，膜的流动性愈大。11、核糖核苷二磷酸在和糖核苷酸还原酶作用下，生成脱氧核糖核苷二磷酸，需要 和 参与。12、已知真核基因顺式作用元件有：启动子、 和 等。13、作为信号跨膜传递的第二信使的物质有：cAMP、 、 和 等。14、一些生长因子受体酶的活性，如表皮生长因子（EGF）受体有 活性，转化生长因子（TGF）受体有 活性。15、用分光光度计测定蛋白质在280nm有吸收，主要是由于 和 残基侧链基团起作用。16、维持蛋白质构想的次级键主要有 、 和 。四、问答题（每题6分，共30分）1、任举一个例子来说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸顺列2、简述磷酸酯酶A2B、C和D的作用专一性与产物。3、简述关于酶作用专一性的学说。4、列出转录酶（Transcriptase）和逆转录酶（Reverse Transcriptase）的催化反应式。5、DNA复制的准确性是通过怎样的机制实现的。中科院1996年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学与分子生物学试题答案一、是非题减数分裂过程中DNA含量 细胞种类性原细胞初级性母细胞次级性母细胞性细胞DNA含量2a4a2aa 1、+；2、+ 肌红蛋白的氧结合曲线呈双曲线，而血红蛋白呈S形曲线。每个肌红蛋白分子仅有一个O2的结合位置。而血红蛋白分子是由四个亚基所组成，每一亚基均有一个O2的结合位置。肌红蛋白的功能是储备氧，只有当剧烈活动时血液输氧不足以补偿肌肉消耗而致局部氧分压很低的情况下，才放出氧来应急。血红蛋白的功能是运输氧，它既能在高氧分压条件下充分结合氧，又能在地氧分压条件下将大部分氧释放出来；3、+；4、- 凝胶过滤时，大分子因为不能进入分离介质内部而先被洗脱；5、- 亚基是专指具有四级结构的蛋白质中通过非共价键相互作用的蛋白质；6、- 一份子葡萄糖经无氧酵解可生成两分子ATP； 7、+（见下图）；8、+；9、- 在总反应中，掺入到葡萄糖中的氧来自CO2，不是H2O；10、- 完全不同，一般真核生物有四种RNA：28S，18S，5.8S，5S而原核生物有三种：23S，16S，5S。二、选择题1、A；2、B；3、D 真核生物RNA聚合酶的别名叫小分子RNA聚合酶，负责包括tRNA和5SrRNA在内的小分子RNA的合成；4、A 核糖核酸酶没有酶原形式，具有酶原形式的酶多数是蛋白酶，以免自溶；5、B；6、A 超滤指大分子不能通过滤膜，仅通过分子，而凝胶过滤时大分子不能进入分离介质，故先被洗脱；7、D；8、C 雄性激素对物质代谢最重要的作用就是促使蛋白质合成；9、A；10、C；11、B；12、B 甘氨酸的pI是其两个pK的平均值；13、B；14、A；15、B；16、C；17、C；18、C；19、C；20、A三、填空题1、81；2、组蛋白 核小体；3、无酶时不反应、被靶酶专一性的激活、与靶酶反应必须比解离更为迅速，即k1kdis；4、甘氨酸 天冬氨酸 2个谷氨酰胺的酰胺氮；5、转运内源胆固醇脂；6、ATP UTP CTP GTP；7、谷氨酸 缬氨酸；8、糖原磷酸化酶 A 磷酸化；9、3.4 36 0；10、短；11、硫氧还蛋白硫氧还蛋白还原酶；12、增强子 沉默子 终止子；13、cGMP IP3 Ca2+ 硝氨醇 甘油二酯；14、蛋白酪氨酸激酶 蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶；15、酪氨酸 色氨酸；16、氢键 离子键 疏水作用四、问答题1、基本来说蛋白质的一级结构决定其高级结构，不过是有条件的。如同样一条肽链，在存在变性剂的条件下是松散的。这里所说的蛋白质三级结构取决于它的氨基酸序列，只在生理条件下蛋白质的一级结构和其三级结构之间的特定对应关系。典型的例子是牛胰核糖核苷酶的二硫键被还原，肽链松散后，经适当的条件，致使肽链的二硫键正确配对，此时肽链仍能呈现具有生物活性的天然构象。当前有相当多的蛋白质工程的例子可以说明，肽链中某些残基的突变可以引起突变蛋白质的构象改变。2、磷脂酶A2专一水解磷酯C2位脂肪酸，产物为溶血磷脂脂肪酸；磷脂酶B可分别水解磷脂C1和C2位上两个脂肪酸，产物为溶血磷脂、脂肪酸、甘油磷脂含胆碱；磷脂酶C作用于磷脂C3的磷脂酰键，产物为甘油二酯和磷酸含氮碱；磷脂酶D作用于磷酸与含氮碱之间的酯键，产物是磷脂酸和含氮碱。3、酶作用的专一性学说的基本要点是，酶分子中存在有一个识别底物的结合位点，同时酶分子还存在着一个可以诱导底物结构发生变化的反映变化的催化位点。包括没作用的专一性学说在内的机体重的任何一种分子键的相互作用都是生物界和生物分子长期进化的结果。主要有：锁钥学说诱导契合学会说酶受底物诱导而变形张力学说底物变性以时应酶4、转录酶，即DNA指导下的RNA合成酶，催化的反映 mATP+nGTP+pCTP+qUTP=RNA+(m+n+p+q)Ppi逆转录酶即RNA指导下的DNA合成酶，此酶有三种活性，主要催化mdATP+ndGTP+pdCTP+qdUTP=DNA+(m+n+p+q)Ppi 逆转录酶的另外两个活性是水解和新合成DNA杂交中作为逆转录模板的RNA，以及指导有新合成的DNA复制DNA。5、DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出错，用RNA引用即使出现差错最后也要被DNA聚合酶切除，提高了DNA复制的准确性；DNA聚合酶本身具有校对作用，可以将不正确插入的核苷酸切除掉，重新加上正确的核苷酸。这样对每个核苷酸的掺入就有两次机会。首先按碱基配对原则，错误核苷酸插入的几率为10-410-5，然后DNA聚合酶本身的校对作用又可以是错误核苷酸掺入的几率为10-810-10。另外，DNA合成起始时，冈崎片段合成开始时都有RNA。由于RNA最终也要被切除掉，这样就提高了DNA复制的准确性。中科院1997生化与分子一、是非题。12分。每题答对得1分，打错到扣半分，不答者倒扣。答“是”写“+”，答“非”写“-”。1、因为丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸都是蛋白质磷酸化的位点，因此所有蛋白质激酶均能使蛋白质中这三种氨基酸残基磷酸化。2、蛋白质的变形作用的实质就是蛋白质分子中所有的键均被破环引起天然构象的解体。3、蛋白质分子中的结构域（domain）、亚基（subunit）、纹基（motif）都是相同的概念。4、水是不能通透纸双层膜的。5、蛋白激酶属于磷酸转移酶类，催化磷酸根共价转移到蛋白质分子上的反应。6、具有正协同效应的酶，其Hill系数总是大于1的。7、mRNA的编码区不含有修饰核苷酸。8、核糖上被甲基化的胞嘧啶核苷被表示为Cm。9、携带同一种氨基酸的不同tRNA称为tRNA的等受体，它们之间的差异在于反密码。10、植物能利用氨或硝铵为氮源合成氨基酸，但不能利用空气中的氮。11、逆转录酶仅具有RNA指导的DNA聚合酶的活性。12、氨基酸的碳骨架进行氧化分解时，先要形成能够进入三羧酸循环的化合物。二、选择题：20分。答错不倒扣分。1、在凝血过程中发挥作用的许多凝血因子的生物合成依赖于下述哪一种维生素A维生素K B维生素E C维生素C D维生素A2、目前已经知道某种金属离子在细胞信号传导使细胞供能时起十分重要作用，它是ANa+ BK+ CCa2+ DMg2+3、镰刀状细胞血病是最早被认识的一种分子病，它是由于血红蛋白的两条B链中的两个谷氨酸分别为下属的氨基酸所代替 A丙氨酸 B缬氨酸 C丝氨酸 D苏氨酸4、1996年P。C。Doherty和R。M。Zinkernagel因为下列哪一领域研究的重要贡献而获诺贝尔医学和生理学费 A发育生物学 B免疫学 C分子病毒学 D结构生活生物学5、形成稳定的肽链空间结构，非常重要的一点是肽键中的四个原子以及和相邻的两个碳原子处于A不断扰动状态 B可以相对自由旋转 C同一平面 D虽不同外界环境而变化的状态6、三羧酸循环中，下列哪一个酶不是调控酶A柠檬酸合成酶 B异柠檬酸脱氢酶 C苹果酸脱氢酶 D酮戊二酸脱氢酶7、以下酶中哪一个是属于黄素核苷酸与酶蛋白以共价键相连的ANADH脱氢酶 B甘油磷酸脱氢酶 C胆碱脱氢酶 D琥珀酸脱氢酶8、在酶的双倒数作图中，只改变斜率不改变横轴截矩的抑制剂属于A非竞争性抑制剂 B竞争性抑制剂 C反竞争性抑制剂9、A提高反应的活化能B降低反应的活化能C促使正向反应速度提高10、端粒酶（tolermerase）是属于 A限制性内切酶 BDNA聚合酶 CRNA聚合酶 D肽酰转移酶11、用寡聚脱氧核苷胸苷（Oligo dT）纤维素柱层析分离mRNA是属于A分配层析 B交换层析 C亲和层析 D薄版层析12、下列RNA中含修饰核苷酸最多的是 AmRNA BrRNA CtRNA D病毒RNA13、转录真核rRNA的酶是 ARNA聚合酶 BRNA聚合酶 CRNA聚合酶14、一个RNA片段AGGGCUGA，T1酶全酶切后HPLC分析可获得的峰的数量为 A2 B3 C4 D5 15、氨酰tRNA合成酶的底物数为 A1 B2 C3 D416、雌二醇生物合成的直接前体是 A雌酮 B孕酮 C睾酮 D雌三醇17、真核生物有DNA聚合酶、，其中主要负责ADNA的复制 B切除引物 C参与修复 D解开双螺旋18、长链脂肪酰CoA经氧化作用，生成乙酰CoA是在什么细胞器上进行的A微粒体 B内质网 C线粒体 D细胞膜19、DNA分子上能被依赖DNA的RNA聚合酶特意识别的部位是A衰减子 B操纵子 C启动子 D终止子20、哺乳动物在正常生理条件下，一般氨基酸的氨基被脱去，主要通过A氨基酸氧化酶的作用 B转录酶的作用C转氨酶和谷氨酸脱酶的联合作用 D谷氨酸脱氢酶的作用三、填空题 （20题共44空格，共44分）1、免疫球蛋白（IgG）含有两条高分子量的 和两条低分子量的 ，这些链通过 连接成Y字形结构，每个免疫球蛋白分子含有 抗原结构部位。2、真核细胞多肽全成的起始氨基酸均为 ，而原核细胞的起始氨基酸为 。3、蛋白质分子的二级结构和三级结构之间还经常存在两种结构组合体称谓 和 ，它们都可以充当三级结构的组合配件。4、糖肽连接键的类型有 ， 。5、G蛋白具有 酶的活性。6、1926年Sumner从刀豆中到了 酶结晶，从而第一次证明了酶的蛋白质本质。7、糖酵解的关键调控酶是 。果糖-2，6-二磷酸的作用是 糖酵解。8、判断一个酶的纯化步骤优劣的一般依据 的提高倍数和 的回收率。9、到目前为止发现的G蛋白偶联受体中大多数都是 结构。10、磷脂被磷脂酶C水解生成 和 。11、生物膜的主要组分是 和 。12、DNA空间结构模型中，双螺旋的直径为 ，碱基堆积距离为 ，两核苷酸之间的夹角为36，每对螺旋由10对碱基组成。13、一tRNA的反密码子为GGC，它可识别的密码子为 、 。14、多核苷酸磷酸激酶（PNKase）可以将32P-ATP的磷酸基转移到核酸链的 端，而标记RNA的3端常用 酸和5-32P标记的 。15、核酸的增色作用是由两条链间的 和同一条链 产生。16、mRNA上突变常可造成致死作用，但生物体可通过tRNA反密码子的突变而存活这种tRNA的突变又称 ，而这种tRNA称谓 tRNA。17、组氨酸的生物合成需要 以及 的N-C基团，因此组氨酸合成也可认为是嘌呤核苷酸代谢的一个分支。18、维生素B6有 、 、 。19、真核细胞染色质中的DNA主要是与 结合复合体，并形成半珠状 结构。20、核糖核苷二磷酸在和糖核苷酸还原酶作用下，生成脱氧核糖核苷二磷酸，这一过程还需要 和 参与。四、问答题。4题，共24分。K2K1E+S ES E+P1、用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原？如果要打开牛胰核糖核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还需要加入什么试剂？蛋白质变性时，为防止生成的-SH基重新被氧化，可加入什么试剂来保护？要测定蛋白质的二硫键位置，需用什么方法？请简述之。2、对于下列酶促反应，请用稳态方法推出米氏方程（写明推到过程）K33、简述真核生物RNA的种类及其主要功能。4、简述乳糖操纵子的调控机制。中科院1997年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学与分子生物学卷答案一、是非题1、+ 2、- 3、- 亚基与结构域有一定相似之处，但是结构域是一条肽链中的一个部分，通过共价键与其他部分连接，而亚基一定是通过非共价键与其它亚基相互作用。而模体则是在不同蛋白质中存在的一些序列或立体结构中类似的部分。4、+ 水是不能自由通过脂双层膜的，但是膜上具有特异的水通道。5、- 激酶催化的磷酸转移反应的磷酸基团不是游离的磷酸，而是来自ATP或GTP。6、+ 7、+ 8、+ 9、-tRNA等受体的结构差异大多数不反映在反密码子上，而在其他部分 10、+ 11、- 还具有DNA指导的DNA聚合酶和RnaseH等活性 12、+二、选择题1、A；2、C 钙调蛋白的发现，使得钙离子被确认为是一种细胞信号传导的载体，又被称为细胞信号载体；3、B；4、B；5、C；6、C；7、D；8、A；9、B；10、B；11、C；12、C；13、A；14、C；15、C 分别是氨基酸、ATP、tRNA；16、C；17、A DNA聚合酶具有细胞核合成DNA链的能力，但必须在由DNA聚合酶形成引物后形成；18、C；19、C；20、A三、填空题1、重链，轻链，二硫键，2；2、甲硫氨酸，N-甲酰甲硫氨酸；3、超二级结构，结构域；4、O-糖苷键，N-糖苷键；5、GTP水解酶；6、脲；7、6-磷酸果糖-1-激酶，增加；8、比活提高的倍数，活性回收率的高低；9、7次跨膜结构；10、二酰基甘油，磷酸碱基；11、磷脂，蛋白质；12、2nm，0.34nm；13、GCC，GCU；14、5，T4RNA连接酶，pCp/胞苷3，5-二磷酸；15、解链，断链；16、校正，校正；17、磷酸核糖焦磷酸/PRPP；18、吡哆醇，吡哆醛，吡哆胺；19、组蛋白，核小体；20、硫氧还蛋白，硫氧还蛋白还原酶四、问答题1、打开二硫键最正常用的方法是使用巯基试剂。如巯基乙醇，可是参与二硫键的2个半胱氨酸还原酶带有游离巯基的半胱氨酸。为了使还原反应顺利进行，通常加入高浓度的尿素等变性剂。加入过量的还原剂可以防止还原所得的巯基被重新氧化。如果不准备使肽链重新氧化，而是进一步进行化学结构的研究，可以将巯基转化为其他的修饰形式，例如和羧甲基化等烷化剂反应，另外还有甲酸氧化法和亚硫酸还原法等。2、ES复合物的形成速度为：dES /dt=K1（EES）SES复合物的分解速度为：-dES /dt=K2E+K-1ES在稳态条件下，ES复合物的形成速度等于分解速度：K1（EES）S=K2E+K-1ES即（EES）S/ ES =（K2+K-1）/K1若（K2+K-1）/K1=Km 即ES =E S/（Km+S）酶反应速度 v=K2ES 酶被底物饱和时E=ES 酶反应速度Vmax=K2ES=K2E由可得 v/Vmax=S/(Km+S)3、RNA主要包括r RNA ：作为装配者并具有催化作用；t RNA ：作为转换器，携带氨基酸并具有解译作用；m RNA ：作为信使，携带DNA的遗传信息并在蛋白质合成中作为模板。此外还包括反义RNA 。核酶等。总结可知RNA 有五大类功能：控制蛋白质的合成作用于RNA转录后加工修饰基因表达与细胞功能的调节生物催化与其他细胞持家功能遗传信息的加工与进化。4、乳糖操纵子由调节基因（R）、启动子（P）、操纵基因（O）和三个代谢乳糖的酶的结构基因：lacZ、lacY、lacA组成。lacZ编码-半乳糖苷酶，lacY编码-半乳糖苷通透酶，lacA编码-半乳糖苷转乙酰酶。在有葡萄糖的情况下，细菌不利用乳糖，此时，调节基因（R）表达的阻遏蛋白能与操纵基因（O）结合，阻断识别启动子（P）的RNA聚合酶通过操纵基因（O）而转录结构基因；葡萄糖耗尽时，乳糖被利用，此时乳糖可与阻遏蛋白形成复合物，RNA聚合酶于是能通过操纵基因（O）转录得到三个酶，其中，乳糖是诱导物，产物叫诱导酶。中科院1998生化与分子一、是非题：12题，共12分。1、糖蛋白中的糖肽连接键，是一种共价键，简称为糖肽键。 （ ） 2、电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同，即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法。（ ） 3、激素按其化学本质来说是有特定生理功能的多肽或蛋白质（ ） 4、激素是通过膜受体引发生物效应的。（ ） 5、真核细胞所有的细胞色素氧化酶都位于线粒体内膜上。（ ） 6、蛋白质生物合成之后的共价修饰，都属于不可逆的化学修饰。（ ） 7、核糖上被甲基化的胞嘧啶核苷被表示为Cm。（ ） 8、DNA固相机器合成时用的活化单体是dNTP。（） 9、tRNA只在蛋白质生物合成中起作用。（ ） 10、起转录调控作用的DNA元件都能结合蛋白质因子。（ ） 11、完成了水稻基因组物理图谱就可以宣布水稻遗传信息之谜破译了。（ ） 12、人休需要的烟酰胺可以由色氨酸来合成，因此在营养上色氨酸可以替代烟酰胺。（ ） 二、选择题：20题，每题1分，共20分。选择答案的号码必须填入（ ）中，答错不倒扣。 1、蛋白质在下列哪一种水解过程中，由于多数氨基酸被遭到不同程度的破坏，产生消旋现象。（） 酸水解； 酶水解； 碱水解； 2、胰岛素和表皮生长因子的受体实际上是一种酶，它们是：（ ）磷酸化酶； 蛋白水解酶； 酪氨酸激酶 3、要断裂由甲硫氨酸残基的羧基参加形成的肽键，可用：（ ）胰蛋白酶； 尿素； 溴化氢； 4、在测定蛋白质一级结构时，为了对二硫键进行定位，需将含二硫键的肽段分离，此时可用下列哪种方法。 过甲酸氧化； 对角线电泳； 硫基化合物还原。 5、下列哪一种是目前研究蛋白质分子空间结构最常用的方法 X光衍射法；圆二色性；荧光光谱 6、如果某个单底物酶促反应是二级反应， E+S Kcat ESP那么决定其催化反应速度的常数是：（） Km; Ks; Kcat; Kcat/Km。 7、酶促反应降低反应活化能的能量来源于：（ ） 底物化学链的断裂可释放的化学能； 酶与底物结合能；底物形变能；酶构象变化所释放的能量。8、某个非底物抑制的酶，在实验上除无法测定初速度以外，造成Michacl- Menten方程失效原因是：（） 别构酶； 底物对酸激活作用；一定浓度范围内产物抑制作用。 9、以NADP+作为氢受体形成NADPH的代谢途径是：（） 糖酵解； 三羧酸循环； 磷酸戊糖途径； 糖元异生 10、氧化磷酸化作用（oxidative phosphorylation）是指将生物氧化过程释计的自由能转移并生成：（） NADPH; NADH; ATP; FADH。 11、转录真核生物t RNA的酶是：（） RNA聚合酶I；RNA聚合酶II；RNA聚合酶III；反转录酶。12、嘌呤霉素抑制蛋白质生物合成是由于它是：（ ） 核糖体失活蛋白；核糖核酸酶；氨酰tRNA的类似物；RNA聚合酶的抑制剂。13、为核糖体上的蛋白质生物合成提供能量的分子是： ATP； GTP； UTP； CTP。 14、真核生物5S RNA 基因的启动子在转录区结构基因的： 上游； 内部； 下游。 15、大肠杆菌中主要行使复制功能的酶是：DNA聚合酶IDNA聚合酶IIDNA聚合酶IIIKlenow酶16、尿素合成的中间物氨基甲酰磷酸是在什么中合成的： 胞液；内质网；线粒体；细胞核。17、逆转录酶具有结合什么的活性，并以它为引物合成DNA链。 MRNA; TRNA; 核内小分子RNA； tRNA.18、RNaseH能特异的切割为： 双链DNA；双链RNA；RNA-DNA杂合分子中的DNA；RNA-DNA杂合分子中的RNA。19、酵解的速度决定于： 磷酸葡萄糖变位酶；磷酸果糖激酶；醛缩酶；磷酸甘油激酶。20、测定蛋白质在DNA上的结合部位常用什么方法：Western blotting; PCR; 限制性图谱分析； DNase I保护足印分析。 三、填空题：17题共40空格，第空格答对给1分，共40分。 1、已知蛋白质存在的超二级结构有三种基本组合形式_、_、_。 2、免疫球蛋白G在用_处理时可产生Fab片段，而用_处理时，可产生（Gab）2片段。 3、因为_、_和_等三种氨基酸残基的侧链基团在紫外区具有光吸收能力，所以在_nm波长的紫外光吸收常被用来定性或定量检测蛋白质。 4、当蛋白质和配基结合后，改变了该蛋白质的构象，从而改变该蛋白质的生物活性的现象称为_。 5、一氧化氮（NO）是最上的信使分子之一，它主要功能是_。 6、膜蛋白跨膜部份的结构（构象）大多数是_。 7、除了膜脂肪酰链的长度以外，影响膜流动性的主要因素是_。 8、同一种神经介质作用于不同靶细胞引起截然相反的作用，是因为靶细胞上_不同。 9、内质网(endoplasmicreticulum)有Ca2+的储存器，_作为信使分子可以促成Ca2+的释放。 10、现已发现上百种基因调节蛋白（gene regulatory Proteins），但它们识别双螺旋DNA特顺序的结构基元（structural motifs）仅发现有限几种，请写出_、_、_和_ 。 11、真核生物t RNA的加工，成熟过程包括：_，_，_、_和_ 。 12、sn RNA主要参于_的加工成熟，sn RNA主要参于_的加工成熟。 13、核糖体失活蛋白有两类，它们分别具有位点专一性的_和_活性。 14、现在普遍认为核糖体上存在_个tRNA结合位点。 15、与正确和有效翻译作用相关的m RNA结构元件有_、_和_。 16、在糖异生作用中由丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸，第一步反应生成草酰乙酸是_酶催化的，同时要消耗_；第二步反应是_酶催化的，同时消耗_。 17、含有腺苷酸的辅酶有_、_和_等多种。 四、问答题：4题，每题7分，共28分。 1、简述1997年获诺贝尔医学及生理学奖的美国科学家S. Prusiner的主要贡献。 2、真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是？ 3、一DNA模板的初始转录物经T1酶完全水解得两组分。一组分经RnaseA完全作用得过且过pppUp、Up、ApGp。另一组分经RnaseA完全作用得Cp和ApU。同样模板分别经含-32p-GTP（A）和-32p-GTP（B）的NTP转录，并分别经修饰酶修饰后，经Rnase T2酶解，转录物A得I32P，转录物B得m1I32P的放射性产物，请说出：（1）该DNA模板的序列和RNA转录物的序物；（2）该片段经修饰后的修饰核苷酸数量，修饰核苷种类及位置；（3）推测的过程。 4、简述乙酰辅酶A在碳化合物代谢中的作用。中科院1998年攻读硕士学位研究生入学试题答案一、是非题1、+；2、+；3、- 除了肽类激素外，还有固醇类激素；4、+；5、+；6、- 磷酸化、ADP核糖基化和细胞质内的单个O-GlcNAc 修饰均是可逆的；7、+；8、- 有机合成用不是dNTP，而是活化dNMP DNA酶促合成的原材料是dNTP；9、-；10、+；11、-；12、+二、选择题1、C；2、C；3、C；4、B；5、A；6、D；7、B；8、B；9、C；10、C；11、C 真核生物RNA聚合酶又叫小分子RNA聚合酶，负责包括tRNA和5SrRNA在内的小分子RNA的合成；12、C；13、B 蛋白质起始物生成除需要GTP提供能量外，还需要Mg2+、NH4+及三个起始因子（IF1、IF2、IF3）在起始tRNA中。14、C；15、C；16、C；17、B；18、D；19、B；20、D三、填空题1、，；2、木瓜蛋白酶，胃蛋白酶，（Fab）2；3、酪氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，280；4、别构效应；5、抑制血小板凝集改变cGMP水平，参与神经递质信号转导激活DNA修复酶高浓度时促进前列腺素的合成引起细胞衰老和死亡；6、螺旋结构；7、脂肪酸链的不饱和度；8、受体；9、三磷酸肌醇/IP3；10、锌指，亮氨酸拉链，-螺旋-转角-螺旋；11、锌指，修饰，剪切，添加CCA尾，编辑；12、mRNA，rRNA；13、磷酸二酯酶，N-糖苷酶；14、3；15、核糖体结合位点，起始密码子，终止密码子；16、丙酮羧化，ATP，磷酸烯醇丙酮酸羧化，GTP；17、烟酰胺核苷酸，黄素腺嘌呤二核苷酸，辅酶A四、问答题1、Prusiner的主要贡献是研究疯牛病的过程，发现了某些蛋白质的立体结构可受到一些非核酸因素的影响而发生改变。同时这些立体结构的改变进一步引起其它相同蛋白质立体结构的改变，整个过程犹如病原体的“感染”。立体结构改变的蛋白质可以导致不容型的聚集物的形成，最终发生病变。有这些结果产生了两个方面概念的改变，一是某些疾病的感染可以不需要核酸，二是相同一级结构的蛋白质可以呈现不同的立体结构，即蛋白质的高级结构除了一级结构外，还受其他因素的影响。2、真核生物的RNA聚合酶，按照对-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类：RNA聚合酶基本不受-鹅膏蕈碱的抑制，在大于10-3M/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-8M/L一下就会被抑制。RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶和聚合酶之间，在10-5M/L到10-4M/L才会有抑制现象。RNA聚合酶存在与核仁中，其功能是合成5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA。RNA聚合酶存在于核质中，其功能是合成mRNA、snRNA。RNA聚合酶存在于核质中，其功能是合成tRNA和5SrRNA及转录Alu序列。相关内容：原核生物的DNA聚合酶及功能，真核生物的DNA聚合酶及功能，转录调控，复制的调控。3、（1）根据以下原理：初始转录物的5端为三磷酸基（ppp-），3端为核苷；RNase T1的专一性是切割RNA鸟苷3磷酸酯键（-Cp）；RNase A的专一性是切割RNA嘧啶核苷3磷酸酯键（-Cp+ -Up），故起始转录物是pppUpUpApGpCpApU（2）根据毗邻分析原理：a-32p-NTP中的a-32p可掺入到该核苷5邻位核苷的3位。因此，转录时加入a-32p-GTP，产物经修饰后用RNase T2酶解得到I32p，表明是序列中的A32-pGI32pG;同样转录时加入a-32p-UTP，产物经修饰后RNase T2酶解得到m1I32p，表明是序列中的A32pUm1I32pU，所以初始转录物经修饰得到的序列是：pppUpUpIpGpCpm1I32pU。（3）略。4、乙酰辅酶A是活化了的乙酸基团（CH3CO-=乙酰基）与辅酶A的半胱氨酸残基的SH-基团相连。这其实是硫酯。它是脂肪酸的beta-氧化及糖酵解后产生的丙酮酸氧化脱羧的产物。在三羧酸循环的第一步，乙酰基转移到草酰乙酸中，生成柠檬酸。循环也叫柠檬酸循环。乙酰辅酶A是人体内重要的化学物质。首先，丙酮酸氧化脱羧，脂酸的beta-氧化的产物。同时，它是脂酸合成、胆固醇合成、酮体生成的碳来源。三大营养物质的彻底氧化殊途同归，都会生成乙酰辅酶A以进入三羧酸循环，即通过三羧酸循环将糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢彼此沟通，有机联系在一起。中科院1999生化与分子一、是非题：20题，共20分。答“是”写“+”，答案“非”写“一”，写在题后的（ ）中。1、单克隆和多克隆抗体的差别在于制备方式的不同。2、气体分子，如NO，是可以作为信号分子在生物体内行使功能的。3、二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构。4、所有信号肽的位置均在新生肽的N端。5、对于可逆性抑制剂的抑制作用，抑制50%时的抑制剂浓度等于其抑制解离常数Ki。6、在酶的催化反应中，HIS残基的咪唑基既可以起碱催化作用，也可以起酸催化作用。7、蛋白激酶对蛋白质磷酸化的部位除了Ser、Thr、和Tyr外，还有His、Cys、Asp等。8、维生素B1的化学名称为硫胺素，它的磷酸酯为脱羧辅酶。9、线粒体内膜与外膜的结构完全不同，它们是完全分开互不接触的两种膜。10、细胞色素氧化酶与细胞色素b-c1复合物的三维空间结构已得到阐明。11、氧化磷酸化也是可逆的。12、嗜盐菌视紫红蛋白与视网膜视紫红蛋白不同，前者经光照后导致跨膜质子梯度，后者经光照后导致跨膜钠离子流动。13、端粒酶（telomerase）是一种反转录酶。14、转录不需要引物，而反转录必须有引物。15、DNA复制时，前导链合成方向是53，后随链则是35生成。16、人基因组的碱基对数目为2.9109，是自然界最大的。17、细胞器DNA的复制并不限于S期，可在细胞周期的各期中进行。18、基因转录的终止信号应位于被转录的序列以外的下游区。19、真核生物细胞核内不均一RNA(hnRNA)分子量虽然不均一，但其半衰期长，比胞质成熟mRNA更为稳定。20、DNA复制是在起始阶段进行控制的，一旦复制开始，它即进行下去，直到整个复制子完成复制。二、选择题：25题，每题一分，共25分。1、生长调节素（omtomedin）是 A胰岛素 B生长激素 C胰岛素样生长激素和 D表皮生长因子2、生物体内氨的转运主要通过 A尿素循环 B谷氨酰胺 C尿酸3、识别信号肽的是一种信号识别颗粒，它是 A糖蛋白 B信号肽 C脂蛋白 D核蛋白4、微管蛋白的异二聚体上的结合位点是 AGTP BATP CcAMP DADP 5、基因剔除（knock out）的方法主要是用来阐述 A基因的结构 B基因的调控 C基因的表达 D基因的功能6、胰凝乳蛋白酶的活性中心中构成一个电荷中继网的三个氨基酸残基是AHis，Arg，Glu BSer，Lys，Asp CSer，His，Asp DSer，Arg，Glu7、MWC模型和KNF模型的一个区别是AMWC模型可以解释正协同性，而KNF模型不能 BMWC模型可以解释负协同性，而KNF模型不能CMWC模型不能解释正协同性，而KNF模型能 DMWC模型不能解释负协同性，而KNF能8、琥珀酸脱氢酶所需要的辅酶（基）是 ACoA BFAD CNAD+ DNADP+9、对于一个遵守米氏方程的酶，当活性达到最大反应速度的99%时，底物浓度是其Km值的倍数为A10 B100 C90 D99 10、一个酶有多种底物，判断其底物专一性强弱应依据参数 AKcat BKm CKcat/Km11、NO的生成主要来自 A组氨酸 B赖氨酸 C精氨酸 D谷氨酸胺12、哺乳动物细胞质膜的标志酶是 A钠钾ATP酶 B细胞色素氧化酶 CH+-ATP D谷氨酸胺13、辅酶Q是一种化合物，它含 A硫胺素 B异咯嗪结构 C异戊二烯单位的醌类 D铁、硫14、典型哺乳动物细胞内外的Na+，K+离子浓度A细胞内Na+，K+均比细胞外高 B细胞内Na+，K+均比细胞外低C细胞内K+比细胞外高，Na+比细胞外低 D细胞内Na+比细胞外高，K+比细胞外低15、当线粒体呼吸处于状态4时，内膜两侧的pH差可以达到A0.1PH单位 B1PH单位 C1.5PH单位 D2PH单位 16、端粒酶（telomerase）是一种蛋白质-RNA复合物，其中RNA起A催化作用 B延伸作用 C引物作用 D模板左右17、新生多肽链的信号肽与下列哪种物质识别，从而引导肽链进入内质网A核糖体 B核糖体亚基 C信号肽酶 D信号肽识别颗粒（SRP）18、真核生物mRNA帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接，其方式是A2-5 B3-5 C3-3 D5-5 19、与核酸中嘌呤环和嘧啶环上的原子来源都有关的氨基酸是A丙氨酸 B天冬氨酸 C亮氨酸 D甲硫氨酸 20、大肠杆菌mRNA上起始密码子上有的SD序列可与某种RNA的3端配对，然后启动多肽链生成，这种RNA是 AtRNA BSnRNA C16srRNA D23srRNA 21、染色质DNA的碱基可被甲基化，DNA甲基化的作用是A关闭某些基因 B活化某些基因 C可关闭某些基因，同时可以活化另一些基因 D与基因表达的调节无关22、遍在蛋白（ubiquitin）广泛分布于各类细胞，它与蛋白质结合后，造成A蛋白质更加稳定 B蛋白质有效转运 C蛋白质迅速降解 D蛋白质固定在细胞膜上23、DNA损伤的光修复作用是一种高度专一的修复方式，它只作用于紫外线引起的A嘧啶二聚体 B嘌呤二聚体 C嘧啶-嘌呤二聚体24、噬菌体侵入寄主细胞后，决定它进入裂解循环的基因产物是 AN BQ CCro DCI25、环状的线粒体DNA进行复制的方法采用 A多起点双向 B滚环 CD-环 D单起点双向三、填空题；12题，共25分，一空一分。1、糖蛋白中糖苷链主要有两类，即_和_。2、氨基酸氨基中的一个H原子可以被烃基取代，称为烃基化反应，反应生成_或简称_，此反应可被用来鉴定多肽或蛋白质的_末端氨基酸。3、酶与配基结合实验的Scatchard作图表现为一种罩形曲线，表明酶与配基结合具有_。4、TPCK是通过对_残基的烷化而专一的对_酶进行亲和标记。5、维生素D原和胆固醇的化学结构中都具有_的结构。6、磷酸化酶激酶是一种依赖_的蛋白激酶。7、线粒体氧化磷酸化呼吸控制的定量表达是_。8、与G蛋白偶联的质膜受体均有_的结构。9、线粒体内膜胞浆侧的膜电位比基质侧_。10、在反密码子与密码子的相互作用中，反密码子IGA可是别的密码子有_、_、_。11、参与DNA损伤切除修复的酶主要有_、_、_、_。12、转录调控因子的结合DNA功能域的结构有锌指，_、_、_等。四、问答题：5题，共30分。1、一个蛋白质的氨基酸序列显示，其内部不同序列位置存在两个甲硫氨酸残基，试问：用什么试剂，可把此蛋白质裂解成片段？如果裂解的片段分子量均在10000以上，且差距较大，可用何种方法分离？用什么简单方法，可以测定这些片断的分子量？如何证明它们都是从一个蛋白质分子裂解下来的片段？如何证明它们在该蛋白质内的排列次序？2、简述PH对酶反应的影响及其原因。3、试述物质跨膜的被动运送，促使扩散和主动运送的基本特点。4、举出两种蛋白质序列与其基因序列存在的不对应关系及其可能原因。5、用生物技术能实现从鸡蛋中分离人的干扰素么？为什么？中科院1999年攻读硕士学位研究生入学试题答案一、判断题1、- 制备方式不同，其根本的区别是反应性质不同。考察点：单克隆抗体的概念。2、+ 考察点：信号及信号转导。相关内容：信号转导的分类。3、- 考察点：蛋白质的结构层次。相关内容：结构域，单体蛋白（有几个独立的肽段以SS连接的小分子蛋白）。4、- 考察点：信号肽学说，相关内容：蛋白质修饰及转运。5、- 考察点：可逆抑制（竞争性抑制、非竞争性抑制）。相关内容：抑制反应的米氏方程、特点。6、+ 考察点：酶催化的高效性。教材内容：His残基的咪唑基，其解离常数为6，在中性条件下一般以酸性形式存在，另一半以碱性形式存在。即咪唑基即可作为质子供体，又可作为质子受体在催化中发挥作用。因此咪唑基是一个最有效最活泼的一个催化功能基团；相关内容：酶催化的特点。7、+ 考察点：磷酸化的部位。要有-OH基团。相关内容：磷酸化的概念。8、+ 考察点：维生素B1。教材内容：维生素B1，又称为硫胺素，广泛分布在植物中，特别是种子外皮和胚芽与ATP作用转变为焦磷酸硫胺素（TPP），是催化丙酮酸和-酮戊二酸脱羧的辅酶。相关内容：维生素B1的结构。9、- 考察点：线粒体的膜结构。教材内容：细胞色素氧化酶与细胞色素的作用、结构。10、- 考察点：生物化学研究进展。相关内容：细胞色素氧化酶与细胞色素的作用、结构。11、- 12、+ 考察点：视紫红蛋白。相关内容：质子势能。13、+ 考察点：端粒酶的性质。教材内容：每条染色体末端进化形成了DNA序列及能够识别和结合端粒序列的蛋白质，这一种核糖核蛋白由RNA和蛋白质组成，称为端粒酶。具有逆转录酶的性质，其中RNA是富含G序列的模板，因此可以弯过来作为引物复制5末端。14、+ 考察点：转录与反转录。教材内容：反转录酶催化的DNA合成反应要求有模板和引物，以四种脱氧核苷三磷酸作为底物，此外，还需要适当的阳离子（Mg2+、Mn2+）和还原剂（以保护酶蛋白中的巯基）DNA链的延长方向为53。RNA聚合酶需要以四种核苷三磷酸作为底物，并需要适当的DNA作为模板，Mg2+能促进聚合反应，RNA链的延长方向为53，反应是可逆的，但焦磷酸的水解可推动反应趋向聚合。相关内容：DNA的复制过程。15、- 考察点：前导链与滞后链。教材内容：以复制叉向前移动的方向为标准，一条模板链是3 5走向，在其上DNA能以53方向连续合成，称