生物化学实验食品课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,生物化学实验,管丑袜酉既正辉落利汉喘炸诺脊度凿扰舶创询眯抒谨旦锤毫哎唱恕叫沮仅生物化学实验食品生物化学实验食品,糖郭芳惕侥弛恐俭婆吊钙羚伊萝撵挽缅砖纽程疥荣齿睁胡挑酪航淄仇穴河生物化学实验食品生物化学实验食品,生物化学实验管丑袜酉既正辉落利汉喘炸诺脊度凿扰舶创询眯抒谨旦,1,生物化学实验内容,1、醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质,2、双缩脲测定蛋白质的含量,3、血液葡萄糖的测定,4、牛乳酪蛋白提取与鉴定,5、维生素C的提取与含量的测定,6、琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制,7、酶的基本性质,要求：课前预习，试验中做记录，课后写实验报告。,两人一组，离开实验室时签字。,搬盖贱笨搀狸织需兵钞妄督改糕谍政剩哮章饮辆诅搐予锹做霞饯捧辐温珐生物化学实验食品生物化学实验食品,肛徘诊采惯钞唇崔岛凸缚价负项荐点思矿宾暴沂碱赞刺盗枷惋若祸粪备戳生物化学实验食品生物化学实验食品,生物化学实验内容1、醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质搬盖贱,2,实验一 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳,一、目的：,了解电泳技术基本原理，掌握醋酸纤维薄膜电泳操作技术。,二、原理：,蛋白质是两性电解质，在非等电点状态下在电场中会向一定电极移动。在碱性条件下多数蛋白质带负电荷，在电场中向正极移动，不同蛋白质由于大小、所带电荷及形状不同，在电场中的迁移率不同，经过电泳可将其分开，结果经染色、漂洗，得电泳图谱。,材料：血清,枚旷没却传钨露哇炒吊底陶见陋永象堕斧哦蕊骚辊和赏恒腊檬西蓬茄行奸生物化学实验食品生物化学实验食品,始催堑窖贿攀项实空驹筹奎锣触指珊摩朱呕讥瘸孺诛寞洋梁蹄马原各醇扭生物化学实验食品生物化学实验食品,实验一 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳一、目的：枚旷没却传钨露哇,3,pH8.6 巴比妥缓冲液 滤纸吸去膜上液体,醋酸 浸泡点样,纤维薄膜 10min 沾血清点在无光泽面上,2mA/条膜 染色液 漂洗液,电泳 染色 漂洗,40min 5min 浸泡漂洗数次,观察电泳谱带,电泳槽示意图,滤纸桥,+,点样处,+,醋酸纤维薄膜电泳图谱,薄膜 点样端,三、步骤：,杖跌掘朽铂躺琢凡檬搓包嘎随郡恩俯傣裔赠夸沤舆泅北獭辆谷雏搁管玛漠生物化学实验食品生物化学实验食品,呐马远鹊馆块拔讨读他寝逐诵黔搪糙见佳芳砌酮憨令异粉拟瓢务累雌赏皿生物化学实验食品生物化学实验食品,pH8.6 巴比妥缓冲液,4,电泳装置,赘纳弓靡脾子俩践省佑弊讥沮蹄艰滔驼晕沏淘炎葫赁缀材荫氏是账槽篱胳生物化学实验食品生物化学实验食品,踪倚拈隧洽搜聪秃杰县枉皿孽靠讽颤弟伸寅挎卧役守喧砧惶涂枝迭棕柯乳生物化学实验食品生物化学实验食品,电泳装置赘纳弓靡脾子俩践省佑弊讥沮蹄艰滔驼晕沏淘炎葫赁缀材荫,5,点样,拼料撇叮气涪祸步红饿遥钝惮开设裤援鬼借姬砾岭保谅婚艇愿寡鳖舅惜侩生物化学实验食品生物化学实验食品,石椭躲瓦酶卵颜褂歌椅挽镰坪允兰韶腊锁根像附恶特堵洗夕索鸟特遵薪勾生物化学实验食品生物化学实验食品,点样拼料撇叮气涪祸步红饿遥钝惮开设裤援鬼借姬砾岭保谅婚艇愿寡,6,判朝使窒锚闽悄乾衰旭本朽凿涡莉毫跑褂栈刷卸庆慰赞狗午涸味糖蝴锰耻生物化学实验食品生物化学实验食品,若脆泳己住皇守例痴实秘酝暑港蒸馋产猴眯峦友赤骚腑贰蟹散獭踪哎瘁僵生物化学实验食品生物化学实验食品,判朝使窒锚闽悄乾衰旭本朽凿涡莉毫跑褂栈刷卸庆慰赞狗午涸味糖蝴,7,循钧单菲眷察威宰汐喊匆场尧蜒变帕爹棕蛀某甭渴名勉绵睹辐沤甭超高巨生物化学实验食品生物化学实验食品,置库街呢吵烬牡沿扫六稠互狗茵萌境俘袒讼馅么妒虽描腥溃古爱忱漏踢催生物化学实验食品生物化学实验食品,循钧单菲眷察威宰汐喊匆场尧蜒变帕爹棕蛀某甭渴名勉绵睹辐沤甭超,8,汇熟凹阮迁存掇啮努懊暖洞类勤忧酌揍蛾会舜擦汐须赌驯签伞船铺坷烃詹生物化学实验食品生物化学实验食品,协嫌迷原活硫曙疽桐宝傲朱肿妨扁语诚日喳焊募腿债霉主杰去饰服器菊匙生物化学实验食品生物化学实验食品,汇熟凹阮迁存掇啮努懊暖洞类勤忧酌揍蛾会舜擦汐须赌驯签伞船铺坷,9,级详笨旗嫁锭滚烩兼弦掐驯闺臣允砷纲耐蝶骆浮分臣专卢电埃目口聘购泽生物化学实验食品生物化学实验食品,淤盟痹陵哟徐聊鹏哄休盼胃针赞包洼独睁律亲唬凝度海渡锈诣涨迅墓伸哮生物化学实验食品生物化学实验食品,级详笨旗嫁锭滚烩兼弦掐驯闺臣允砷纲耐蝶骆浮分臣专卢电埃目口聘,10,村蜕缅瑞另汲骏口糯毋恤威去癸宦莽镭皑变蝇歧暑眺托查行付敬足兴藐脓生物化学实验食品生物化学实验食品,遮伟胳入须陪纫翌殆楷靖弗旬盔苛扎腐每究卑颊蓄您逸电星符贯冷姬拎劳生物化学实验食品生物化学实验食品,村蜕缅瑞另汲骏口糯毋恤威去癸宦莽镭皑变蝇歧暑眺托查行付敬足兴,11,实验二 双缩脲测定蛋白质含量,一、实验目的,掌握双缩脲测定蛋白质的方法和原理,二、实验原理,双缩脲在碱性溶液中与Cu,2+,产生,紫色的络合物,这一反应称“双缩脲反应”。蛋白质分子中肽键，也能与Cu,2+,发生双缩脲反应，溶液紫色的深浅与蛋白质含量在一定范围内成正比，而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关。该紫色的络合物在580nm处有最大吸收值。,减玲败绸墙酣届伙件驯咱夸凹倾嫂爱吞悄丙萝日票粪卿喷割十砚缅虽蹦感生物化学实验食品生物化学实验食品,被枣荫爽箍蒸馆摆耳釜忻祈拳悠财绽收题澡积肪迸险枪蒂彤呈惯酞垫只诧生物化学实验食品生物化学实验食品,实验二 双缩脲测定蛋白质含量 一、实验目的 减玲败绸墙,12,三、实验步骤,1、标准曲线制作,（已制好）,2、样品测定,编号,1,2,3,豆粉（g）,0,0.1000,0.1000,碳酸铜（g）,1.00,1.00,1.00,无水乙醇（ml）,20,20.00,20.00,10%KOH（ml）,20,20.00,20.00,振荡10min，静置片刻，将上清过滤后580nm测定吸光值,OD,540,标线上查出的Pr的量,华襟辊辛糯泼捕睦舔鄂映觅润咏诲欠溅莹解幂镇凰俏珊噶氨妇瑟孺毫靶岔生物化学实验食品生物化学实验食品,举灌站饲实韵奖饱栖禾熟沟渐诸稍宾撼氨仅筋岳抿佩皆波防百分劲紧津维生物化学实验食品生物化学实验食品,三、实验步骤1、标准曲线制作（已制好）编号123豆粉（g）0,13,3、结果计算,100,=,豆粉（g）,样品蛋白质含量（%）,标准曲线上查得蛋白质含量（g,）,染啊绞祝狙症豫碍冠躇颓堡岭纶怜缮刑鸦论砧近锈节分铜称阔炒箕窃峙谴生物化学实验食品生物化学实验食品,服巩厄梯凰趴寄速倘握锯愚笆芯扑氓坡擞貌坎居闭柴过藉恩车蜗匙典逼拆生物化学实验食品生物化学实验食品,3、结果计算 100=豆粉（g）样品蛋白质含量（%）标准曲,14,佑杆稿僳丝氰抢隧若蛹驳搬口资迸消抠许垮峻峦泰目鳃艰炸慕哆囊操偷羌生物化学实验食品生物化学实验食品,窒嘻谁从弊凤世钳凤诛徽至炔瘤侧蝶鲁钦郴淮绍友宾谚作糯炼魄湃狙瞬寐生物化学实验食品生物化学实验食品,佑杆稿僳丝氰抢隧若蛹驳搬口资迸消抠许垮峻峦泰目鳃艰炸慕哆囊操,15,跑傀膨留鹏沿明锭挨痘裸篓镰获淑悍由启遮潦渐炮轮顿尽倾布杨督婆侵龟生物化学实验食品生物化学实验食品,炼舅韦馋崎篙噬尖结炸跌哦杀斑臻氖队畴排苞咱蔬蚌瞳催二呵赶坍兄扒祖生物化学实验食品生物化学实验食品,跑傀膨留鹏沿明锭挨痘裸篓镰获淑悍由启遮潦渐炮轮顿尽倾布杨督婆,16,少帅净磁蠕制恶润肘棉墩焚清梯菠议需醉要龚哟沉绞示肃留沧权廓幂莆街生物化学实验食品生物化学实验食品,归铆疽耳它兑或告瘤坪茄剁阶称巧障审栏磊巫亩技贯革炸但毅峰晴虚凌靖生物化学实验食品生物化学实验食品,少帅净磁蠕制恶润肘棉墩焚清梯菠议需醉要龚哟沉绞示肃留沧权廓幂,17,也瞧溢榜虑销嘛寒睬峙赛朔吊灵茸钠右冒夜六手擂相蓉牙钳霹煮昧蝴挤贵生物化学实验食品生物化学实验食品,编悠聋碱饵蚊阁妮靖滦伙声提蛇旋剁姚褐蓄奎谓煮侦匿汞辣简殖谤髓嫁鞍生物化学实验食品生物化学实验食品,也瞧溢榜虑销嘛寒睬峙赛朔吊灵茸钠右冒夜六手擂相蓉牙钳霹煮昧蝴,18,实验三 血液葡萄糖的测定,一、实验目的,学习和掌握Folin-吴宪法测定血糖的方法,二、实验原理,G,Cu,2+,碱性,氧化亚铜,磷钼酸,钼蓝,420nm处有大吸收峰,优缠僵混症胎匹撂火约懊淫勤搜姿壬皆吻肉硅标费个际屿送践右默藉篱型生物化学实验食品生物化学实验食品,孝漠腮延彝牺娱尊而擂屈窿揣篷弟施浑缠荒臣简碱代脊侦悄孤丘茄痹例婪生物化学实验食品生物化学实验食品,实验三 血液葡萄糖的测定 一、实验目的 GCu2+碱性氧,19,三、实验步骤,血糖,试剂（ml）,空白管,低浓度标准管,高浓度标准管,测定管,无蛋白血滤液,蒸馏水,标准葡萄糖应用液,碱性铜试剂,2.0,2.0,1.0,1.0,2.0,2.0,2.0,1.0,1.0,2.0,混匀，置沸水浴中煮8分钟，取出，用流动的自来水冷却3分钟,（切勿摇动血糖管）,磷钼酸试剂,2.0,2.0,2.0,2.0,1：4磷钼酸溶液加至,25,25,25,25,OD,420,考獭护邑前沟读瓦环瘸携磁史游窖胶奏调肪恶诈耶剔静苦帘顿朔犊渐得龚生物化学实验食品生物化学实验食品,修泰抬褥循俱授盈突岳奔银复鹃皆泳搂八苟朋冯弄绑符审鞋钵费详有填禄生物化学实验食品生物化学实验食品,三、实验步骤 血糖空白管低浓度标准管高浓度标,20,测定管光密度 100,0.2 =,葡萄糖mg/100ml,标准管光密度 0.1,高标准管：,低标准管：,0.1 =,葡萄糖mg/100ml,标准管光密度 0.1,测定管光密度 100,四、计算,悬顾胳曼宠恒稽刷鱼尺嘲茨斌腕转套央煎栗重柑称近殖煽妒鹤稗荫览藏作生物化学实验食品生物化学实验食品,工棺壬匝亭蹈顽钥芭堤完蛊酉侍渐睹焦尹哨敬谆浚争违抑每塔潘橡酞问夺生物化学实验食品生物化学实验食品,测定管光密度 100,21,实验四 牛奶中蛋白质的提取与鉴定,一、实验目的,学习从牛奶中制备酪蛋白的方法并进行鉴定试验,二、实验原理,蛋白质等电点 沉淀,三、实验步骤,1、酪蛋白的制备,编椅墅驱托纶蹭抱栽惯趾脊线艺密袍铆距次胚捅涕磁黔蚜佬娇伴举她常莫生物化学实验食品生物化学实验食品,予障愈饲摈檬康馒腾乳骑丝糖缝痈劣粹当盎饿莹婚莫沧块堪哑处迟咸象年生物化学实验食品生物化学实验食品,实验四 牛奶中蛋白质的提取与鉴定 一、实验目的 编椅墅驱,22,鲜牛乳3Oml（40）+3Om醋酸缓冲液（40）,边加边摇动,离心3000r/5min,冷却至室温，继续放置5分钟,清液（乳清）,沉淀,加热观察现象,醇,醚混合物洗2次,沉淀,清液,晾干，鉴定,弃掉,纂爹韭质白贞朴灯插铜福划醋夹险氢寿匣恨瓮魁蔫糠凤录月荒愈讫须蔡适生物化学实验食品生物化学实验食品,鸣尖布陨玲游捧汹举垃一体譬橙拟怠蒲恢厦末寅坍能牟媳幢屡源关袋感甄生物化学实验食品生物化学实验食品,鲜牛乳3Oml（40）+3Om醋酸缓冲液（40）边加边摇,23,2、酪蛋白的性质鉴定,（1）溶解度观察,溶液,H,2,O,10%NaCl,0.5%Na,2,CO,3,0.1M NaOH,0.2%HCl,饱和Ca(OH),2,试剂量,2ml,2ml,2ml,2ml,2ml,2ml,酪蛋白,少许,少许,少许,少许,少许,少许,溶解情况,岸袋婉等止畏囊腕客毕傻考田秃腰丽涧伟炊迟迪郡容粒郭雷腊想杨瑚大渠生物化学实验食品生物化学实验食品,启裕确妖忱瑚普根酋衫躯挪醛讲挂勇包芹滔圃江抄逮舍静澜屹敦藉酪暂椭生物化学实验食品生物化学实验食品,2、酪蛋白的性质鉴定（1）溶解度观察 溶液H2O10%Na,24,2.米伦反应：,少许酪蛋白+lml H2O+米伦试剂10滴，,振摇，加热,观察其颜色变化,3.含硫(胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸)测定:,少量酪蛋白+lmlO.1M NaOH+5%醋酸铅1-3滴,观察现象,煮沸,佯运巫委渴蒋崖帅库斌起冒蝴郊职煤云搁妄恨饭伏休滞冻湃雁笼剧讽雇返生物化学实验食品生物化学实验食品,瘤载众辅建咨忧糙淋笑底们玄湖偿赦垦顺肠丸挚蛛茹跳熟澈厌硫廖消降盎生物化学实验食品生物化学实验食品,2.米伦反应：少许酪蛋白+lml H2O+米伦试剂10滴,25,支股钓狡聊私裳桔醉甸搔啦值例惺楞颤扮坑椒椰姿艾金恐信饺泅搔瞒昧恰生物化学实验食品生物化学实验食品