HIV实验室质量管理

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,艾滋病实验室质量管理,实验室质,量,量管理,行政支持,行政部门,和,和领导,HIV,实验室建,设,设和发展,资,资金,人,人员,监,监督支,持,持,人员培训,每年市疾,控,控中心组,织,织,上,上岗证,环境条件：实验室,的,的设置及,其,其建筑、,设,设施、设,备,备必须符,合,合,全国艾滋,病,病检测工,作,作管理办,法,法,的要求。,HCV,，,HBV,及梅毒等,血,血清学检,测,测在满足,实,实验室管,理,理要求和,保,保证生物,安,安全的条,件,件下，可,以,以与,HIV,检测共享,空,空间和设,备,备，应避,免,免交叉污,染,染。,实验室质,量,量管理,样品采集,、,、运送和,处,处理,送检单,收样登记,表,表,HIV,抗体复检,检,检测单,检测方法,和,和试剂的,选,选择,试剂的出,入,入库及使,用,用记录,供应品、,耗,耗材（试,剂,剂）质量,验,验收记录,表,表,实验室质,量,量管理,设备维护,与,与校准,仪器设备,温,温度记录,表,表,仪器设备,使,使用、检,定,定、维修,、,、维护记,录,录本,强检计量,器,器具周期,检,检定（自,校,校）计划,表,表,文件和文,件,件管理,实验原始,记,记录表,结果报告,样品登记,和,和保存（唯一编码）,实验室质,量,量管理,文件和文,件,件管理,标准操作,程,程序（,SOP,）（,1,）样品的,接,接收、登,记,记、处理,、,、保存和,运,运输；（,2,）检测方,法,法和步骤,；,；（,3,）试剂使,用,用和保存,；,；（,4,）仪器的,使,使用维护,和,和校准；,（,（,5,）质量控,制,制要求及,程,程序；（,6,）结果解,释,释与报告,；,；（,7,）保密程,序,序；（,8,）实验室,数,数据、相,关,关文件记,录,录与保存,；,；（,9,）不确定,样,样品追踪,和,和处理；,（,（,10,）实验室,安,安全防护,及,及实验室,的,的清理和,消,消毒。,文件存档,（,（保存,10,年以上）,ELISA,实验影响,因,因素,酶联免疫,吸,吸附实验,（,（,ELISA,）的影响,因,因素,样品,溶血标本,及,及混有红,细,细胞的血,清,清采用,ELISA,法检测易,产,产生假阳,性,性 可,能,能是溶血,血,血清中含,有,有过氧化,酶,酶物质（,红,红细胞或,血,血红蛋白,中,中的亚铁,血,血红素）,，,，在洗涤,过,过程中往,往,往难以完,全,全洗脱，,它,它可使过,氧,氧化氢释,放,放出原生,态,态氧，从,而,而催化底,物,物四甲基,联,联苯胺生,成,成可溶性,的,的有色物,质,质，即显,蓝,蓝色，产,生,生假阳性,。,。轻微溶,血,血没事，,严,严重溶血,的,的标本易,产,产生假阳,性,性。,受细菌污,染,染的标本,因,因菌体中,可,可能含有,内,内源性辣,根,根过氧化,物,物酶，因,此,此，被细菌污,染,染的标本同溶血标,本,本一样，,亦,亦可产生,非,非特异性,显,显色而干,扰,扰测定结,果,果。,酶联免疫,吸,吸附实验,（,（,ELISA,）的影响,因,因素,样品,塑料试管能吸附抗,原,原物质，,样,样本久置,在,在塑料管,内,内会使样,本,本内抗原,含,含量下降,造,造成假阴,性,性，最,好,好使用真空采血,管,管或抗凝,管,管。（抗凝,剂,剂会略有,影,影响，但,影,影响不大,）,）,标本凝固,不,不全,在,在工作,中,中，有时,为,为了争取,时,时间快速,检,检测，常,在,在血液还,未,未开始凝,固,固时即强,行,行离心分,离,离血清，,使,使血清中,仍,仍残留部,分,分纤维蛋白,原,原，在,ELISA,测定过程,中,中可以形,成,成肉眼可,见,见的纤维,蛋,蛋白块，,易,易造成假,阳,阳性结果,；,；因此血,液,液标本采,集,集后必须,使,使其充分,凝,凝固后再,分,分离血清,。,。,酶联免疫,吸,吸附实验,（,（,ELISA,）的影响,因,因素,按说明书,要,要求，实,验,验前应取,出,出试剂稳,定,定,加样,加样的量,要,要准确,移,移液器,要,要经常清,洗,洗 定,期,期校准,加,样,样,位,位,置,置孔,壁,壁,1/3,以,下,下不,可,可,溅,溅,出,出,不,不,可,可,产,产,生,生,气,气,泡,泡,必,须,须,使,使,用,用,一,一,次,次,性,性,TIP,头,，,，,严,严,格,格,控,控,制,制,，,，,防,防,止,止,交,交,叉,叉,污,污,染,染,先,加,加,稀,稀,释,释,液,液,的,的,，,，,加,加,样,样,时,时,可,可,用,用,移,移,液,液,器,器,孔,孔,内,内,吹,吹,打,打,混,混,匀,匀,移,液,液,器,器,的,的,校,校,准,准,可,以,以,送,送,检,检,，,，,可,可,以,以,自,自,校,校,，,，,自,自,校,校,要,要,有,有,SOP,有,记,记,录,录,酶,联,联,免,免,疫,疫,吸,吸,附,附,实,实,验,验,（,（,ELISA,）,的,的,影,影,响,响,因,因,素,素,孵,育,育,时,间,间,严,严,格,格,按,按,照,照,试,试,剂,剂,盒,盒,说,说,明,明,书,书,操,操,作,作,容,容,易,易,控,控,制,制,温,度,度,严,严,格,格,按,按,照,照,试,试,剂,剂,盒,盒,说,说,明,明,书,书,操,操,作,作,用,用,校,校,准,准,的,的,温,温,度,度,计,计,监,监,测,测,温,温,度,度,，,，,特,特,别,别,是,是,冬,冬,天,天,，,，,避,避,免,免,因,因,温,温,度,度,过,过,低,低,导,导,致,致,假,假,阴,阴,性,性,。,。,封,板,板,孵,孵,育,育,时,时,不,不,贴,贴,封,封,片,片,或,或,加,加,盖,盖,，,，,使,使,标,标,本,本,或,或,稀,稀,释,释,液,液,蒸,蒸,发,发,，,，,吸,吸,附,附,于,于,孔,孔,壁,壁,难,以,以,清,清,洗,洗,彻,彻,底,底,。,。,恒,温,温,孵,孵,育,育,设,设,备,备,的,的,使,使,用,用,与,与,维,维,护,护,校,准,准,的,的,温,温,度,度,计,计监,测,测,ELISA,反,应,应,温,温,度,度,水,浴,浴,的,的,尤,尤,其,其,要,要,注,注,意,意水,位,位,酶,联,联,免,免,疫,疫,吸,吸,附,附,实,实,验,验,（,（,ELISA,）,的,的,影,影,响,响,因,因,素,素,洗,板,板,洗,液,液,的,的,量,量试,剂,剂,不,不,同,同,，,，,板,板,孔,孔,的,的,大,大,小,小,差,差,异,异,会,会,导,导,致,致,洗,洗,液,液,的,的,量,量,的,的,不,不,同,同,，,，,为,为,保,保,证,证,洗,洗,的,的,彻,彻,底,底,，,，,原,原,则,则,是,是量,足,足,够,够,多,多,且,且,不,不,会,会,逸,逸,出,出。,浸,泡,泡,时,时,间,间严,格,格,按,按,照,照,试,试,剂,剂,盒,盒,说,说,明,明,书,书,操,操,作,作,，,，,一,一,般,般,30-60,秒，不,设,设置,浸,浸泡,时,时间,或,或时,间,间太,短,短，,洗,洗脱,不,不彻,底,底的,话,话会,产,产生,“,“花,板,板”,。,。,保持,针,针孔,通,通畅,不,不阻,塞,塞血清,中,中残,留,留的,的,的纤,维,维蛋,白,白丝,或,或洗,涤,涤液,析,析出,的,的结,晶,晶易,使,使洗,板,板机,的,的针,孔,孔处,于,于阻,塞,塞状,态,态，,造,造成,未,未结,合,合标,记,记酶,洗,洗脱,不,不彻,底,底，,导,导致,“,“花,板,板”,。,。应,做,做好,洗,洗板,机,机的,维,维护,工,工作,。,。,拍板,酶联,免,免疫,吸,吸附,实,实验,（,（,ELISA,）的,影,影响,因,因素,洗板,机,机的,检,检定,、,、使,用,用及,维,维护,检定,：,：注,液,液量,和,和残,留,留量,（,（每,孔,孔,5,微升,）,）,使用,：,：设,置,置程,序,序（,注,注液,量,量、,洗,洗板,次,次数,、,、浸,泡,泡时,间,间、,洗,洗板,位,位置,）,）,维护,：,：消,毒,毒液,冲,冲洗,，,，蒸,馏,馏水,冲,冲洗,酶联,免,免疫,吸,吸附,实,实验,（,（,ELISA,）的,影,影响,因,因素,显色,加底,物,物时,，,，应悬空加液,，,，避,免,免触,及,及板,孔,孔内,壁,壁造,成,成交,叉,叉污,染,染。,应先加,底,底物,缓,缓冲,液,液,A,再加,TMB(,四甲,基,基联,苯,苯胺,),底物,B,，加,入,入顺,序,序不,能,能颠,倒,倒。,已,已显,浅,浅蓝,色,色的,TMB,底物,坚,坚决,不,不能,用,用。,个别,试,试剂,要,要求,A,、,B,液先,混,混合,后,后再,加,加。,温度,与,与时,间,间的,控,控制,。,。,酶联,免,免疫,吸,吸附,实,实验,（,（,ELISA,）的,影,影响,因,因素,终止,及,及读,板,板,读板,前,前应,保,保证板孔,底,底部干净,，,，无,异,异物,，,，无,水,水气,，,，无,气,气泡,，,，特,别,别是,在,在冬,天,天。,酶标,仪,仪不,应,应放,置,置在,阳,阳光,或,或强,光,光照,射,射下,操作,时,时室,温,温宜,在,在,15-30,使用,前,前先预热,15-30min,测读,板,板结,果,果会,更,更稳,定,定。,酶标,仪,仪必,须,须检,定,定,标准,板,板,厂家,酶联,免,免疫,吸,吸附,实,实验,（,（,ELISA,）的,影,影响,因,因素,Cutoff,值计,算,算及,结,结果,判,判定,注,注意,事,事项,严格,按,按照,试,试剂,说,说明,书,书要,求,求的,数,数量,做,做阴,、,、阳,性,性对,照,照,根据,阴,阴、,阳,阳性,对,对照,的,的值,判,判定,实,实验,是,是否,成,成立,严格,按,按照,试,试剂,说,说明,书,书要,求,求计,算,算,Cutoff,值,注意,空,空白,原始,记,记录,标明空白,对,对照、阳性,对,对照、阴性,对,对照、外部,对,对照以及待检,样,样品的位,置,置,试剂,盒,盒厂,家,家、,测,测定,方,方法,、,、批,号,号、,效,效期,操作,人,人员,和,和复,核,核人,员,员姓,名,名（,签,签名,）,）,检测,日,日期,其他,（,（环,境,境、,设,设备,、,、实,验,验依,据,据等,）,）,注意样本,的,的溯,源,源性,废弃,物,物处,理,理,消毒,液,液（,含,含氯,消,消毒,剂,剂、,75%,乙醇,、,、,2%,戊二,醛,醛）,干烤,消,消毒,（,（,1402-3h,）,高压,蒸,蒸汽,消,消毒,（,（,12115-20min,）,高压,灭,灭菌,器,器检,定,定：,温,温度,和,和压,力,力,高压,灭,灭菌,器,器使,用,用效,果,果监,测,测：,化,化学,指,指示,卡,卡，,生,生物,监,监测,（,（嗜,热,热脂,肪,肪杆,菌,菌芽,孢,孢）,ELISA,实验,质,质量,控,控制,ELISA,的质,量,量控,制,制,试剂,盒,盒内,部,部对,照,照：,试,试剂,盒,盒内,部,部对,照,照质,控,控品,即,即为,试,试剂,盒,盒内,提,提供,的,的阳性,和,和阴,性,性对,照,照血,清,清。试,剂,剂盒,内,内部,对,对照,用,用于,判,判断,每,每次,实,实验,的,的有,效,效性,，,，但,不,不能,作,作为,室,室内,质,质控,品,品使,用,用。,每,每一,次,次检,测,测临,床,床样,品,品时,，,，必,须,须有,试,试剂,盒,盒内,部,部对,照,照，,而,而且,只,只能,在,在同,批,批号,的,的试,剂,剂盒,中,中使,用,用。,内,内部,对,对照,结,结果,无,无效,，,，必,须,须重,新,新试,验,验。,室内,质,质控,品,品：,为,为非,试,试剂,盒,盒组,份,份的,外,外部,质,质控,品,品，,是,是为,了,了监,控,控检,测,测的,重,重复,性,性而,设,设置,的,的，,包,包括,强,强阳,性,性、,弱,弱阳,性,性和,阴,阴性,质,质控,血,血清,。,。也,可,可以,只,只设,置,置一,个,个弱阳,性,性质,控,控，以,该,该试剂,盒,盒临,界,界值,（,（,Cut-off,）的,2,3,倍为宜,。,。外,部,部质,控,控品,的,的作,用,用是,，,，判,断,断该,批,批临,床,床样,品,品检,测,测的,有,有效,性,性，,因,因此,，,，每,次,次实,验,验必,须,须包,含,含室,内,内质,控,控品,，,，其,结,结果,无,无效,，,，必,须,须重,新,新试,验,验。,室内,质,质控,品,品的,来,来源,商品,化,化的,室,室内,质,质控,品,品,实验,室,室自,己,己制,备,备（,比,比较,经,经济,）,）,混合,试,试剂,盒,盒内,部,部对,照,照血,清,清，,通,通过,做,做实,验,验确,定,定阴阳,性,性对,照,照的,混,混合,比,比例,，,，混,合,合，,分,分装,保,保存。,混合,HIV,抗体,阳,阳性,人,人血,清,清、,HIV,抗体,阴,阴性,人,人血,清,清，,3000,转,/,分钟,离,离心,15,分钟,，,，,0.2m,生物,滤,滤膜,过,过滤,除,除菌,，,，,56,30,分钟,加,加热,灭,灭活,处,处理,。,。通,过,过做,实,实验,确,确定,阴,阴阳,性,性血,清,清的,混,混合,比,比例,，,，混,合,合，,分,分装,保,保存,。,。,高浓,度,度商,品,品化,室,室内,质,质控,品,品再,稀,稀释,室内,质,质控,品,品的,保,保存,一次,购,购买,或,或制,备,备量,应,应该,足,足够,本,本实,验,验室,至,至少,一,一年,使,使用,等量,分,分装,，,，可,以,以按,单,单次,使,使用,、,、单,日,日使,用,用、,最,最长,一,一周,使,使用,的,的量,确,确定,每,每个,分,分装,的,的量,不同,室,室内,质,质控,品,品应,做,做好,标,标记,，,，最,好,好使,用,用不,同,同颜,色,色的,标,标签,，,，以,防,防止,混,混用,应存,放,放于,-70,以,下,下，,如,如无,条,条件,则,则存,放,放于,非,非自,动,动除,霜,霜的,-20,冰,箱,箱,一旦,融,融解,后,后应,存,存放,于,于,2-8,，,一,一周,后,后必,须,须弃,去,去，,不,不能,重,重新,冻,冻存,使,使用,样品,的,的采,集,集、,处,处理,、,、保,存,存、,运,运送,及,及接,收,收,样品,的,的采,集,集和,处,处理,建议,用,用,K2EDTAK3EDTA,枸橼酸,钠,钠的抗,凝,凝管采,血,血,不用肝,素,素抗凝,管,管采血,血浆,1500-3000r/min,离心,15min,，吸上,层,层血浆,血清,室,室温,自,自然放,置,置,1-2h,，待血,液,液凝固,、,、血块,收,收缩后,1500-3000r/min,离心,15min,，吸上,层,层血清,样品的,保,保存,建议用,1.5ml-2.0ml,的螺口,冻,冻存管,或,或离心,管,管保存,.,抗体及,抗,抗原检,测,测的血,清,清或血,浆,浆样品,应,应存放,于,于,-20,以下,一周内,检,检测的,样,样品,2-8,样品的,保,保存,尽量多,分,分装保,存,存,样品的,运,运送要,求,求,样本量,1ml,样本的,质,质量,无,无,严,严重溶,血,血，无,微,微生物,污,污染，,无,无血脂,过,过多，,无,无严重,黄,黄疸等,管子的,质,质量,防,防,漏,漏,三层包,装,装,单管包,装,装,重新采,样,样,样品的,运,运送要,求,求,样品和,送,送检单,分,分开,专人送,样,样,专,专门运,送,送箱（,实,实验室,人,人员号,码,码和联,系,系方式,）,）市疾,控,控确证,实,实验室,血清,or,血浆,2-8,度运送,或,或者冻,存,存状态,下,下直接,运,运送,送样单,要,要求,送样单,打,打印,检测者,/,审核者,手,手签，,单,单位或,实,实验室,盖,盖章,信息完,整,整,(,真实姓,名,名、送,检,检人群,、,、身份,证,证号码,、,、联系,电,电话、,现,现地址,及,及户籍,地,地址等,),详细的,样,样本来,源,源,(,监管场,所,所的具,体,体到哪,个,个监管,场,场所,),充分利,用,用备注,栏,栏,规范性,(,试剂、,cutoff,值等,),样品的,接,接收,打开包,装,装，注,意,意生物,安,安全，,个,个人防,护,护,核对样,品,品与送,检,检单，,检,检查样,品,品管有,无,无破损,和,和溢漏,记录,一,一,般,般记录,，,，另外,记,记录有,无,无严重,溶,溶血，,微,微生物,污,污染、,血,血脂过,多,多及黄,疸,疸等情,况,况,开盖,生,生物,安,安全柜,中,中，个,人,人防护,HIV,抗体检,测,测,HIV,抗体检,测,测的目,的,的,HIV,抗体检,测,测可用,于,于,诊断,、,血液筛,查,查,、,监测,等。,以诊断,为,为目的,的,的检测,是,是为了,确,确定个,体,体,HIV,感染状,况,况，包,括,括临床,检,检测、,自,自愿咨,询,询检测,、,、根据,特,特殊需,要,要进行,的,的体检,等,等。,以血液,筛,筛查为,目,目的的,检,检测是,为,为了防,止,止输血,传,传播,HIV,，包括,献,献血员,筛,筛查和,原,原料血,浆,浆筛查,。,。,以监测,为,为目的,的,的检测,是,是为了,解,解不同,人,人群,HIV,感染率,及,及变化,趋,趋势，,包,包括各,类,类高危,人,人群、,重,重点人,群,群和一,般,般人群,。,。,HIV,抗体检,测,测的要,点,点,根据目,的,的选择,检,检测方,法,法及检,测,测策略,。,。,严格遵,守,守实验,室,室标准,操,操作程,序,序（,SOP,）。,筛查试,验,验阳性,，,，须做,确,确证试,验,验。,筛查试,验,验阴性,，,，不应,做,做确证,试,试验。,HIV,抗体筛,查,查试验,流,流程,样 品,初筛试验,筛查试剂,阳性反应,阴性反应,复检试验,原有试剂,+,另一不同原理（或厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂,一阴一阳,均阴性反应,均阳性反应,确证试验,报告阴性,筛查试,剂,剂,国家食,品,品药品,监,监督管,理,理局注,册,册批准,ELISA,试剂批,批,批检合,格,格，在,有,有效期,内,内,推荐使,用,用经临,床,床质量,评,评估敏,感,感性和,特,特异性,高,高的试,剂,剂,初筛试,剂,剂,高,高敏感,性,性,复检试,剂,剂,高,高特异,性,性,筛查样,品,品,血清,血浆,全血,DBS/DPS,唾液,尿液,筛查方,法,法,酶联免,疫,疫吸附,实,实验（,ELISA,）,第三代,试,试剂,双,双抗,原,原夹心,法,法 单,纯,纯检测,HIV,抗体,第四代,试,试剂,抗,抗原,抗,抗体联,合,合诊断,试,试剂,同,同时,检,检测,P24,抗原和,抗,抗,HIV-1/2,抗体,缩,缩短,窗,窗口期,注意复,检,检试剂,的,的选择,化学发,光,光或免,疫,疫荧光,试,试验,快速检,测,测（,RT,）,筛查试,验,验的结,果,果报告,HIV,抗体筛,查,查试验,阴,阴性反,应,应报告,为,为“,HIV,抗体阴,性,性”,HIV,抗体筛,查,查试验,阳,阳性反,应,应报告,为,为“,HIV,抗体待,复,复检”,HIV,抗体复,检,检试验,两,两次检,测,测均阴,性,性报告,为,为“,HIV,抗体阴,性,性”,HIV,抗体复,检,检试验,两,两次检,测,测均阳,性,性或一,阴,阴一阳,报,报告为,“,“,HIV,抗体待,确,确证”,HIV,感染产,妇,妇所生,婴,婴幼儿,婴儿会,由,由于被,动,动携带,母,母亲的,抗,抗体而,连,连续几,个,个月至,十,十几个,月,月出现,抗,抗体阳,性,性。,婴儿满,12,个月进,行,行第一,次,次,HIV,抗体检,测,测。使,用,用两种,不,不同原,理,理或不,同,同厂家,筛,筛查试,剂,剂进行,抗,抗体检,测,测，两,种,种筛查,试,试剂检,测,测结果,均,均为阴,性,性反应,，,，报告,HIV,抗体阴,性,性，可,排,排除感,染,染。检,测,测结果,出,出现阳,性,性反应,（,（一种,为,为阴性,反,反应一,种,种为阳,性,性反应,或,或两种,均,均阳性,反,反应）,，,，不能,排,排除感,染,染，应,继,继续追,踪,踪随访,，,，至儿,童,童满,18,个月时,再,再次进,行,行,HIV,抗体检,测,测。,HIV,感染产,妇,妇所生,婴,婴幼儿,婴儿满,18,个月时,应,应再次,进,进行,HIV,抗体检,测,测。使,用,用两种,不,不同原,理,理或不,同,同厂家,筛,筛查试,剂,剂进行,抗,抗体检,测,测。两,种,种筛查,试,试剂的,检,检测结,果,果均为,阴,阴性反,应,应，报,告,告,HIV,抗体阴,性,性，可,排,排除感,染,染。检,测,测出现,阳,阳性反,应,应（一,种,种为阴,性,性反应,一,一种为,阳,阳性反,应,应或两,种,种均呈,阳,阳性反,应,应），,进,进一步,进,进行确,证,证试验,，,，根据,确,确证试,验,验的结,果,果判断,是,是否感,染,染,HIV,。,做好检,测,测后咨,询,询。,HIV,抗体检,测,测结果,解,解释,HIV,抗体阴,性,性,未发生,感,感染（,排,排除“,窗,窗口期,”,”）,HIV,抗体不,确,确定,非特异,性,性的反,应,应,感染早,期,期,感染晚,期,期,HIV,抗体阳,性,性,发生感,染,染（排,除,除疫苗,使,使用）,HIV,抗体快,速,速检测,HIV,抗,抗体快,速,速检测,快速检,测,测，是,艾,艾滋病,实,实验室,多,多了一,种,种检测,方,方法,快速检,测,测，是,为,为了更,多,多更快,的,的发现,感,感染者,快速检,测,测，不,是,是为了,取,取代实,验,验室，,但,但不能,因,因为有,了,了实验,室,室而放,弃,弃使用,快,快速检,测,测,快速检,测,测手段,能,能否成,为,为新型,检,检测,-,咨询模,式,式，或,基,基于医,疗,疗机构,的,的有效,的,的检测,方,方法,-,取决于,检,检测的,质,质量,HIV,抗体快,速,速检测,方,方法,PA,明胶颗,粒,粒凝集,试,试验（,PA,）：将,HIV,抗原致,敏,敏明胶,颗,颗粒作,为,为载体,，,，与待,检,检样品,作,作用。,当,当待检,样,样品含,有,有,HIV,抗体时,，,，明胶,颗,颗粒与,抗,抗体发,生,生凝集,反,反应，,根,根据凝,集,集情况,判,判读结,果,果。,PA,试剂有,两,两种,:,同时检,测,测,HIV-1,和,HIV-2,抗体以及,分,分别检测,HIV-1,和,HIV-2,抗体。,有效试验,必,必须有阴,性,性和阳性,质,质控。,HIV,抗体快速,检,检测方法,免疫渗滤,试,试验,免疫渗滤,试,试验：斑,点,点,ELISA,和斑点免,疫,疫胶体金,（,（或胶体,硒,硒）快速,试,试验。,以硝酸纤,维,维膜为载,体,体，,HIV,抗原点状,固,固定在膜,上,上，加待,检,检样品。,阳,阳性结果,在,在膜上抗,原,原部位显,示,示出有色,斑,斑点。反,应,应时间在,10,分钟以内,。,。,有效试验,的,的质控点,必,必须显色,。,。,HIV,抗体快速,检,检测方法,免疫层析,试,试验,免疫层析,试,试验：以,硝,硝酸纤维,膜,膜为载体,，,，,HIV,抗原线状,固,固定在膜,上,上，待检,样,样品（血,液,液或唾液,）,）沿着固,相,相载体迁,移,移，阳性,结,结果在膜,上,上抗原部,位,位显示出,有,有色条带,。,。,有效试验,的,的质控带,必,必须显色,。,。,结果判读,严格参,照,照试剂说,明,明书,反应区和,质,质控区均,出,出现红色,条,条带为阳,性,性。,质控区有,条,条带，反,应,应区无条,带,带为阴性,。,。,质控区无,条,条带则实,验,验无效。,HIV抗,体,体快速检,测,测的外部,质,质控,外部对照,质,质控品，,可,可采用商用质控,品,品或自制,质,质控品。质控品,应,应包含抗,体,体阳性样,品,品和阴性,样,样品。自,制,制质控品,可,可使用本,室,室保留的,阳,阳性样品,。,。不能使,用,用酶联试,验,验的外部,质,质控品。,下列情况,需,需做质量,控,控制：更,换,换试剂批,号,号；更换,检,检测人员,；,；更换包,装,装；每个,检,检测日；,更,更换试剂,厂,厂家。,建议：每,个,个检测日,检,检测一次,阳,阳性和阴,性,性质控品,；,；如果日,检,检测量大,于,于,50,份样品，,至,至少应作,2,次质控。,快速检测,的,的注意事,项,项,不提倡个,人,人在家中,检,检测。应,由,由经培训,的,的专业人,员,员操作，,注,注意生物,安,安全操作,，,，避免职,业,业暴露发,生,生。,在质控窗,口,口内应出,现,现质控带,，,，如实验,完,完成后未,呈,呈现质控,带,带，说明,试,试剂盒内,质,质控无效,，,，该试验,结,结果无效,，,，样品须,重,重检。,出现以下,问,问题，提,示,示存在质,量,量隐患，,应,应引起重,视,视：运输,包,包装、内,盒,盒或试剂,盒,盒的物理,损,损伤；在,单,单包装内,存,存在混杂,物,物质；标,签,签出现错,误,误、缺失,或,或字迹模,糊,糊 （特,别,别是产品,名,名称或出,产,产厂家名,称,称，批号,和,和货号，,失,失效期或,/,和生产日,期,期）；缺,失,失目录；,泄,泄漏或污,染,染；不适,宜,宜的存放,条,条件；保,护,护包装纸,破,破损或污,染,染。,快速检测,的,的注意事,项,项,环境温度,尤其是在,冬,冬天,血清,/,血浆,全,全血,稀,稀释缓冲,液,液,样本的量,反应的时,间,间,生物安全,废,废,弃,弃物处理,做好实验,的,的原始记,录,录,不同厂家,的,的快检试,剂,剂操作要,求,求,厂家,样品要求,血量,(ul),样品稀释,是否加缓冲液,最小反应时间,(,分钟,),最大反应时间,(,分钟,),试剂储存要求,明胶颗粒法,(PA),血清,/,血浆,25,1:32,N,120,/,2-10,DETERMINE,血清,/,血浆,/,全血,50,N,用全血时加,1,滴,15,60,2-30,SD,血清,10,N,N,5,20,1-30,杭州艾康,血清,/,血浆,/,全血,25,N,Y,10,20,2-30,勿冻存,上海科华,血清,/,血浆,40,N,Y,/,30,4-30,厦门新创,血清,/,血浆,/,全血,60,N,Y,1,30,4-30,广州万孚,血清,/,血浆,/,全血,80-100,N,用全血时加,2,滴,10,30,4-30,勿冻存,北京万泰,血清,/,血浆,80,N,用全血时加,1,滴,/,30,室温储存，可置,2-8 ,引起假阳,性,性的原因,使用溶血,性,性样本,试剂存储,条,条件不正,确,确,判读时间,超,超过规定,的,的判读时,间,间,来自人体,的,的非特异,的,的交叉反,应,应 等,引起假阴,性,性的原因,HIV,抗体的低,滴,滴定,-,只要能看,到,到有线，,即,即使很淡,都,都应该判,断,断为阳性,试,剂,剂,存,存,储,储,条,条,件,件,不,不,正,正,确,确,环,境,境,温,温,度,度,太,太,低,低,未,到,到,规,规,定,定,的,的,判,判,读,读,时,时,间,间,试,剂,剂,暴,暴,露,露,在,在,高,高,湿,湿,度,度,环,环,境,境,中,中,等,等,HIV,抗,抗,体,体,快,快,速,速,检,检,测,测,的,的,优,优,点,点,样,本,本,类,类,型,型,广,广,可,用,用,全,全,血,血,(,指,尖,尖,血,血,),操,作,作,更,更,快,快,不,需,需,要,要,成,成,批,批,实,实,验,验,不,需,需,要,要,使,使,用,用,特,特,殊,殊,仪,仪,器,器,检,测,测,的,的,当,当,天,天,就,就,给,给,出,出,结,结,果,果,提,高,高,受,受,检,检,人,人,在,在,检,检,测,测,后,后,取,取,回,回,检,检,测,测,结,结,果,果,的,的,比,比,例,例,快,速,速,试,试,剂,剂,使,使,用,用,中,中,存,存,在,在,的,的,问,问,题,题,敏,感,感,性,性,、,、,特,特,异,异,度,度,低,低,于,于,ELISA,。,技,术,术,上,上,属,属,于,于,主,主,观,观,判,判,读,读,，,，,不,不,具,具,备,备,标,标,准,准,化,化,条,条,件,件,，,，,人,人,员,员,判,判,读,读,结,结,果,果,需,需,要,要,一,一,定,定,的,的,经,经,验,验,。,。,价,格,格,是,是,ELISA,的,数,数,倍,倍,。,。,可,能,能,存,存,在,在,较,较,大,大,的,的,批,批,间,间,差,差,异,异,。,。,检,测,测,点,点,常,常,规,规,检,检,测,测,流,流,程,程,图,图,-,两,种,种,快,快,检,检,试,试,剂,剂,检,测,测,点,点,应,应,急,急,检,检,测,测,流,流,程,程,图,图,-,两,种,种,快,快,检,检,试,试,剂,剂,职,业,业,暴,暴,露,露,、,、,孕,孕,妇,妇,产,产,时,时,和,和,手,手,术,术,前,前,等,等,检,测,测,点,点,快,快,速,速,检,检,测,测,流,流,程,程,图,图,-,一,种,种,快,快,检,检,试,试,剂,剂,T,h,ankyou,