菊花的组织培养1

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,菊花,的,的组,织,织培,养,养,学习,目,目标,1、,熟,熟悉,植,植物,组,组织,培,培养,的,的基,本,本过,程,程。,2、,理,理解,细,细胞,分,分化,概,概念,及,及脱,分,分化,，,，再,分,分化,。,。,课题,重,重点,与,与难,点,点,课题,重,重点,：,：植,物,物组,织,织培,养,养的,基,基本,过,过程,。,。,课题,难,难点,：,：植,物,物组,织,织培,养,养过,程,程中,使,使用,的,的无,菌,菌技,术,术。,细,细胞,分,分化,，,，脱,分,分化,，,，再,分,分化,。,。,什么,叫,叫分,化,化？,其,其实,质,质是,什,什么?,什么,叫,叫脱,（,（去,）,）分,化,化、,再,再分,化,化？,愈伤,组,组织,的,的细,胞,胞有,什,什么,特,特点,？,？,如何,控,控制,细,细胞,的,的脱,分,分化,与,与去,分,分化,？,？,组织,培,培养,的,的过,程,程？,以及,组,组织,培,培养,的,的理,论,论基,础,础？,阅读32,页,页解,决,决下,列,列问,题,题：,一、,植,植物,组,组织,培,培养,的,的基,本,本过,程,程,基因,的,的选,择,择性,表,表达,（1,）,）细,胞,胞的,分,分化,概,念,念：,在个,体,体发,育,育中,，,，细,胞,胞在,形,形态,、,、结,构,构、,生,生理,功,功能,上,上发,生,生稳,定,定性,差,差异,的,的过,程,程,过程,：,：,如：,受,受精,卵,卵增,殖,殖、,生,生长,、,、分,化,化形,成,成组,织,织、,器,器官,、,、系,统,统,原因,：,：,基因,在,在特,定,定的,时,时间,和,和空,间,间条,件,件下,的,的选,择,择性,表,表达,的,的结,果,果,结果,：,：,形成,不,不同,的,的细,胞,胞和,组,组织,概念,：,：细胞,的,的全,能,能性,是,是指,已,已分,化,化的,细,细胞,具,具有,发,发育,成,成完,整,整个,体,体的,潜,潜能,。,。,原因,：,：是生,物,物体,的,的每,一,一个,细,细胞,都,都含,有,有该,物,物种,所,所特,有,有的,全,全套,遗,遗传,物,物质,（2,）,）植,物,物组,织,织培,养,养原,理,理：,植物,细,细胞,的,的全,能,能性,受精,卵,卵,生,生殖,细,细胞体,细,细胞,全能,性,性的,比,比较:,细胞,全,全能,性,性表,达,达条,件,件：,离体,一定,的,的营,养,养物,质,质、,激,激素,和,和其,他,他外,界,界条,件,件,（3,）,）几,个,个概,念,念,脱分,化,化（,去,去分,化,化）,再分,化,化,愈伤,组,组织,愈伤,组,组织,是,是通,过,过,细胞,分,分裂,形成,的,的，,其,其细,胞,胞排,列,列,疏松,而,而无,规,规则,，高,度,度,液泡,化,化,呈,无定,形,形,状态,的,的,薄壁,细胞,。,。,（4,）,）基,本,本过,程,程,阅读33,页,页解,决,决下,列,列问,题,题：,影响,组,组织,培,培养,的,的因,素,素？,菊花,组,组织,培,培养,应,应注,意,意的,问,问题,？,？,1、,植,植物,材,材料,的,的选,择,择,烟草,和,和胡,萝,萝卜,的,的组,织,织培,养,养较,为,为容,易,易,枸杞,愈,愈伤,组,组织,的,的芽,诱,诱导,比,比较,难,难,（2,）,）同,一,一植,物,物材,料,料的,年,年龄,、,、保,存,存时,间,间的,长,长短,会,会影,响,响实,验,验结,果,果,菊花,的,的组,织,织培,养,养一,般,般选,择,择未,开,开花,植,植株,的,的茎,上,上部,新,新萌,生,生的,侧,侧枝,二、,影,影响,植,植物,组,组织,培,培养,的,的因,素,素：,（1,）,）不,同,同的,植,植物,组,组织,，,，培,养,养的,难,难易,程,程度,差,差别,很,很大,不同,的,的离,体,体组,织,织和,细,细胞,对,对营,养,养、,环,环境,等,等条,件,件的,要,要求,相,相对,特,特殊,，,，需,配,配置,不,不同,的,的培,养,养基,MS,培,培养,基,基主,要,要成,分,分包,括,括：,A、,大,大量,元,元素:N、P、S,、,、K,、,、Ca、Mg,等,等,B、,微,微量,元,元素:B,、,、Mn、Cu,、,、Zn、Fe,、,、Mo、I、,Co,等,等,C、,有,有机,物,物：,甘氨,酸,酸、,烟,烟酸,、,、肌,醇,醇、,维,维生,素,素、,蔗,蔗糖,等,等,2、,培养,基,基的,配,配制(MS培,养,养基),D、,植,植物,激,激素,：,：生,长,长素,和,和细,胞,胞分,裂,裂素,讨论,：,：你,能,能说,出,出各,种,种营,养,养物,质,质的,作,作用,吗,吗？,同,同专,题,题2,中,中微,生,生物,培,培养,基,基的,配,配方,相,相比,，,，MS培,养,养基,的,的配,方,方有,哪,哪些,明,明显,的,的不,同,同？,答：微量,元,元素,和,和大,量,量元,素,素提,供,供植,物,物细,胞,胞生,活,活所,必,必需,的,的无,机,机盐,；,；蔗,糖,糖提,供,供碳,源,源，,同,同时,能,能够,维,维持,细,细胞,的,的渗,透,透压,；,；甘,氨,氨酸,、,、维,生,生素,等,等物,质,质主,要,要是,为,为了,满,满足,离,离体,植,植物,细,细胞,在,在正,常,常代,谢,谢途,径,径受,到,到一,定,定影,响,响后,所,所产,生,生的,特,特殊,营,营养,需,需求,。,。微,生,生物,培,培养,基,基以,有,有机,营,营养,为,为主,。,。与,微,微生,物,物的,培,培养,不,不同,，,，MS培,养,养基,则,则需,提,提供,大,大量,无,无机,营,营养,，,，无,机,机盐,混,混合,物,物包,括,括植,物,物生,长,长必,须,须的,大,大量,元,元素,和,和微,量,量元,素,素两,大,大类,。,。,植物中生长素,和,和细胞,分,分裂素是启动,细,细胞分,裂,裂、脱,分,分化和,再,再分化,的,的关键,性,性激素,。,。在生,长,长素存,在,在的情,况,况下，,细,细胞分,裂,裂素的,作,作用呈,现,现加强,的,的趋势,使用顺序,实验结果,先使用生长素，后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂，但不利分化,先使用细胞分裂素后使用生长素,细胞既分裂也分化,同时使用,分化频率高,3、不,同,同植物,激,激素浓,度,度，使,用,用顺序,和,和使用,量,量,生长素,细胞分裂素：,有利于,根,根的分,化,化,生长素,细胞分裂素：,生,生长素,细胞分,裂,裂素,生,生长素,再分化,制备MS固体,培,培养基,外植体,消,消毒,接种,培,养,养,栽,培,培,三、实,验,验操作,移,栽,栽,冲洗,酒,酒精,无,无菌水,冲,冲洗,氯,氯化汞,无菌,水,水冲洗,至,至少三,次,次之上,配制各,种,种母液,配制培,养,养基,灭毒,实验操,作,作,（一）,制,制备MS固体,培,培养基,1、配,置,置各种,母,母液,2、配,置,置培养,基,基,定容,调PH,培养,基,基的分,装,装,3、灭,菌,菌,分装好,的,的培养,基,基连同,其,其他器,械,械一起,进,进行高,压,压蒸汽,灭,灭菌,1、选,材,材：菊花茎,段,段，取,生,生长旺,盛,盛的嫩,枝,枝,（二）,外,外植体,消,消毒,2、消,毒,毒：,流水冲,洗,洗酒,精,精无,菌,菌水冲,洗,洗氯,化,化汞,无,无菌水,冲,冲洗至,少,少三次,之,之上,（三）,接,接种,用70,的酒,精,精喷雾,使,使空气,消,消毒，,酒,酒精,擦,擦拭工,作,作台并,用,用紫外,线,线照射20分,钟,钟,1、接,种,种室消,毒,毒,2、无,菌,菌操作,要,要求,操作要,在,在酒精,灯,灯火焰,旁,旁完成,，,，每次,使,使用器,械,械后，,都,都需要,用,用火焰,灼,灼烧灭,菌,菌，接,种,种后立,即,即盖好,瓶,瓶盖。,3、材,料,料的切,取,取和接,种,种,4、接,种,种注意,事,事项,每接,种,种一块,外,外植体,前,前，镊,子,子需放,入,入体积,分,分数为75,的,的酒精,溶,溶液中,消,消毒一,次,次，然,后,后在酒,精,精灯火,焰,焰上烧,一,一遍，,冷,冷却后,再,再接种,外植,体,体在培,养,养基中,要,要分布,均,均匀，,放,放置外,植,植体数,量,量根据,锥,锥形瓶,的,的大小,确,确定，,一,一般胡,萝,萝卜3,4块,，,，菊的,茎,茎或叶68,块,块，也,不,不要太,少,少，以,充,充分利,用,用培养,基,基中的,营,营养成,分,分和光,照,照条件,插入,时,时应注,意,意方向,，,，不要,倒,倒插。,茎,茎段、,茎,茎尖基,部,部插入,培,培养基,利,利于吸,收,收水分,和,和养分,思考：,你,你打算,做,做几组,重,重复？,你,你打算,设,设置对,照,照实验,吗,吗？,答：每,种,种材料,或,或配方,至,至少要,做,做一组,以,以上的,重,重复。,设,设置对,照,照实验,可,可以取,用,用一个,经,经过灭,菌,菌的装,有,有培养,基,基的锥,形,形瓶，,与,与接种,操,操作后,的,的锥形,瓶,瓶一同,培,培养，,用,用以说,明,明培养,基,基制作,合,合格，,没,没有被,杂,杂菌污,染,染。,（四）,培,培养,无菌箱,中,中培养,，,，定期,消,消毒，,保,保持适,宜,宜的温,度,度，光,照,照,（五）,移,移栽,1、打,开,开封口,膜,膜,2、清,洗,洗转移,至,至消过,毒,毒的蛭,石,石或珍,珠,珠岩中,幼苗长,壮,壮后，,移,移栽到,土,土壤中,（六）,栽,栽培,1、培,养,养基的,灭,灭菌（,高,高压蒸,汽,汽灭菌,）,）,2、外,植,植体的,消,消毒（,酒,酒精、,氯,氯化汞,）,）,3、接,种,种的无,菌,菌操作,（,（酒精,、,、酒精,灯,灯,灼,灼烧）,4、无,菌,菌箱中,的,的培养,；,；,5、移,栽,栽到消,过,过毒的,环,环境中,生,生存一,段,段时间,。,。,在整个,操,操作过,程,程中，,是,是如何,来,来实现无菌环境的,？,？,结果分,析,析与评,价,价,（一）,对,对接种,操,操作中,污,污染情,况,况的分,析,析,（二）,是,是否完,成,成了对,植,植物组,织,织的脱,分,分化和,再,再分化,（三）,是,是否进,行,行了统,计,计、对,照,照与记,录,录,（四）,生,生根苗,的,的移栽,是,是否合,格,格,课题延,伸,伸,1、一,般,般来说,，,，容易,进,进行无,性,性繁殖,的,的植物,，,，也容,易,易进行,组,组织培,养,养,2、实,例,例：,芦荟、,豆,豆瓣绿,、,、,秋海棠,、,、月季,练习,1.答,：,：植物,组,组织培,养,养所利,用,用的植,物,物材料,体,体积小,、,、抗性,差,差，对,培,培养条,件,件的要,求,求较高,。,。用于,植,植物组,织,织培养,的,的培养,基,基同样,适,适合于,某,某些微,生,生物的,生,生长，,如,如一些,细,细菌、,真,真菌等,的,的生长,。,。而培,养,养物一,旦,旦受到,微,微生物,的,的污染,，,，就会,导,导致实,验,验前功,尽,尽弃，,因,因此要,进,进行严,格,格的无,菌,菌操作,。,。,2.答,：,：外植,体,体的生,理,理状态,是,是成功,进,进行组,织,织培养,的,的重要,条,条件之,一,一。生,长,长旺盛,的,的嫩枝,生,生理状,况,况好，,容,容易诱,导,导脱分,化,化和再,分,分化。,1(,2010浙,江,江高考,),将,将无,根,根的非,洲,洲菊幼,苗,苗转入,无,无植物,激,激素的,培,培养基,中,中，在,适,适宜的,温,温度和,光,光照等,条,条件下,培,培养一,段,段时间,后,后，应,出,出现的,现,现象是(),【解析,】,】,植物组,织,织培养,过,过程中,，,，由外,植,植体脱,分,分化形,成,成愈伤,组,组织需,要,要一定,量,量的生,长