实验六呼吸运动的调节

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验六,家兔呼吸运动的调节,实验目的,掌握家兔耳缘静脉注射法,家兔颈部手术操作、神经血管分离、气管插管技术,记录家兔呼吸曲线,观察 血液中化学因素（,CO,2,，,O,2,和,H,+,）及药物对呼吸运动的影响,迷走神经对呼吸运动的调节,了解各种因素影响呼吸运动的机制,实验原理,呼吸运动是受呼吸中枢控制的呼吸肌节律性活动，伴随着压力变化而使气体进出呼吸道。,呼吸运动受神经以及血液中,PO,2,，,PCO,2,，,H,+,等因素的调节。,药物能作用于呼吸中枢而影响呼吸运动。,肺牵张反射的传入神经是迷走神经，通过此反射弧完成正常地节律性呼吸。,实 验 材 料,1,、,动 物：,家兔,2,、,器 械：,动物手术器材（手术刀、手术剪、止血钳、玻璃分针,动脉夹，丝线，注射器，兔手术台），气管插管，,橡皮管（长,1 m,以上，短,10-20 cm,），,体重秤，呼吸换能器（或张力换能器），,生物信号处理系统等,。,3,、,药品和试剂,：,20%,乌拉坦、,3%,乳酸、,生理盐水等,。,实 验 方 法,一、,仪器连接与标定,二、,称重、麻醉,三、,固 定,、,剪 毛,四、,颈 部,手 术,五、,气 管,插 管,六、分离迷走神经,七、腹部手术,八、项 目 观 察,1,、仪器的连接与标定,换能器和微机记录系统的信号输入通道连接，刺激电极与刺激输出通道连接,设定记录呼吸运动的参数,水 压 计呼吸通道定标（已定标）,捉拿,：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其体重重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。,1,、,2,、,3,均为不正确的抓取方法（,1,可损伤两肾，,2,可造成皮下出血，,3,可伤两耳），,4,、,5,为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体。,2,、捉拿、称重、麻 醉,称重、麻 醉,麻醉,兔耳缘静脉注射：,20%,氨基甲酸乙酯,（,1,）注射液剂量,5 ml/kg,体重，根据动物状态调整剂量,，每次增加,10%,左右,抽吸麻醉液时先取下针头，,多吸一部分，,排出气泡,；,（,2,）进针,注射姿势调整,选择,耳缘静脉，用,酒精刺激后血管较粗；按压住血管根部，血管鼓起再进针，比较容易,从,远心端,开始；循序向根部移动，每次移动距离不要太大，以免注射不成功或加药时无法注射。左右耳,针头扎进,1/3,至,1/2,，并用拇指固定住，以免兔挣扎时退出。,注射时推动液体,先快后慢,（前,1/3,快，后面慢慢推进）,随时观察动物状态。,剩余麻醉液需回收；,兔耳缘静脉注射时的注意事项,麻醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药途径；,进行静脉麻醉时，先将总用药量的三分之一快速注入，使动物迅速渡过兴奋期，余下的三分之二量则应缓慢注射，并密切观察动物麻醉状态及反应，以便准确判断麻醉深度；,如麻醉较浅，动物出现挣扎或呼吸急促等，需补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一；,麻醉过程中，应随时保持呼吸道通畅，并注意保温；,麻醉效果的观察,呼吸：深慢而平稳,角膜反射：明显迟钝,肌张力：全身肌肉松弛,皮肤夹捏反射消失。,3.,家兔固定和剪毛,固定用细绳,回收,固定头部要点：,门牙,拉直以使颈部挺起，便于手术,剪毛：,剪刀,贴住,皮肤剪毛；,提起毛再剪，易剪破皮肤,4.,颈部手术,颈部,正中,切口,分离软组织,暴露气管,钝性,分离双侧迷走神经,各自穿,2,根,丝线备用,钝性,分离气管,，,底下穿棉线备用,气管倒,T,形切口，插入,Y,形气管插管，棉线固定,手术刀割开皮肤,一手绷紧皮肤，,另一手用力,一次性割开皮肤,分离软组织,用剪刀、镊子分离出气管,除净气管外表的,结缔组织,等,棉花条,清除气管内的淤血、粘液等,穿线备用,5.,气管插管,气管插管术示意图,-,示气管切口,环状软骨下,1cm,做倒,T,型切口,气管插管术示意图,-,示固定插管,将三通管向肺方向插入，固定,6.,分离神经,由里向外翻出气管一侧组织,颈动脉鞘：,粗,迷走神经,中,交感神经,细,减压神经,神经分离示意图,神经分离示意图,-,示迷走神经,7、腹部手术,切开胸骨下端剑突部位的皮肤,，再沿腹白线切开长约,2ml,的切口。细心分离表面的组织（勿伤及胸骨），暴露出剑突与骨柄（注意不要伤害膈肌）。,2,、将系有长线的金属钩钩住或用线系住胸骨柄，线的,另一端接张力换能器,。,连接实验装置,选实验项目：,呼吸运动的调节,8,、观察正常呼吸曲线,正常呼吸曲线的频率和幅度,7.,观察呼吸运动的影响因素,1.,增加,无效腔,（观察呼吸频率和幅度变化）,2.,窒息：夹闭两侧气管软管（几秒到几十秒，时间不要太长，否则会引起窒息死亡）（,观察呼吸频率和幅度变化,）,3.,吸入,CO,2,：肺活量较大的同学呼出的,CO2,，,10s,以上吹气（不要对着软管直接吹，用手捧住软管，相对密闭，吹气）。（观察呼吸频率和幅度变化）,4.,吸气末吹气，呼气末抽气。,5.,静脉内注入,3,乳酸,2ml,（观察呼吸频率和幅度变化）,6.,切断,右侧迷走神经,，观察呼吸频率和幅度。再切断,左侧迷走神经,，观察呼吸频率和幅度变化。,连续电脉,冲刺激迷走神经中枢端,（靠近头部的一端），观察呼吸频率和幅度变化。,实验结果,“呼吸运动调节”实验分析,实验项目,呼吸运动 预期结果,分析要点,增加吸入气中的,CO2,加深加快,1,）血中,CO2,CO2,经血脑屏障进入脑脊液生成,H2CO3,解离出,H+,刺激中枢化学感受器延髓呼吸中枢兴奋呼吸加深加快,2,）血中,CO2,直接刺激颈动脉窦，主动脉弓外周化学感受器呼吸加深加快,注射乳酸,加深加快,同上，但,H+,不易通过血脑屏障，主要通过外周化学感受器起作用。,吸入纯,N2,（缺氧）,加深加快,血中,PO2,呼吸加深加快；,刺激外周化学感受器感受器呼吸加深加快,长管呼吸（增大无效腔）,加深,1,）,PO2,机制同上；,2,）,PCO2,机制同上；,3,）呼吸肌本体感受性反射影响,切断双侧迷走,N,加深变慢,牵张反射因传入神经切断而中断,点刺激迷走,N,中枢端,呼吸最终终止,肺扩张反射和肺缩小反射的传入神经都在迷走,N,内，点刺激中枢端会导致呼吸运动改变，持续给予点刺激，呼吸运动最终停止。,注意事项,手术中，若遇到出血，常用的止血方法有,:,钳夹止血法，压迫止血法，结扎止血法，烧烙止血法,分离神经时不能用,尖的或锋利的金属机械,；,实验观察中，在刺激开始、撤除时，应做好,标记,。,剪辑和打印结果时，尽量把,波形压缩,，显示,变化趋势,即可，不需要每个波的细节。,刺激神经之前，应先检查是否有刺激电流输出。,神经需刺激时才拉出，不要一直由保护电极勾住，,防止神经干燥,。,每一实验项目必须在前一项目对动物的影响基本恢复之后才能进行。,思考题,分析增加呼吸无效腔，呼吸运动改变的原因。,双侧切断迷走神经以后，呼吸运动的变化说明什么问题？,分析注射乳酸后呼吸运动变化的原因。,