化妆品微生物五项检测

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,化妆品微生物五项检验,菌落总数（,Aerobic bacterial,count,）：化妆品检样,经过处理,，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、,pH,值、需氧性质等），,1g,（,1mL,）检样中所含菌落的总数。所得结果只包括,一群,本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性和兼性厌氧,菌落总数,。,菌落总数检验,菌落总数的测定便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。,48,小时出结果（,30-300,）：,测试流程,数据,处理,混合平板的制备,细菌的培养,检查结果、观察与计数,供试液,的制备,书写检验,记录单,为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每,100mL,卵磷脂吐温,80,营养琼脂中加入,1mL,0.5,的,TTC,溶液，如有细菌存在，培养后菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。,TTC,亦不可多加会抑制菌落生长,推荐了解：,人员培训能力掌握的检验重要指标。,有条件可做视具体样品测试结果。,在,膏霜类化妆品,中,微生物都是吸附或附着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱,下来,因此,需要验证检测方法的有效性。,接种阳性菌计算回收率,未检出,2,天，检出,3-4,天,耐热大肠菌群,Thermotolerant coliform bacteria,系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在,44.5,培养,24h48h,能发酵乳糖产酸并产气。,该菌,主要来自人和温血动物粪便,，可作为粪便污染指标来评价化妆品的卫生质量,推断化妆品中有否污染肠道致病菌的可能。,耐热大肠菌群,检验操作流程,产酸：黄色,产气：气泡,产酸产气,书写检验,记录单,不产酸不产气,增菌培养,供试液的制备,配培养基和稀释液,检查结果判断,44.50.5,24-,48h,分离培养,蛋白胨水培养,最终结果判断,44.50.5,24,2h,靛基质,特征菌落,361,1824h,双倍胆盐乳糖,EMB,琼脂,液面玫瑰红色,紫黑色,粪大肠菌群检查流程图,镜检,结果报告,根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出耐热大肠菌群。,未检出,2,天，检出,4,天,铜绿假单胞菌（,Pseudomonas aeruginosa,）属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，在,421,条件下能生长。,铜绿假单胞菌,检验操作流程,该菌对人有致病力，可使伤处化脓，引起败血症等。在自然界中分布甚广，空气、水、土壤,最终结果判断,增菌培养,供试液的制备,书写检验,记录单,分离纯化,无菌落或无特征菌落,配培养基和稀释液,革兰染色、镜检,氧化酶试验,绿脓菌素试验,生化试验 硝酸盐还原试验,42,生长试验,明胶液化试验,铜绿假单胞菌检查流程图,SCDLP,培养基,十六烷三甲基溴化铵琼脂,361,1824h,361,1824h,特征菌落,灰白色、扁平、周围有水溶性蓝绿色素,镜检,十六烷三甲基溴化铵平板,SCDLP,培养基,黄绿色菌膜,灰白色湿润,氧化酶试验,粉红,/,紫红色,绿脓菌素试验,盐酸层呈粉紫色氯仿层呈蓝绿色,硝酸盐还原产气试验,N,2,明胶液化试验,明胶培养基（高层）,明胶液化,被检样品经增菌分离培养后，经证实为,革兰氏阴性杆菌,，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌；如,绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42生长试验,三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。,结果报告,未检出,2,天，检出,3,天,金黄色葡萄球菌（,Staphylococcus aureus,）为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。,金黄色葡萄球菌,检验操作流程,该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种，能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致败血症。,革兰染色、镜检,生化试验,:,血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,最终结果判断,增菌培养,供试品的处理,书写检验,记录单,分离纯化,无菌落或无特征菌落,配培养基和稀释液,361,361,SCDLP,培养基或,7.5%NaCl,肉汤,24,2,h,Baird Parkers,或血琼脂,2448h,特征菌落,金黄色葡萄球菌检查流程图,镜检,耐盐分,Baird Parkers,平板,灰,/,黑色,血浆凝固酶试验,血浆凝块,液态血浆,甘露醇高盐琼脂,凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染色镜检，证明为,革兰氏阳性葡萄球菌,，并能,发酵甘露醇,产酸，,血浆凝固酶,试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。,结果报告,霉菌和酵母菌数测定（,Determination of molds and yeast count,）化妆品检样在一定条件下培养后，,1g,或,1mL,化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。,本方法根据霉菌和酵母菌,特有的形态和培养特性,，在虎红培养基上，置,282,培养,5d,，计算所生长的霉菌和酵母菌数。（,5-50,）,霉菌和酵母菌,检验操作流程,革兰氏染色操作流程,设备：,恒温培养设备,高压灭菌器（验证）,超净工作台（生物安全柜）,均质器,(,旋涡混合器,),天平（,0.1g,）,显微镜（可要可不要无硬性要求）,保证检验结果正确,常规洁净工作台设置,目前大部分微生物实验室,布局,人员操作方面：,无菌操作，避免污染；,一定专业技术或工作经验（招聘与外部审核时）,相互协作；,测试结果的证明。,日常维护,：,设备的计量与保证；,超净台及时清洁与杀菌（操作前后半小时）；,检验后材料的及时处理；,环境卫生（沉降菌的检测每周）。,油性样品如何处理,稀释液生理盐水,-,极性溶剂、液体石蜡,-,非极性溶剂、吐温,80-,非离子型表面活性剂，分子一端是亲水基团，一端是亲油基团，常用作增溶剂和油,/,水乳化剂。决定了加入的顺序。,问题,2,微生物许可检验项目,问题,3,检验项目,非特殊用途化妆品,特殊用途化妆品,育发 类,染发类,烫发类,脱毛类,美乳类,健美类,除臭类,祛斑类,防晒类,菌落总数,耐热大肠菌群,金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌,霉菌和酵母菌,一个样品包装内有两个以上独立小包装或,分隔（如粉饼、眼影、腮红,等），且只有一个产品名称，原料成分不同的样品，应当,分别,检验相应项目；非独立小包装或无分隔部分，且各部分除着色剂以外的其他原料成分相同的样品，应当按说明书使用方法确定是否分别进行检验。,重点,谢 谢 大 家！,