常见的病原性病毒

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,呼吸道病毒,掌握：流感病毒的形态结构，表面抗原及其功能，变异及其意义，微生物学检查；麻疹病毒的致病性与SSPE的关系，免疫性与特异性预防；风疹病毒垂直传播与先天性感染的关系。,熟悉：主要呼吸道病毒的种类，正粘病毒及副粘病毒的一般通性；流感病毒的血凝性、致病性、免疫性、特异性预防；腮腺炎病毒、腺病毒的致病性。,了解：麻疹病毒的形态结构，血凝及溶血；腮腺炎病毒的免疫性；腺病毒的形态、培养、免疫性；风疹病毒的致病性及其疫苗。,内容：,正粘病毒科：流感病毒,副流感病毒,1-4,，,副粘病毒科 麻疹病毒。,腮腺炎病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒、鼻病毒、风疹病毒,其它呼吸道病毒,冠状病毒、呼肠病毒,第一节 流感病毒,甲型感染人与动物，常可造成大流行,乙型只感染人，致病性低，局部爆发,丙型只引起人轻微上感，很少流行,一、生物学性状,1、形态与结构：球形80120nm，新分离株多呈丝状，长的可达4000 nm,+,，,结构,.,ssRNA(甲乙各8个片端;丙2个片端),1核心 NP RNP,RNA多聚酶(PA.PB,1,.PB,2,),2.包膜,内层为M蛋白,1，,抗原结构稳定，具有型特异性，增加包膜的韧性与完整性。其抗体不具中和作用。,外层为脂质双层,含宿主细胞膜成分。M,2,蛋白镶嵌于包膜中，形成膜通道，利于脱壳和HA的产生。,包膜上的刺突,(1)HA,1941年Hirst发现了血凝现象。他将病毒接种鸡胚后，不慎将鸡胚血管损伤后鸡RBC凝集。以后又发现病毒与禽类和多种哺乳类RBC凝集，4稳定，37解离，解离后RBC不凝集，而V仍可发生凝集。,HA3 HA,0,= 3 (HA,1, HA,2,)。HA,1,与 HA,2,间以精氨酸及二硫键相连。只有精氨酸被蛋白酶裂解，单以二硫键连接时病毒有感染性。,主要功能：,凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞，血凝现象,吸附宿主细胞，构成感染的第一步,具有免疫原性，相应的抗体能抑制血凝现象，此抗体是主要的保护性抗体,.,(2)NA,4条糖肽组成的四聚体，末端扁球形，另一端嵌于包膜的脂双层中,功能：,有利于成熟病毒的释放和扩散。具有酶活性，能水解宿主细胞表面糖蛋白末端,N-2,酰神经氨酸（,V,特异受体）,具有免疫原性，相应的抗体能抑制其酶的水解作用,.,分型、命名、变异,1,.分型： 根据RNP和M蛋白抗原的不同将人流感病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（C），又根据HA、NA抗原性分为亚型H,1-15,、N,1-9,2.命名：型别/宿主名分离地/毒株/序号/年份/亚型号,3.变异：HA NA易发生变异，HA变异更快。,Ag漂移,Antigenic drift,幅度小,量变,HA、NA点突变,中小流行,Ag转变,Antigenic shift,幅度大,质变,HA、NA完全不同,大流行,Ag漂移,新亚型形成的几个学说：,（1）突变选择学说：旧亚型突变的基础上经机体的自然筛选形成新亚型；,（2）动物来源学说：动物流感病毒的突变；,（3）基因重组学说：人和动物甲型流感病毒基因重组成新亚型。,培养特性,鸡胚，初次：羊膜腔；再次：尿囊腔,雪貂最为敏感,敏感宿主 鼠肺：因肺炎而死亡,原代人胚肾、猴肾、狗肾细胞,培养多不出现CPE，用血RBC吸附和血RBC凝集检测,抵抗力：,不耐热。70或冷冻真空干燥可长期保存。对干燥、紫外线、化学药物敏感。,二、致病性与免疫性,V,飞沫,呼吸道粘膜柱状上皮细胞膜唾液酸受体，并在细胞内增殖12天。细胞变性坏死、脱落、粘膜充血、水肿，局部分泌的毒素入血流多有明显的全身症状：发热、发冷、头痛、鼻塞、流涕、咳嗽、全身肌肉疼痛（25天）。仅少数病例V蔓延到细支气管，引起间质性肺炎，年老体弱者可继发细菌性感染导致肺炎死亡率较高。,病后对同型V有短暂免疫力（12年）。主要SIgA抗再感染；抗HA阻断V吸附，,对同型病毒,有牢固免疫力；抗NA减少V释放扩散；IgM，IgG有中和V的能力。,CD4,+,T细胞辅助产生抗体；CD8,+,T溶解感染细胞，不利于病毒增殖，,其溶解没有特异性,。,三、微生物检查法,标本：,咽漱液或咽拭子,V分离：,抗生素处理标本，接种11日龄鸡胚，353天，羊水或尿囊液进行血凝试验。,阳性者再以血凝抑制试验鉴定型别。,首次阴性，仍需盲传3代以确定,。,也可用敏感细胞分离,血清学诊断：,血凝抑制试验，注意所用的抗原毒株,快速诊断：,四 防治原则,避免人群聚集,消毒空气：100M,3,用24ml乳酸与10倍水中加热。,疫苗：（1）灭活疫苗 人 IgG多，SIgM少,（2）减毒活疫苗；低温（2530）传代减毒活疫苗，发病率5070%，但选育无减毒指标、温度敏感重组活疫苗能克服上述缺点。,（3）亚单位疫苗：神经氨酸酶疫苗，抑制V播散 。,治疗：盐酸金刚烷胺及其衍生物抑制V穿入、脱壳，干扰素、板兰根、大青叶有一定疗效。,第二节 副粘病毒,副粘V与正粘V生物学性状相似，但有以下几个特点：,V,体较大,150nm300nm,有两种包膜刺突,：,HN,蛋白,，具有,HA,和,NA,作用，,MV,只有,HA,活性没有,NA,活性； 另一种为,F,蛋白,，具有使细胞融合及溶解细胞,RBC,的作用，经蛋白酶切割成由二硫键连接的,F,1,和,F,2,两个亚单位后，,V,才具感染性。,ssRNA,不分节段。,多数在受染细胞中能产生持续感染。,个别成员之间抗原性上有交叉反应（副流,2,与腮新城鸡瘟,V,）,一、麻疹病毒,（一）生物学性状,：,有HA、F，无NA，,在人胚肾、猴肾、Vero、Hela、人胚肺2倍体细胞内增殖，由于F蛋白的作用能形成多核巨细胞，且核内、胞浆内形成嗜酸性包涵体。,仅一个血清型。,抵抗力较低.,（二）致病性与免疫性：,MV,飞沫、鼻咽分泌物、玩具,在人呼吸道上皮细胞内增殖后入血 全身淋巴组织和单核吞噬细胞内增殖后再次入血（912天） 眼结膜口腔粘膜、皮肤、呼吸道受染产生病变，少数可侵犯神经系统，,症状有：发热、畏光流泪、流涕、眼结膜充血、咳嗽、口腔粘膜出现Koplik氏斑（灰白色外绕红晕）随后12天全身皮肤出现红色斑丘疹。,抵抗力弱者易继发细菌感染，严重者可致死亡。,儿童患麻疹后2-17年个别可出现神经系统疾患亚急性硬化性全脑炎SSPE。由麻疹减毒活疫苗的接种，麻疹发病后移症状也不典型。,免疫力牢固，抗H阻止V吸附，抗H、F抵抗再感染。,（三）微生物学检查,V分离 核酸杂交 血清诊断,（ 四）防治原则,麻疹V减毒活疫苗接种后抗体阳转率90%，免疫力维持1015年，初次8月龄，再次7岁。,丙球胎球作紧急预防。,二、腮腺炎病毒,流行性腮腺炎的病原体,一）生物学性状,具有典型的副粘V的形态，刺突包括HN、F 出现细胞融合。,但细胞病变不明显，。,仅一个血清型。,人是唯一宿主，但可感染猴和其他动物。,二）致病性与免疫性,MPV,飞沫、玩具,呼吸道上皮细胞和两部淋巴结增殖 入血后侵入腮腺及其他器官。,12周自愈，有时可引起睾丸炎20% 卵巢炎5% 无菌性脑膜炎1,获得性耳聋，男性不育症，MPV感染为常见原因。,病后可获得牢固的免疫力。,三）微生物学检查,仅怀疑由MPV引起的无菌性脑膜炎时才做V分离，血清学诊断，PCR检测MPV DNA片端。,四）防治原则,隔离患者，采用MMR三联疫苗，18月龄和12岁时两次接种，儿童发病率明显下降。,Urabe MPV株易产生副作用，现用Leyl Lyun B株取代之,三、副流感病毒,过去分,现在分,副流感病毒 1型,2型,3型,4型,细胞吸附2型，仙台V,副流感V-2型,红细胞吸附1型,副流感V4型,引起儿童、成人呼吸道感染的一类重要的病原体，因生物学性状和引起的临床症状与流感相似，故定名为副流感病毒，共有5个型，过去分4个型。,副流感V所致的呼吸道感染多见且再感染也多见，病后免疫力不强，尚无理想的防治措施。,四、呼吸道合胞病毒,简称合胞病毒，易引起婴幼儿支气管炎和细支气管炎，大约有60%的急性婴幼儿喘息性（,IgE,的产生有关）细支气管炎或肺炎是,RSV,引起，不及时处理死亡率较高。,较大儿童和成人主要引起上呼吸道感染，尚无特殊防治方法，但：肾上腺素 解喘，,IFN,缩短病程，,三氮唑核苷,抑制,mRNA,阻止,RSV,复制酶。,疫苗正在研究中。,几种副粘病毒的比较：,副流感病毒 MV MPV RSV,分型,血凝素（HA）,NA,RBC吸附,鸡胚生长,动物致病,5 1 1 14个亚型,+ + + ,+ ,+ + + ,+ + + ,猴、猪、牛、鼠 猴 猴 黑猩猩,第三节 其他呼吸道病毒,一、腺病毒,分布广泛，侵犯呼吸道、眼结膜、淋巴组织、胃肠道、泌尿生殖道的病原体，腺V科哺乳动物属A-F组49型；禽类属A-F 44型。,1.生物学性状,dsDNA无包膜，7090 nm，20面体立体对称。,252壳粒。12个顶角，每个顶角壳粒有5个，壳粒相邻称为五邻体。,从每个顶角壳粒的基底（毒素有关）伸出一根末端有顶球的纤维。称为纤维突起。此与AV凝集大白鼠恒河猴红细胞活性有关，也是分型依据。,240个非顶角的壳粒各自与6个壳粒相邻称为六邻体，有14种结构与非结构蛋白。,AV不能在鸡胚中繁殖，只能在人源性的细胞中增殖，人胚肾细胞最敏感。引起CPE：肿胀、变圆、聚集成葡萄状。,耐酸、耐乙醚。紫外线30、5630天活。,2.致病性与免疫性,人呼吸道眼结膜：急性咽炎、结膜炎、角膜炎、愿发 性典型性肺炎。,AV 人胃肠道：腹泻,性途径：尿道炎、宫颈炎、膀胱炎,鼠类：肿瘤、细胞转化，Ad,12,E,1,A压抑制MHCI类抗原的表达，逃避免疫监视有关。,中和抗体对同型V具有保护作用,。,3.微生物学检查法,V分离为早出结果可用免疫荧光抗体染色检查，血清学诊断，补体结合试验。,4.防治原则,Ad,4 7,型减毒活疫苗有一定效果，因型别多、有致癌性，尚无很理想疫苗。,二、风疹病毒,RV属批盖病毒科，风疹的病原体。,+SSRNA 60nm有包膜，对热、胆酸、乙醚、氯仿敏感。,只有一个血清型。,人羊膜细胞、兔肾细胞、BHK,21,、Vero中增殖，引起细胞脱落，在BHK,21,中CPE出现较慢，CPE下面通常还可见到正常的纤维细胞。,在其他细胞中也能增殖，但不出现CPE。,RV 人呼吸道23周增殖后入血 上呼吸道症状及耳后及枕下淋巴结肿大，随之面部出现斑丘疹（MV引起的斑丘疹：前驱症状出现后,12天,出现,红色,斑丘疹，头部 躯干 四肢；RV引起的斑丘疹：前驱症状出现后,随之,出现,浅红色,斑丘疹由头面部开始自上而下扩散到躯干，分散，很少汇成片，持续23天,旧疹退去新疹出现,）并迅速遍及全身，,病后可获得持久免疫，,怀孕4个月内感染RV可导致胎儿先天性综合征。,育龄妇女及学龄儿童应接种风疹疫苗。,接触患者的人宜注射（大剂量）丙球作紧急预防。,三、鼻病毒,为小,RNA,病毒科成员之一，球形，,830nm,，,+SSRNA,无包膜。,至少有,115,个血清型。,不能在鸡胚中增殖，实验动物也不易感，能在人胚肺,2,倍体细胞、人胚肾、猴肾原代细胞内增殖，,33,旋转培养易出现病变。,耐乙醚，对酸敏感,Ph3.0,迅速灭活，此点可与肠道,V,区别。,经飞沫传播，对成年人引起普通感冒；,对婴儿引起支气管炎，支气管肺炎。,感染后对同型,V,有持久免疫力。,SIgA,有重要作用，,IFN,有一定的防治作用。,四、冠状 V,+SSRNA 80160nm有包膜，表面有棒状刺突如同日冕状。,引起成人普通感冒（10 30 %）也是慢性支气管炎急性发作的重要病原之一。,在猪、狗、牛等动物可引起腹泻。,病后免疫力维持多久不清楚。,对热、酸、乙醚均敏感。,无特殊防治措施,。,2003年4月16日,世界卫生组织正式宣布新型SARS的元凶是冠状病毒，WHO宣布已完成病原体确定的最后一步工作，证明分离到的冠状病毒引起SARS。,2003年5月15日,动物实验最后确认SARS病原体就是新型冠状病毒。,冠状病毒的分类,在分类学上冠状病毒属（Coronavirus） 属于：,病毒（Viruses）,单链RNA正链病毒，无DNA阶段（no DNA stage）,有壳病毒目（,Nidovirales,）,冠状病毒科（Coronaviridae）,冠状病毒科,冠状病毒属,环曲病毒属,血清型I,血清型III,血清型II,其他血清型,FIPV,CCV,HCoV-229E,TGEV,PEDV,5种,MHV,HCoV-OC43,BCoV,HEVRCV 等,6种,IBV,TCoV,2种,SARS-CoV等,5种,冠状病毒家族,SARS出现以来，全球科学家积极面对，在短期内取得了很大的进展，包括病原体的确认和基因组的测序。虽然如此，应该看到SARS病毒是一种新发现的病毒，人们对他缺乏了解.,为了从根本上解决这个问题，研究人员有必要利用生物信息学的方法从基因组和蛋白质组角度出发对SARS病毒进行分析。,面 临 挑 战,基本科学问题,SARS,病毒编码蛋白与其他冠状病毒有什么异同？不同的蛋白的功能是什么？,SARS,病毒那些蛋白参与了与宿主的相互作用？,SARS,病毒在人体内的细胞受体是什么？,最根本问题：,SARS,病毒造成这次大规模流行性疾病的机制是怎样的？,SARS-CoV可能的发展结局,1. 被人类消灭，有如近几年香港的高毒性的禽流感。这结局对人类而言是最理想的，但要实现此结果必须依靠现在SARS-CoV发病之初的严格控制，并对其来源、演变的进一步研究，以及相应药物的研制。,2. SARS病毒变种，毒力减弱并与人类共存。如果任由其发展并减弱毒力，人类将付出很大的代价。比如感冒病毒.,3. 人类研制出相应的疫苗，从而使SARS病情减弱。SARS-CoV也能与人类共存，当然也有可能因疫苗的作用而象天花一样被人类消灭。,五、呼肠V,dsRNA 1012节段无包膜，球形 6080nm 双层衣壳，20面体 12顶角各有短突起。,能在人胚肾、猴肾原代细胞内增殖，引起CPE（有些毒株尚可在鸡胚中增殖），能凝集O型RBC。,致病性不明确。曾自轻度发热、上呼吸道、下呼吸道及腹泻、肠炎病人，婴幼儿体内分离到V，也有在家禽、啮齿类动物、鸟类节肢动物（蚊）体内分离到此V。,第27章 肠道病毒,掌握主要肠道病毒的种类和共同特性，脊髓灰质炎病毒的型别、致病性、免疫性。,熟悉脊髓灰质炎病毒的形态结构，培养，抵抗力，特异性预防，新型肠道病毒和轮状病毒的形态，结构，型别，致病性，免疫性。,了解柯萨奇V、埃可V、肠道腺病毒的抗原与分型，培养特性，致病性与免疫性。,肠道V属,鼻V属,小RNA V科 心脏V属,口疮V属,人类肠道V属的种类及其所致病性,病毒 型别 疾病,脊髓灰质炎V 13个型 脊髓灰质炎,柯萨奇V A组124型（实际123型 疮疹性咽炎,A,23,=ECHO,9,） B组16型 心肌炎,埃可V 134型实为131 （10型=呼肠V1型,28型=鼻V1型 34型=柯萨奇24型） 无菌性脑膜炎,肠道V,68,小儿肺炎支气管炎,肠道V,69,未发现与人类疾病关系,肠道V,70,急性出血性结膜炎,肠道V,71,脑膜炎、脑炎、似脊灰,手足口病、脑膜炎,肠道V,72,甲型肝炎,肠道V共性,（1）球形20-30nm 20面体衣壳由60个相同壳粒组成，每个壳粒由4种不同的结构蛋白（VP,1-4,）组成。无包膜。+SSRNA，直接起mRNA的作用。,（2）肠道V在氯化铯中的密度为1.34g/cm,3,鼻V 1.40g/cm,3,区别点,（3）耐乙醚，Ph3-5稳定，5630灭活，加入1mol/L Mgcl或其他二价阳离子时，能保护V对热的灭活作用。,（4）对原代猴肾、人胚肾细胞敏感，柯萨奇A组对新生乳鼠敏感。,（5）临床表现可以多样化，中枢N系统症状、心肌损害、腹泻、皮疹等。,(6）V在宿主细胞浆内增殖复制成成熟V体。,第一节 脊髓灰质炎病毒,是脊灰的病原体，易侵犯儿童脊髓前质运动神经细胞引起暂时性或弛缓性肢体麻痹，故称小儿麻痹症，轻型的感染仅表现为上呼吸道及肠胃道症状；隐性感染较多。研究历史：,1840 Heine 对脊灰作了系统的描写,1891 Medin 证实了本病的传染性,1909 Landsteiner V 的病原学,1949 Enders V培养成功,1954 Salk 福尔马林灭活疫苗,1956 Sabin 减毒活疫苗,一、抗原组成及型别,D（Dense.致）抗原/N抗原,经区带离心分为两种V颗粒,C（空壳）抗原/H抗原,用综合试验将V分为三个类型：、。,分子生物学技术分析：三型之间有共同Ag、有小的 抗原变异，但总体上讲是相对稳定的。,补体结合试验：三型之间有共同的补结Ag。,二、致病性和免疫性,脊灰V,过去认为经N、呼吸道、淋巴、皮肤等途径传播,近二十年用黑猩猩研究致病机理和活疫苗的经口接种方法中得知,排出,飞沫,咽、肠道下段上皮C、肠淋巴结内增殖。90%的人不出现或仅出现轻微上感、腹部不适、腹泻,粪便,排出,少数人（10%）,淋巴系统,入血,第一次血症,发热、头痛、恶心等全身,症状此时机体免疫能阻止,V,将发展为隐性轻型感染,单核吞噬细胞系统增殖,第二次V血症:症状加重、无力脊背强直、肢体过敏、疼,痛,入血,1免疫力低下者能,播散致靶器官,轻者：暂时性肢体麻痹,重者：肢体迟缓性麻痹、延髓麻痹，呼吸、心脏衰竭死亡,SIgA清除咽喉、肠道V,病后对同型V有牢固免疫力 IgA、IgM、IgG清除血流V,IgA、IgG维持多年,三、微生物学检查法,V分离：原代猴肾、人胚肾、人羊膜细胞，377-10天见的到CPE，中和试验进一步鉴定型别。,分子生物学技术：核酸杂交、PCR、寡核苷酸指纹图谱。,血清学方法：ELISA、IFA。,四、防治原则,一般预防：隔离病人、消毒排泄物、保护水源。,特异性预防：,Salk死疫苗、Sabin活疫苗（液体、糖丸）。,我国用糖丸剂型-20可保存2年，2月-7岁儿童服用，为防止干扰现象，服用顺序为：、，间隔1月。1次/年，2-3年。血清抗体阳转率100%。,欧美国家采用3价混合疫苗。连服3次，间隔6-8周，效果比分服的好。,我国自1986年以来采用3价混合疫苗。,第二节 柯萨奇V与ECHO V,一、1948年Dalldorf从美国柯萨奇镇两名患麻痹型脊髓灰质炎儿童的粪便分离出来的，生物学性状、致病机理与脊髓灰质炎V相似。在人类引起的疾病见表。,二、ECHO V 在分类上不能归入脊髓灰质炎V，也不能归入柯萨奇V，故称孤儿V，后称肠道细胞病变人孤儿病毒（enteric cytopathognic human orphan virus）。个血清型，生物学性状、致病机理与脊髓灰质炎V相似。在人类引起的疾病见表。,三、新型肠道，指年以来陆续分离出肠道V新的血清型，68、70、71、72型由于临床上仍称为甲型肝炎V，故放肝炎病毒章节里介绍。,第三节 急性胃肠炎V,1972年 Kapikan发现Norwalk,1973年 Bishop发现轮状V,此后又发现肠道腺病毒、星状V、杯状V、冠状V、小园V等与腹泻有关。,一、轮状V,HPV是呼肠V科成员之一，是婴儿腹泻的主要病因。分为7个组（AG）。,AC组引起人、动物腹泻，A组最常见，B组仅在我国成人中爆发流行，C组仅见个别报道；,DG组只引起动物腹泻。,1.生物学性状,球形7075nm，双层衣壳，由于内衣壳壳粒呈放射状排列，形同车轮的辐条，故称轮状V，外衣壳薄而光亮，只有双层衣壳的完整V颗粒才具传染性。,核心为dsRNA，由11个基因片段组成。A组轮状V RNA第10、11片段在凝胶电泳上迁移率有差异，将A组轮状病毒分为长型和短型（如Wa株第10、11片段分子量，在凝胶电泳上迁移率较快，走的距离长；而DS-1株则相反，走的距离短。）我国长型为多见。,根据HRV RNA的电泳图谱作为对HRV的诊断和分型具有其局限性，因为即使在同一次流行中检测的毒株也不尽相同，同时具有相同的图谱的HRV也可以是不同的血清型，这可能象流感基因片段易发生重组一样。,基因片段 编码的多肽,1. VP,1,；2. VP,2,；3. VP,3,；VP,3,限制HRV在C中增殖；4. *VP,4,（VP,5,、VP,8,） VP,4,经蛋白酶裂解后增强HRV感染性；5. NS,53,；6. *VP6；7. NS,34,；8. NS,35,抗原性较强，根据VP,6,抗原性差异将HRV,分；9. *VP,7,为AG组，根据VP,7,抗原性差异将A组分；10.NS,26,为14个型，VP,4,将A组分为1A、1B、2、3、4；11.NS,28,敏感细胞 恒河猴胚肾细胞、MA,104,、非洲绿猴肾传代细胞（CV-1），人胚肺2倍体细胞。标本及维持液里加入胰蛋白酶以增强感染性。,抵抗力：较强，粪便中可存活数日数周，耐酸碱乙醚，5630分钟灭活。,2.致病性与免疫性,经粪,口传播 ABC引起人、动物腹泻，60%以上婴幼儿急性胃肠炎由HRV引起，HRV,小肠粘膜绒毛细胞内增殖，造成绒毛萎缩、变短、脱落。绒毛细胞的坏破，C渗透压改变，电介质平衡失调，大量水分入肠腔，致水样腹泻，伴有呕吐、腹痛、发热等症，腹泻严重者不及时输液可出现脱水酸中毒而死亡。,病后很快产生抗体IgM、IgG、IgA，起主要保护作用的是肠道局部的SigA，只对同型V有保护作用。6个月2岁儿童SIgA量较低，易重复感染。,3.微生物学检查法,电镜及免疫电镜法，诊断率为9095%以上。,细胞培养，分离率为50%以上。,聚丙烯酰胺凝胶电泳结合PCR、核酸杂交；,免疫学方法。,5.防治原则,切断传播途径，疫苗在研究中，及时输液。,二、肠道腺V,EadV不同于Adv的AE组（在结构与化学组成）归属于F组至少分两个型Ead,40,、Ead,41,。,敏感细胞Graham：（腺V5）DNA转染的人胚肾细胞，还有A,549,，引起婴幼儿腹泻仅次于HRV。,三、Norwalk V,球形27nm无、包膜耐酸、乙醚、热（6030不灭活）。,粪口途径，感染1天后发病：恶心、呕吐、腹泻、低热，12天自愈。,有特异性抗体但无保护作用，IgM抗体不作为原发感染的指标，因再次感染时仍可出现IgM。常用电镜免疫电镜查V，固相放射免疫技术查抗体。,生物学特性 脊灰炎V 柯萨奇V ECHO V 轮状V,A B,猴肾人肾人二倍体C + +（Ag） + +（21除外） +,初生小白鼠的致病 + + +,A,9,对猴的致病 + + A,7, +,A,14,A,20,B,3,3.6.7,对人O、RBC感染 + A,21,+ B,5,+,12.13,+,A,24,B,6 1 9.20.21,24.29.30,各种肠道病毒生物学特性的区别,第28章 肝炎病毒,掌握人类肝炎病毒的主要性状及型别，甲、乙肝炎病毒传播方式、免疫、致病特点、抗原抗体的检测方法。,熟悉乙型肝炎病毒的敏感动物，人工自动免疫的应用。,了解丙、丁、戊肝炎病毒的主要性状、传播途径、致病特点。,以肝细胞作为靶细胞、引起病毒性肝炎的病毒,HAV、HEV 胃肠道传播,HBV、HCV、HDV 血途径,CMV、EBV,RV,黄热V,第一节 甲型肝炎病毒,1973年Feinstone首先用免疫电镜技术在急性期患者的粪便中发现了甲型肝炎V（HAV），6年后利用细胞培养分离到HAV，目前已研制HAV的疫苗。,人感染HAV后大多表现为亚临床或隐性感染，仅少数感染者表现为甲肝，不称为慢肝或携带者。,一、生物学性状,HAV属于小RNA V种，形态、大小、结构与肠道V相似。但与肠道V的核苷酸序列无同源性。,HAV基因结构5末端虽不编码蛋白质，但因其序列较保守，各HAV株间均有相似的序列，利用此制作探针进行核酸杂交，快速诊断HAV。,编码区编码的结构蛋白是一个大分子的蛋白质，经断裂后成为VP1、VP2、VP3、VP4（量序排列），HAV仅有一个血清型。,感染模型与培养 黑猩猩和绒猴、红面猴对HAV易感。,敏感细胞：原代绒猴肝细胞、FRhk,6,、W,138,。,二、致病性与免疫性,病人粪便 HAV,手、水、食、食具,口咽部或唾液腺中早期增殖经1550天潜伏期发病。,发病后2周开始出现特异性IgA、IgG，粪便中不再排出V。可能是机体的免疫机制造成肝损伤。,三、微生物学检查法,抗HAV-IgM新近感染指标 ELISA 、RIA,抗HAV-IgG流行病学调查 ELISA 、RIA,HAV-Ag、PCR、核酸杂交、免疫电镜,四、防治原则,一般预防：饮食卫生、消毒排泄物、保护水源。,特异性预防：减毒活疫苗、灭活疫苗、基因工程疫苗。,还可用丙种球蛋白、胎盘球蛋白作紧急预防。,第二节 乙型肝炎V,1963年Blumberg观察到多次接受输血治疗的血友病病人血清中，发现有一种异常抗体能与一个澳大利亚（土著）人的血清起沉淀反应，因而认为后者的血清具有一种新的抗原物质，称为澳大利亚抗原。,后来观察到病毒性肝炎患者血清中常有这种抗原，1967年明确它与乙型肝炎有关，世界卫生组织正式命名为乙型肝炎表面抗原。,HBV在全世界传播，除通过血源传播外，还可通过母婴传播，致先天性感染。,感染者达2亿人，其中1亿在中国，约有10 %转为慢性感染或带毒状态，少数可演变为肝硬化或肝癌。,一、生物学性状,病人血清中的三种乙肝病毒颗粒：,1.Dane颗粒：成熟有感染性的HBV颗粒,DNA多聚酶,-SCPX- 负股有4个ORF,双股DNA,HbsAg，PreS1、S2 HbcAg，HBeAg HbxAg （抗原组成）,脂质双层42nm（Hbs Ag，PreS1、S2）,内衣壳27nm（Hbc Ag，Hbe Ag）,2.小球形颗粒：22nm、抗原组成主要有HbsAg，还有少量PreS1、S2）,3.管形颗粒：由一串小球形颗粒组成，22 nm，抗原组成主要有HbsAg，还有少量PreS1、很少PreS2）。,乙肝病人血清中存在的三种乙肝病毒颗粒,乙肝病毒抗原,HBsAg,有共同抗原决定簇a，两组相互排斥的亚型抗原决定簇：d/y、w/r，构成HBsAg的4个基本型adr、adw、ayw、ayr，,我国以adr为主，少数民族ayw。它是感染的指标，也是疫苗成分，抗-HBs有保护作用。,PreSAg,PreS2 Ag即HBsAg肽链N端前附加55个AA；,PreS1 Ag即PreS2Ag肽链N端前附加128AA，它以肝细胞表面的多聚体、人血清白蛋白作为受体，使HBV吸附到肝细胞上，抗PreS2抗体能阻止HBV入侵肝细胞。 PreS2 Ag对PreS1 Ag有协助作用。 它们是病毒复制、药物疗效的指标。,PreS1、S2抗原性更强，抗PreS1抗体、抗PreS1抗体是肌体康复的指标。 有人主张疫苗应包括这两种成分。,HBcAg,为内衣壳成分，因被HBsAg所覆盖，故不易在血循环中检测。其抗原性强，是CTL的靶Ag之一；,HBcIgG在血清中持续时间长，是既往感染的指标；HBcIgM提示HBV处于复制状态，有传染性。,HBeAg,由PreC及C基因编码，整体转录及转译后成HBeAg，（如仅由C基因转录转译则为HBcAg）。,游离于血清中，其消长与DNA多聚酶消长基本一致，故可作为HBV复制及感染性的指标。,HBe抗体有一定的保护作用，被认为是预后良好的征象。慢性肝炎、肝硬变、肝癌病人血清持续存在HBe抗体是因HBV PreC及C基因变异所致。,HBeAg+孕妇所生的婴儿感染HBV的阳性率大大超过HBeAg阴性抗HBe阳性孕妇所生的婴儿。,动物模型,黑猩猩最为敏感，用于致病机理的研究及疫苗效价安全性检测；鸭用于研究过筛抗HBV药物及消除免疫耐受机制；土拨鼠用作致癌特性的工具；,组织培养,尚未发现敏感细胞，但用HBV DNA导入人肝癌细胞后，该细胞可表达HbsAg、HBeAg、HbcAg，有的还能产生Dane颗粒。,用HBV S基因转染中国地鼠卵细胞可分泌HBsAg而不含其他V蛋白，已用于制备疫苗。,抵抗力,较强 耐低温、干燥、紫外线，高压灭菌，10010，0.5%过氧乙酸、3%漂白粉、5%次氯酸钙、环氧乙烷可使HBV灭活，HbsAg抗原性保留。,二、致病性与免疫性,传染源 患者 携带者,传播途径：血液血制品途径；母婴途径（产道、哺乳、宫腔）,致病性与免疫机制：HBV虽在肝细胞内增殖但对其无直接损害作用，乙型肝炎的临床表现多样化（无症状带毒、急性肝炎、慢性肝炎、重症肝炎、肝硬化）这与免疫机制有关。,乙肝病损机制,1.HBV致机体免疫应答低下，CTL的靶抗原HLA-I的表达减少，致CTL作用减弱，幼龄感染HBV后易形成免疫耐受。,2.HBV的Prec基因变异不能转译出HBeAg，机体针对HBeAg的抗体和细胞免疫对HBV不能起作用。,3.细胞免疫介导的病理损害，CTL对靶细胞的破坏，作用具有,双重性,，,一,是可清除V，,二,是损伤肝细胞：细胞免疫力正常，HBV波及的肝细胞不多，CTL摧毁之，表现为,急性肝炎,；细胞细胞免疫力超常：HBV波及的肝细胞数较多，CTL使大量细胞死坏，肝功能衰歇，表现为,重症肝炎,；细胞免疫力低下，受染细胞部分被杀死，HBV不断释放又无有效抗体中和，构成,慢肝,，肝病变促进纤维细胞增生引起,肝硬化,。,乙肝病损机制2,4.免疫复合物引起的病理损伤,HbsAg抗HBs,HBeAg抗Hbe 沉积肾小球基底膜关节滑液中，激活补体导致型变态反应。,5.自身免疫反应所引起的病理损害,LSP CTL,间接,直接,肝细胞,HBV与原发性肝癌的关系,1、土拨鼠肝炎病毒 土拨鼠3年后100%肝癌，对照组无一只。,2、流行病学观察HbsAg携带者较HBV感染者发生肝癌的危险性高217倍。,3、用分子生物学技术对肝癌组织检测，可发现HBV基因片端（50%为X基因片端）与细胞DNA的整合X基因编码的X蛋白可反式激活癌基因。可能是HBV致癌的启动子，经一系列过程，最终导致肝癌。,4、原发肝癌患者血清中HBV感染指标高于自然人群。,三、微生物学检查,1.ELISA检测两对半（HbsAg-抗HBs、HBeAg-抗Hbe、抗-HBc ）。HbcAg仅存在于肝细胞内，只有脱去外衣壳后才被检测到。结合表讲。,2.HBV DNA检测、核酸杂交试验、PCR。,四、防治原则,切断传播途径。,血源HbsAg疫苗，基因工程疫苗（HbsAg，PreS1、S2,第三节 丙、戊型肝炎V,70年代初期发现部分输血后肝炎病例中，经高敏感的血清学检测方法检测均无HAV、HBVAg存在的依据，故称NANBV。,实际上NANBVZ在HAV、HBV发现之前就存在。1977年有一作者报告：50年代早期低温保存的5 份血清，均是涉及嫌发生输血后肝炎的献血员的血液，20年后检测：2份HBV血液感染志愿者全得肝炎；3份HBV阴性血液感染9个志愿者也得了肝炎，而且同乙肝的潜伏期、症状。,后来发现NANBV有两种，一种主要经过输血引起，89年命名为HCV ，HCV在1991年归属于黄V科丙型肝炎V属；另外一种经过粪口途径传播，现称为HEV。,一、生物学特性,未能在电镜下观察到HCV的形态，不同孔径滤器过滤测定HCV大约3060nm。,因对氯仿、乙醚等有机溶剂敏感，推测HCV有脂类包膜，+SSRNA将HCV分为三个基因型（I欧美； 亚洲为主；亚洲为辅。V、V,1,东南亚。中国为主，V量多难治疗。）,二、致病性与免疫性,隐性感染（多数）,HCV,血、母婴,人 慢性肝炎（少数）肝内淋巴细胞浸润 及肝C坏死，肾小球肾炎、20%患者 肝硬化，少数患者 肝癌,免疫力低下的感染者可形成HBV、HCV 双重感染。病后免疫力不牢固。,三、微生物检查法,1.查HCV的RNA 用套式 RT-PCR,2.查HCV抗体，常用ELISA确诊用（16）免疫印迹法。,四、防治原则,对献血员、血制品检测抗-HCV,疫苗研究有困难，易变、Ag弱。,第四节 丁型肝炎,1977年意大利学者Rizzetto在用免疫荧光检测乙肝患者的肝组织切片时，发现肝细胞内除HbcAg外还有一种新的抗原，当时称为因子，,因子能在HBV辅助下感染实验动物，并在肝细胞内复制增殖，单独却不能，故现在正式命名为HDV。,HDV球形，3537nm，核心为-SSRNA（球状或杆状）和HDAG，起外包以HBV的HbsAg，HDAg刺激机体产生相应抗体（抗-HD）,HDV呈世界性分布:,南意大利、中东地区为主,南美洲、我国西南地区（四川）也有，乙肝患者中HD V感染率为0-10%,传播方式：主要通过血制品输血，也可通过密切接触与母婴途径。高危人群：药瘾者，多次受血者。,HDV、HBV同时感染称,共同感染,。HBV基础上感染HDV称,重叠感染,。 均使HBV感染症状加重，死亡率高。,HDV的致病机理及免疫性还不清楚，HDV-RAN的消长与肝损害相关。HDAg 机体 抗-HDIgM（先），IgG（后）。,我国已建立了测抗HD的ELISA。,预防同乙肝，无特效药物用于治疗，有报道长疗程的IFN可改善症状。,第五节 戊型肝炎V,HEV球形2734nm无包膜，+SSRNA，5 末端编码非结构蛋白，而3端编码结构蛋白，属嵌杯V科。,敏感动物猕猴，经口感染，HEV随粪便排出。,HEV的型别尚不清楚，分别有缅甸毒株与墨西哥毒株，两类毒株有交叉。,呈世界性分布，我国新疆受染者最多，水源污染可致爆发流行，东北、沿海西南散发病例。,感HEV可表现为临床型或亚临床型，成人为临床型，潜伏期29周，发病6周后好转并痊愈，不发展为慢肝。,少数患者可表现为重症肝炎.,孕妇感染HEV发病率高，病情严重可致流产、死产、甚至流产，死亡率为10-20%，,电镜、免疫电镜作病原学诊断，PCR查HEV RNA，查HEV-IgM有诊断意义。,其它肝炎病毒,目前还发现了、TT型肝炎病毒。,庚型肝炎病毒黄病毒属的成员之一，基因组结构与HCV相似，经血、母婴途径传播。单独感染肝损害较轻，与HCV混合感染可干扰HCV。,TT型肝炎病毒。细小DNA病毒科成员之一，为无包膜的单负链环状DNA球形嗜肝病毒。经血传播。可在各型肝炎中出现。,人类五种肝炎区分表,性质 甲型 乙型 丙型 丁型 戊型,病原体 HAV HBV HCV HDV HEV,V大小 27nm 42nm 30-60nm 35-37nm 27-34nm,核酸类型 +SSRNA dsDNA +SSRNA SSRNA +SSRNA,动物模型 黑猩猩猕猴 黑猩 黑猩 黑猩 猕猴,热抵抗力 5630不灭活 602h不灭活 不明 不明 不明,型别 1个血清型 4亚型血清型 1个基因型 不明 不明,传播方式 粪口、水源 血、母婴 血、母婴 血、母婴 粪口水源,粪便排毒 主要+ + +,潜伏期 15-50天 60-160天 30天 14-63天,性质 甲型 乙型 丙型 丁型 戊型,流行情况 流行性地方性 地方性散发性 散发性 散发性 爆发性散发性,V血症 短 长 较长 长 短,无症状携带者 无 多 有 不明 无,持续感染 无 多 多 不明 无,转慢肝、硬化 无 多 多 不明 少,查Ag HAAg HbsAg.HbeAg NS,3-5,区编Ag HDAg HEV,查Ab 抗HA 抗HBsHbeHBc 抗HCV 抗HD 抗HEIgM,被动免疫 人丙球 HBIg 无 同HBV 无,自动免疫 死活疫苗 HbsAg血源、Pr es,1、2,无 同HBV 无,基因工程疫苗 HbsAg基因工程疫苗,人类五种肝炎区分表,第29章 虫媒病毒,目的：,掌握乙型脑炎病毒及森林脑炎病毒的流行病学特点，致病性，免疫性及特异性预防。,熟悉虫媒病毒的共同特点，乙型脑炎病毒、森林脑炎病毒的形态结构，培养特性，微生物学检查法。,了解登革热病毒的性质及致病性。,简介：,也称节肢动物媒介病毒，是指一大类通过吸血虫的节肢动物（蚊、蜱、白蛉等）叮咬人、动物而传播疾病的病毒，具有自然疫源性。,现已发现530多种，至少150种对人致病。,1984年，将虫媒病毒重新分类，分为披膜病毒科（原甲病毒属）、黄病毒科（原黄病毒属）、布尼雅病毒科，即将黄病毒属从披膜病毒科中分出，另立黄病毒科。,在我国流行的主要有：,病毒科 病毒 媒介 疾病 分布,黄科V 流乙V 三带喙库蚊 乙脑 中国,森林脑炎V 蜱 森林脑炎 中国,登革V 伊蚊 登革热 中国,新疆出血热V 硬蜱 出血热 中国,属于黄V科、披膜V科的虫媒V的共同特征,：,1.呈小球形4070nm,2.+SSRNA 外面有二十面体对称衣壳，最外层为脂类包膜，其上镶嵌有糖蛋白组成的血凝素。,3.对热、脂溶体和去氧胆酸钠敏感，Ph3-5不稳定。,4.亲代上股先合成互补的负股RNA，再以此为摸板合成子代基因组正股RNA，在胞浆内增殖，宿主范围广，最敏感的动物是乳鼠。,5.节肢动物既是传播媒介，又是储存宿主，所致疾病有明显的季节性和地方性。,第一节 乙型脑炎病毒,简称乙脑V，1934年日本学者首先自死亡患者脑组织中分离到此种病毒，因此国外亦称日本脑炎V。,引起人的流行性乙型脑炎，过去多见与儿童，现在成人、老年人患者增多。,临床表现有轻有重严重者病死率高，幸存者可留后遗症 。,一生物学性状,M包膜里面,三种结构蛋白 C衣壳中,E 包膜上的糖蛋白血凝素,V在Ph6.0-6.5凝集雏鸡、鸽、鹅RBC,敏感细胞：地鼠肾、幼猪肾原代细胞及C,6,/36蚊传代细胞中增殖 CPE,二、传播途径与致病性,越冬蚊,长期宿主,幼猪,V血症4天,皮下毛细血管壁 人,潜14天,蚊 蚊,内皮C和局部淋巴结,V血症4天,幼猪,潜14天,入血至肝脾单核吞噬C 国外30%,入血发热、寒战、不适 死亡率 国内3-10%,10-15%的感染者V入脑组织，脑实质及脑膜病变，表现为高热、惊厥、昏迷、死亡，幸存者可有后遗症（50%）,三、免疫性,体液免疫为主（IgM、IgG），细胞免疫也有一定的作用。,免疫力稳定持久，隐性感染可以获得同样的免疫力。,四、微生物学检查法,1.血凝抑制试验 1：640可确诊 ；双份血清4倍增高可确诊。,2.补结试验 1：16以上有诊断价值。,3.MacELISA-IgM 急性期病人的血清IgM达90%以上。,4.中和试验 （不常用）仅在新分V的鉴定、流行病学调查。,5.V分离 （不常用） 仅用死者脑组织作标本分离V。,五、防治原则,1.防蚊灭蚊,2.乙脑疫苗接种 对9月10岁儿童和幼猪注射灭活疫苗、减毒活疫苗2次注射保护率60-90%,第二节 登革病毒,是登革热的病原体，由伊蚊传播，流行于热带、亚热带地区，特别是东南亚、西太平洋、中南美洲有流行。我国广西、广东、沿海等地时有发生。,生物学性状与乙脑V相似。,分四个血清型，各型间有抗原性交叉，与乙脑V和西尼罗V也有抗原性交叉。,敏感细胞：伊蚊传代细胞（C6/36），地鼠肾、其它哺乳动物细胞等。,致病性：,存储宿主（人或猪） 伊蚊 人毛细血管壁内皮细胞和单核吞噬,轻型：发热、肌肉关节酸痛、淋巴结肿,细胞中 入血,重型：皮肤出血、休克、多见于V的再次感染者（V与同型或异型抗体结合后利于吞噬细胞的吞噬，并在其中增殖，受染吞噬细胞在CTL及IL-2 IFN-的作用时，可被激活释放TNF、蛋白酶、凝血激酶和一些血管通透性因子，引起C,3,激活、血小板减少、血管通透性增高，重从而引起出血和休克等严重症状。此外大量Ag、Ab复合物也可激活C系统引起血管通透性增高引发休克。,检测与防治,发病的早期取血清作V分离。1周后查血凝抑制抗体、补结Ab。MacELISA-IgM有助于登革热的早期诊断。,疫苗尚未研制成功（必须考虑到抗体的免疫促进作用）,第三节 森林脑炎V,又名苏联春夏脑炎V，壁虱性脑炎V，由蜱传播引起森林脑炎V。,最初在苏联东部发现，中欧和德国也有报告，我国东北和西北的一些林区曾有流行。,生物学特性与乙脑相似。,敏感细胞：人胚皮肤成纤维细胞，鸡胚细胞和传代地鼠肾细胞 CPE,抗原性较一般，与羊跳跃病毒有交叉反应。,蜱是V 的存储宿主,蜱,森林中的兽和鸟类（在中循环） 林区人员被蜱叮咬而感染（也可通过胃肠道或其他途径感染人）10-14天后突然发病：高热、头痛、昏睡、外周型弛缓性麻痹等症死亡率为30%，病后免疫力持久。,诊断同乙脑V,预防以灭陂防蜱叮咬为重点，灭活疫苗。,第30章 出血热病毒,目的：,掌握汉坦病毒的流行病学特点、致病性和免疫性。,熟悉汉坦病毒的形态结构，培养特性、微生物学微生物学检查方法和防治原则。,了解新疆出血热病毒的流行特点和特异性预防方法。,简介,引起出血热的病原体在分类上包括多种病毒，见表。,在我国以发现的主要有汉坦病毒、新疆出血热病毒、登革热病毒。,表 人类出血热病毒的分类,病毒类属,病毒,媒介,疾病,分布,布尼雅V科,汉坦V,新疆出血热V,Rift三谷热V,啮齿动物,蜱,蚊,肾综合征出血热,新疆出血热,Rift出血热,亚欧美非洲,美洲、非洲,中国新疆,黄V科,登革热V,黄热病V,Kyasanur森林热V,Omsk出血热V,蚊,