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,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,灭菌与空气净化,1.概念,2.常用的灭菌方法,3.发酵工业培养基灭菌,4.空气净化,第三章 灭菌与空气净化,灭菌:用物理或化学的方法杀灭或去除物料或设备中所有微生物的过程。,消毒:用物理或化学的方法杀灭或去除物料或设备及环境中的病原微生物,不能杀死芽孢。,3.1 概念,3.2 常用的灭菌方法,1.干热灭菌,2.湿热灭菌,3.紫外线灭菌,4.化学药品灭菌,5.过滤除菌,适用范围:,用于高温下不损坏、不变质、不蒸发物品的灭菌;用于蒸汽或气体不能穿透物品的灭菌,如玻璃、金属等制品的消毒灭菌。,具体方法:,(1)烧灼:用于耐高温物品、小件金属器械的灭菌。,(2)干烤:用干热灭菌箱进行灭菌,,灭菌条件为:160-170,1-1.5 h。,用于灭菌后器具的干燥保存,1.干热灭菌,干热灭菌法:,是利用火焰或干热空气进行灭菌的方法,其原理是利用高温破坏菌体蛋白质与核酸中的氢键,使蛋白质变性或凝固、核酸破坏、酶失去活性,微生物死亡。,适用范围:,用于耐高温、耐高湿的医疗器械和物料的灭菌。,.湿热灭菌,湿热灭菌法:,是将待灭菌物品置于加压的饱和蒸气中进行灭菌的方法。饱和蒸气潜热大,穿透力强,容易使蛋白质变性或凝固、酶失活,灭菌效率较干热空气灭菌法高。,手提式压力蒸汽灭菌器灭菌方法:,在主体内加入适量的蒸馏水,放入待灭菌物;,将顶盖上的排气管插入内壁的管中,盖盖并拧紧;,将灭菌器的热源打开,开启排气阀排完空气后关闭排气阀;,温度达121,维持到规定时间(20min30min),需要干燥的物品,打开排气阀,慢慢放气,待压力恢复到零位后开盖取物。,液体类物品,待压力恢复到零位,自然冷却到60以下,再开盖取物。,灭菌前物品的准备,(1)清洗:,灭菌前应将物品彻底清洗干净,物品洗涤后,应干燥并及时包装。,(2)包装:,1)包装材料应允许物品内部空气的排出和蒸汽的透入。,2)常用的包装材料包括全棉布;如纸包装;带孔的金,属或玻璃容器等。,3)布包装层数不少于两层。用排气式压力蒸汽灭菌器,的物品包,体积不得超过30cm30cm25cm;,4)盘、盆、碗等器皿类物品,尽量单个包装;包装时,应将盖打开;若必须多个包装在一起时,摞放时,,器皿间用吸湿毛巾或纱布隔开,以利蒸汽渗入;,5)物品捆扎不宜过紧,液体物料不能太满。,(3)装载:,)应尽量将同类物品放在一起灭菌,若必须将不同类物品装放在一起,则以最难达到的灭菌物品所需的温度和时间为准;,)物品装放时,上下左右相互间均应间隔一定距离以利蒸汽置换空气;,4)难以灭菌的大包放在上层,较易灭菌的小包放在下层;物品装放不能贴壁,以防吸入较多冷凝水;,5)盘、碟、碗等应处于竖立的位置;纤维织物应使折叠的方向与水平面成垂直状态;玻璃瓶等应开口向下或侧放以利蒸汽进入和空气排出;,射线可直接破坏细菌DNA,导致微生物死亡,适用范围:,用于室内空气、物体表面灭菌。,(1)使用的紫外线波长范围是200nm275nm,杀,菌作用最强的波段是250nm270nm。,(2)紫外线辅照能量低,穿透力弱,仅能杀灭直接,照射到的微生物,因此消毒时必须使消毒部,位暴露于紫外线。,(3)用紫外线灯消毒室内空气时,房间内应保持清,洁干燥,减少尘埃和水雾。,(4)不得使紫外线光源照射到人,以免引起损伤。,3.紫外线灭菌,4.化学药品灭菌,化学消毒灭菌法:,是指利用化学药物渗透细菌的体内,使菌体蛋白凝固变性,干扰细菌酶的活性,抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构,破坏其生理功能等,从而起到消毒灭菌作用。,所用的药物称化学消毒剂。,灭菌剂:某些药物杀灭微生物的能力较强,可以达到灭菌,又称为灭菌剂。,化学消毒灭菌法一般用于环境或器械的消毒灭菌。,醇类:,70%-75%乙醇 蛋白质变性,损伤细胞膜,,脱水;皮肤,器械,酸类:,醋酸 破坏细胞膜和蛋白质;房间消毒(防,呼吸道传染),醛类:,0.5%-10%甲醛 破坏蛋白质;物品消毒,接,种箱、接种室的熏蒸 600mgL环氧乙烷 酶失活;手术器械,,毛皮,食品,,酚类:,3%-5%石炭酸 蛋白质变性,损伤细胞膜;,地面,家具,器皿 2%煤酚皂(来苏儿)蛋白质变性,损伤细,胞膜;皮肤,卤素及化合物,0.2-0.5mgL氯气 破坏细胞膜、蛋白质;饮水,游泳池水10%-20%漂白粉 破坏细胞膜、蛋白质;地面,厕所2.5%碘酒 酪氨酸卤化,酶失活;皮肤,表面活性剂,新洁而灭 蛋白质变性,破坏膜;皮肤,粘膜,手术器械龙胆紫 与蛋白质的羧基结合;皮肤,伤口,氧化剂,0.1%KMn04 氧化蛋白质的活性基团;皮肤,水果,蔬菜3%H202 氧化蛋白质的活性基团;污染物件的表面0.35%过氧乙酸 氧化蛋白质的活性基团;皮肤,塑料,玻璃,,臭氧 氧化蛋白质的活性基团;食品,5.过滤除菌,过除菌法:,滤过除菌法是用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,以达到无菌目的,是一种机械除菌方法。这种机械称为除菌滤过器,,适用范围:,对热不稳定的药物溶液、气体、水等的除菌。,供除菌用的滤器,要求能有效地从溶液中除净微生物,溶液能顺畅地通过,容易清洗,操作简便。,常用除菌滤器有0.22m或0.3m的微孔滤膜。,此法应配合无菌操作法进行。,微生物的热阻,生长温度:5-50,最适温度:25 -27,致死温度:杀死微生物极限温度,致死时间:全部死亡的时间,热 阻:在一定条件下的致死时间,原则:高温瞬时,3.发酵工业培养基灭菌,分批灭菌:又称实消、间歇灭菌、实罐灭菌,罩,罐,大罐,通蒸汽,罩内通蒸汽,分批灭菌:将培养基加入发酵罐,直接通高压蒸气,罐,空消:将高压蒸气直接通发酵罐灭菌,连续灭菌:又称连消,培养基先灭菌,后,通入空消的,发酵罐,配料罐 连消塔 维持塔 冷却管 发酵罐,20s-30s,126-132,5-7min,40-50,配液设备,(二)培养基灭菌设备,2.加热设备:在配料罐里培养基被加热到70,然后,用泵送到加热设备,在20秒的时间内继续加热到130140。常用的加热设备有塔式和喷射式两种。,塔式加热设备又称连消塔,塔的有效高度23m,料液在塔中的流速是0.1ms,因此料液在塔内的滞留时间为230s。它是有多孔导入管和一外套管组成,多孔管的孔径是58mm。,喷射式加热器有一喷嘴,蒸汽由喷嘴喷出,料液从侧面进入加热器而被蒸汽加热。,(三)维持设备,维持设备使加热后的培养基保温定的时间,从而达到灭菌的目的。,维持设备有两种:罐式和管式。罐式的是一个带有上下开口用于进出料的立式密封容器;管式的是用无缝钢管焊成,管内流速可取0.30.6ms。,(四)、冷却设备,喷淋冷却器套管冷却器,板式换热器螺旋板换热器,固体培养基的灭菌,转动的同时加入蒸汽,3.4.空气净化,空气中的微生物的含量和种类随地区、高低、季节、空气中尘埃多少和人们活动情况而异。空气中的微生物一般附着在尘埃和雾沫上。,1.空气净化的方法,2.空气净化的介质,3.空气净化的流程,4.空气净化的原理,1.空气净化的方法,加热,静电除尘,介质过滤,2.空气净化的原理,惯性碰撞作用,阻截作用,布郎扩散作用,重力沉降作用,静电吸附作用,2.空气净化的介质,纤维状或颗粒状过滤介质:棉花、玻璃纤维、活性炭,过滤纸类过滤器,烧结材料过滤介质 新型过滤介质,3.空气净化的流程,除尘 压缩 降温 除油水 加热空气,过滤器 发酵罐,两次冷却、两次分油水、适当加热流程,特点,:,两次冷却、两次分油水、适当加热。空气第一次冷却到3035,第二级冷却至2025,经分水后加热到3035,,冷热空气直接混合式空气除菌流程,特点,:,省去一级冷却和分离设备及空气再加热设备,简化了流程,使冷却水用量也降低了。压缩空气从贮罐出来分两路,一部分进冷却器,经分离器分离水、油雾后与另一部分未处理过的高温压缩空气混合,使混合后的空气温度为3035,相对湿度为5060%。,1)设计合理的空气预处理设备,选择合适的空气净化流程,以达到除油、水和杂质的目的。,2)设计和安装合理的空气过滤器,选用除菌效率高的过滤介质。,3)保证进口空气清洁度,如加强生产场地卫生管理,正确选择进风口,加强空气压缩前的预处理。,4)降低进入空气过滤器的空气相对湿度,如使用无油润滑的空气压缩机,加强空气冷却和去油,提高进入过滤器的空气温度。,提高过滤的方法,习题:,消毒、灭菌、实消、连消、空消,常用的灭菌方法及适用范围,手提式压力蒸汽灭菌器灭菌方法,例举常用化学消毒剂.,空气净化的方法,空气净化的流程,
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