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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,遗传学臭验二,果蝇唾腺染色体,的制备与观察,一、实验目的,口1练习剖取果蝇三龄幼虫唾腺的方法;,口2掌握制作果蝇唾腺染色体标本的技术;,口3.观察果蝇唾腺染色体的形态特征。,二、实验原理,口双翅类昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细,胞很大,其中的染色体称为唾腺染色体,(salivary chromosome);,口这种染色体比普通染色体大得多,宽约5um,长约400m,相当于普通染色体的100150,倍,因而又称为巨大染色体;,口唾腺染色体经过多次复制而并不分开,大约,有1000-4000根染色体丝的拷贝,所以又称,多线染色体(polytene chromosome);,口睡腺细胞中同源染色体互相靠拢呈现联会状,口各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠,拢形成染色中心(chromo,口唾腺染色体经染色后,出现深浅不同、密疏,各别的横纹(band),其数目和位置是恒定的,代表着种的特征,口如果染色体有缺失、重复、倒位、易位等畸,变,很容易在唾腺染色体上识别出来,因此,唾腺染色体是研究染色体畸变的好材料。,三、实验材料,口黑腹果蝇的三龄幼虫,为了得到更好的染色体标本,需要,在2025和营养良好的条件下饲养幼,虫。选择行动迟缓、肥大,爬上管壁的,三龄幼虫(化蛹之前)做标本最佳。,三龄幼虫照片,四、实验仪器与试剂,1.器具:双筒体视解剖镜、显微镜、镊子、,解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸等。,2.试剂:改良苯酚品红溶液、生理盐水、1N,盐酸,五、实验步骤,口实验前知识准备:,果蝇三龄幼虫的唾腺位于幼虫的头部附近,可以看看显微照片中的位置,(点击图片观察放大图),口实验开始,1唾腺剖取,把载玻片置于双筒镜下。载玻片上滴,加生理盐水1-2滴,取三龄幼虫放在其中,操作者两手各握一枚解剖针,左手的解剖,针压住幼虫后端13处,固定幼虫。右手的,解剖针按住幼虫头部,用力向右拉,把头,部从身体拉开,唾腺随之而出,唾腺是一,对透明的棒状腺体。用针剔除脂肪组织,一图示,2.解离:,在载玻片上除去幼虫其它部分,用吸,水吸去生理盐水,然后在腺体上加1-2滴,INHCI溶液,作用5-10min,3.冲洗:,用吸水纸吸去HCl,滴加蒸馏水于腺体,上进行冲洗(两次),4.染色,吸去蒸馏水,加1-2滴苯酚品红溶液,染色10min。,5.压片观察:用镊子加盖玻片,压片。镜检,六、实验结果,.先用低倍物镜观察,找到好的染色体图像后,放到视野中心,再用高倍镜观察。,2.黑腹果蝇染色体是2n=248(图一),但,由于体细胞配对,又因短小的第4染色体和X染,色体的着丝粒在端部,所以染色体的一端在染,色中心上,看上去,各自只形成一条线状和点,状染色体。只有第2和第3染色体的着丝粒在中,央,它们从染色中心以字形向外伸出(2L,2R,3L,3R),因此共有6条(图二),
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