中国药典XXXX年版抗生素品种增

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,中国药典2010年版,抗,抗生素品种,增,增修订,概,概况,一,、概况:2010年,版,版药典抗生,素,素品种收载,情,情况，见表,：,：,品种,原料,新增,制剂,新增,总数,新增,-内酰胺类,头孢菌素类,27,11,48,19,75,30,青霉素类与酶抑制剂,20,3,28,6,48,9,碳青酶烯类及单环-内酰胺类,2,1,2,1,4,2,大环内酯类,13,2,35,4,48,6,氨基糖苷类,14,25,1,39,1,四环素类,6,12,18,利福霉素类,1,7,8,林可霉素类,2,4,6,酰胺醇类,4,11,15,多肽类与肽类,4,2,4,2,8,4,抗真菌类,3,3,6,抗肿瘤抗生素类,6,2,6,1,12,3,磷霉素类,3,5,8,其他抗生素,3,4,7,喹诺酮类,12,3,34,5,46,8,总计,120,24,228,39,348,63,二、2010年版药典,抗,抗生素类药,标,标准增修订,要,要点:,1、鉴别项,下,下尽可能应,用,用专属性强,的,的鉴别反应, 如：,光,光谱法：IR 色,谱,谱法：HPLC TLC等，与,钠,钠、钾、盐,酸,酸盐、硫酸,盐,盐的鉴别反,应,应. 标准,中,中鉴别反应HPLC与TLC二法,并,并列。有利,于,于基层检验,机,机构的选择,。,。,2.,新方法新技,术,术进一步在,标,标准中扩大,应,应用。,2.1,应,应用HPLC-ELSD测定氨,基,基糖苷类抗,生,生素的组分,，,，有关物质,，,，特定杂质,及,及含量的品,种,种进一步增,加,加。,同时,又,又用,该,该方,法,法测,定,定硫,酸,酸盐,（,（SO,4,）的,含,含量,。,。,用HPLC-ELSD,替,替代TLC检,查,查有,关,关物,质,质与,组,组分,，,，可,提,提,高,高检,测,测灵,敏,敏度,。,。,如:,硫酸,依,依替,米,米星,及,及制,剂,剂的,有,有关,物,物质,硫,酸,酸盐,及,及含,量,量测,定,定。,硫酸,卡,卡那,霉,霉素,及,及制,剂,剂的,有,有关,物,物质,卡,卡B,以,以及,含,含量,测,测定,，,，,硫酸,庆,庆大,霉,霉素,及,及制,剂,剂的,庆,庆大,霉,霉素C组,分,分及,有,有关,物,物质,测,测定,，,，,硫酸,小,小诺,霉,霉素,及,及其,制,制剂,的,的组,分,分测,定,定。,妥布,霉,霉素,及,及制,剂,剂的,有,有关,物,物质,测,测定,等,等。,2.2,本,本,版,版药,典,典使,用,用HPCE方,法,法的,品,品种,有,有2,个,个，,其,其中,一,一个,为,为盐,酸,酸头,孢,孢吡,肟,肟中,N,-甲,基,基吡,咯,咯烷,的,的含,量,量测,定,定。,3.,本,本,版,版药,典,典抗,生,生素,类,类增,修,修订,有,有关,物,物质,项,项较,多,多，,-,内,内酰,胺,胺类,抗,抗生,素,素127,个,个品,种,种中,有,有116,个,个品,种,种采,用,用HPLC测,定,定有,关,关物,质,质。,喹诺,酮,酮类46,个,个品,种,种就,有,有40个,品,品种,用,用HPLC法,测,测定,有,有关,物,物质,。,。,其他,如,如:,氯霉,素,素类,，,，大,环,环内,酯,酯类,，,，氨,基,基糖,苷,苷类,利,福,福平,等,等均,增,增修,订,订了,有,有关,物,物质,检,检查,项,项。,3.1,对,对,检,检查,有,有关,物,物质,与,与含,量,量测,定,定的HPLC,方,方法,的,的系,统,统适,用,用性,试,试验,进,进行,修,修改,并,并完,善,善。,3.1.1,在,在,系,系统,适,适用,性,性试,验,验中,均,均规,定,定了,主,主峰,与,与指,定,定杂,质,质峰,的,的分,离,离度,，,，,梯度,洗,洗脱,时,时标,明,明主,峰,峰的,保,保留,时,时间,，,，使,方,方法,的,的可,操,操作,性,性强,，,，保,证,证了,结,结果,的,的准,确,确性,。,。,3.1.2,对,对,杂,杂质,数,数多,或,或多,组,组分,的,的、,分,分离,难,难度,大,大的,品,品种,，,，中,检,检所,提,提供,混,混合,杂,杂质,对,对照,品,品，,多,多组,分,分对,照,照品,及,及标,准,准图,谱,谱.,如阿,莫,莫西,林,林、,阿,阿莫,西,西林,克,克拉,维,维酸,、,、氨,苄,苄西,林,林、,吉,吉他,霉,霉素,、,、乙,酰,酰螺,旋,旋霉,素,素等,。,。,该混,合,合对,照,照品,用,用于,系,系统,适,适用,性,性试,验,验，,测,测得,的,的色,谱,谱图,应,应与,标,标准,图,图谱,一,一致,。,。便,于,于操,作,作，,保,保证,了,了方,法,法的,有,有效,性,性。,3.1.3,由,由于,系,系统,适,适用,性,性对,照,照品,及,及标,准,准图,谱,谱的,提,提供,，,，确,定,定各,杂,杂质,峰,峰的,保,保留,时,时间,，,，有,利,利于,制,制剂,的,的有,关,关物,质,质检,查,查。,可,可利,用,用对,照,照品,溶,溶液,色,色谱,图,图中,杂,杂质,的,的保,留,留时,间,间，,对,对特,定,定杂,质,质进,行,行控,制,制。,3.1.4,有,有,关,关物,质,质采,用,用自,身,身对,照,照时,，,，对,本,本身,纯,纯度,低,低于85%的,品,品种,，,，提,出,出对,自,自身,对,对照,溶,溶液,主,主峰,进,进行,校,校正,。,。以,免,免纯,度,度较,低,低品,种,种采,用,用自,身,身对,照,照法,引,引起,的,的结,果,果偏,高,高而,影,影响,正,正确,性,性,。,4.,-内,酰,酰胺,类,类抗,生,生素,的,的有,关,关物,质,质检,查,查方,法,法与,国,国外,药,药典,基,基本,一,一致,，,，在,分,分离,度,度试,验,验中,根,根据,实,实际,情,情况,进,进行,修,修改,，,，更,有,有利,方,方法,的,的可,操,操作,性,性。,有很,多,多品,种,种采,用,用HPLC梯,度,度洗,脱,脱法,测,测定,有,有关,物,物质,，,，如,：,：头,孢,孢地,尼,尼，,头,头孢,唑,唑林,钠,钠，,拉,拉氧,头,头孢,钠,钠,阿,阿,莫,莫西,林,林及,其,其复,方,方制,剂,剂，,氨,氨苄,西,西林,等,等。,5.,喹,喹诺,酮,酮类,抗,抗生,素,素的,有,有关,物,物质,检,检查,，,，EP、BP,、,、USP,均,均采,用,用TLC,、,、HPLC两,种,种方,法,法进,行,行控,制,制。,本版,药,药典,提,提出,用,用HPLC在,主,主峰,洗,洗脱,后,后梯,度,度洗,脱,脱的,方,方法,，,，将EP,用,用TLC,、,、HPLC两,种,种方,法,法检,测,测的,杂,杂质,在,在同,一,一HPLC系,统,统中,检,检测.,同,时,时,根,根,据,据,各,各,杂,杂,质,质,最,最,大,大,吸,吸,收,收,波,波,长,长,的,的,不,不,同,同,，,，,用,用,双,双,波,波,长,长,检,检,测,测,，,，,对,照,照,品,品,外,外,标,标,法,法,与,与,加,加,校,校,正,正,因,因,子,子,与,与,不,不,加,加,校,校,正,正,因,因,子,子,自,自,身,身,对,对,照,照,法,法,同,同,时,时,并,并,列,列,。,。,杂,杂,质,质A,用,用HPLC,检,检,测,测,灵,灵,敏,敏,度,度,与,与,正,正,确,确,性,性,均,均,优,优,于,于TLC,法,法,。,。,使,使,该,该,类,类,品,品,种,种,标,标,准,准,的,的,技,技,术,术,含,含,量,量,高,高,于,于,国,国,外,外,药,药,典,典,标,标,准,准,。,。,6.,四,四,环,环,素,素,类,类,统,统,一,一,了,了,该,该,品,品,种,种,有,有,关,关,物,物,质,质,与,与,含,含,量,量,测,测,定,定,的,的HPLC,法,法,色,色,谱,谱,条,条,件,件,，,，,与,与2005,年,年,版,版,方,方,法,法,比,比,较,较,有,有,较,较,大,大,改,改,进,进,。,。,检,出,出,的,的,杂,杂,质,质,与,与EP6.0,规,规,定,定,的,的,杂,杂,质,质,有,有,相,相,关,关,性,性,。,。,并,并,根,根,据,据,国,国,内,内,产,产,品,品,实,实,际,际,情,情,况,况,，,，,制,制,定,定,合,合,理,理,的,的,限,限,度,度,。,。,7.,氨,氨,基,基,糖,糖,苷,苷,类,类,用,用HPLC-ELSD,替,替,代,代TLC,检,检,查,查,有,有,关,关,物,物,质,质,与,与,组,组,分,分,，,，,提,提,高,高,检,检,测,测,灵,灵,敏,敏,度,度,；,；,同,时,时,可,可,用,用,该,该,方,方,法,法,测,测,定,定,硫,硫,酸,酸,盐,盐,（,（SO,4,）,的,的,含,含,量,量,。,。,8.,红,红,霉,霉,素,素,类,类,经,经,对,对,几,几,种,种HPLC,方,方,法,法,比,比,较,较,后,后,，,，,采,采,用,用,同,同,一,一HPLC,方,方,法,法,检,检,查,查,红,红,霉,霉,素,素,与,与,其,其,衍,衍,生,生,物,物,以,以,及,及,制,制,剂,剂,中,中,红,红,霉,霉,素,素A,、,、B,、,、C,及,及,有,有,关,关,物,物,质,质,。,。,有,有,利,利,于,于,同,同,类,类,品,品,种,种,间,间,质,质,量,量,的,的,比,比,较,较,。,。,9.,有,有,关,关,物,物,质,质,含,含,量,量,采,采,用,用,多,多,种,种,计,计,算,算,方,方,法,法,，,，,如,如,：,：,不,不,加,加,校,校,正,正,因,因,子,子,的,的,自,自,身,身,对,对,照,照,法,法,，,，,加,加,校,校,正,正,因,因,子,子,的,的,自,自,身,身,对,对,照,照,法,法,，,，,杂,杂,质,质,对,对,照,照,品,品,外,外,标,标,法,法,。,。,根,根,据,据,各,各,品,品,种,种,杂,杂,质,质,的,的,情,情,况,况,，,，,在,在,同,同,一,一,品,品,种,种,中,中,可,可,以,以,同,同,时,时,应,应,用,用2,种,种,或,或3,种,种,的,的,计,计,算,算,方,方,法,法,。,。,10.,增,增,加,加,有,有,机,机,溶,溶,媒,媒,检,检,查,查,的,的,品,品,种,种,较,较,多,多,。,。,10.1,部,部,分,分,品,品,种,种,采,采,用,用,标,标,准,准,加,加,入,入,法,法,，,，,该,该,方,方,法,法,可,可,提,提,高,高,检,检,测,测,灵,灵,敏,敏,度,度,。,。,10.2,另,另,由,由,于,于,生,生,产,产,工,工,艺,艺,的,的,不,不,同,同,，,，,各,各,生,生,产,产,厂,厂,使,使,用,用,的,的,有,有,机,机,溶,溶,媒,媒,也,也,不,不,同,同,，,，,同,同,一,一,品,品,种,种,中,中,可,可,能,能,有,有,几,几,十,十,种,种,的,的,溶,溶,媒,媒,，,，,为,为,方,方,便,便,操,操,作,作,、,、,经,经,试,试,验,验,在,在,标,标,准,准,中,中,规,规,定,定,各,各,溶,溶,剂,剂,的,的,相,相,对,对,调,调,整,整,保,保,留,留,时,时,间,间,（,（RART,）,）,，,，,检,检,查,查,时,时,可,可,先,先,做,做,供,供,试,试,品,品,，,，,从,从,供,供,试,试,品,品,中,中,检,检,出,出,的,的,溶,溶,媒,媒,的,的RART,与,与,规,规,定,定,的,的RART,比,比,较,较,，,，,确,确,定,定,为,为,何,何,种,种,溶,溶,媒,媒,时,时,，,，,再,再,进,进,行,行,对,对,照,照,品,品,测,测,定,定,，,，,可,可,减,减,少,少,工,工,作,作,量,量,，,，,大,大,大,大,降,降,低,低,检,检,验,验,成本,，,提高工,作,作效率,。,。,11.,为,为,保,保证临,床,床使用,的,的安全,有,有效，,供,供注射,用,用-,内,内酰胺,抗,抗生素,，,，除检,查,查有关,物,物质外,，,，增加,高,高分子,聚,聚合物,的,的检查,。,。在原,来,来21,个,个品种,基,基础上,增,增加至42个,品,品种.,2005年,版,版药典-,内,内酰胺类抗,生,生素品种进,行,行高分子杂,质,质检查时，,由,由于该方法,的,的分析周期,较,较长，本版,药,药典对测定,方,方法进一步,完,完善，采用,直,直径较细内,径,径为1cm,长为30cm的玻璃,柱,柱作为色谱,柱,柱。使分析,周,周期缩短至45-60,分,分钟，为原,来,来周期的1/3。,2005年,版,版药典方法,色,色谱柱填充,剂,剂均为sephadex G10,。,。本版药典,增,增加球状蛋,白,白亲水硅胶,为,为色谱柱填,充,充剂的高分,子,子聚合物分,析,析方法,12. 2005年版,药,药典氨基糖,苷,苷类、大环,内,内酯类的含,量,量测定方法,为,为微生物检,定,定法的管碟,法,法，本版药,典,典增加微生,物,物检定法浊,度,度法，二法,并,并列。,13. 更,多,多的品种用,细,细菌内毒素,的,的检查替代,热,热原检查,。,14. 大,容,容量注射液,与,与眼用制剂,增,增加渗透压,摩,摩尔浓度检,查,查。,15.眼用,制,制剂增加防,腐,腐剂检查。,16.标准,中,中涉及的已,知,知杂质，其,化,化学命名均,在,在标准最后,列,列出，便于,与,与国外药典,的,的杂质比较,。,。,三、抗生素,品,品种分类介,绍,绍,下面将重点,介,介绍-内,酰,酰胺类、大,环,环内酯类、,氨,氨基糖苷类,、,、四环素类,、,、酰胺醇类,、,、利福霉素,类,类、喹诺酮,类,类、抗肿瘤,类,类、肽类的,抗,抗生素在新,版,版药典中的,增,增修订的情,况,况。,1.-内,酰,酰胺类抗生,素,素,本类抗生素,包,包括：头孢,菌,菌素类、青,霉,霉素类、酶,抑,抑制剂类、,碳,碳青霉烯类,与,与单环-,内,内酰胺类共127个品,种,种，占抗生,素,素品种的36.8%,。,1.1品种,收,收载情况,：,表1.1,头,头孢菌素类,品,品种收载情,况,况,收载情况,原料,制剂,总计,2010年版药典收载品种,27,48,75,新增品种,11,19,30,头孢菌素类,新,新增品种：,原料：,制,制剂：,1.头孢尼,西,西钠1.注,射,射用头孢尼,西,西钠,2.头孢地,嗪,嗪钠2.注,射,射用头孢地,嗪,嗪钠,3.头孢唑,肟,肟钠3.注,射,射用头孢唑,肟,肟钠,4.头孢吡,肟,肟钠4.注,射,射用头孢吡,肟,肟钠,5.头孢西,丁,丁钠5.注,射,射用头孢西,丁,丁钠,6.头孢克,肟,肟6.,头,头孢克肟片,；,；7.头孢,克,克肟胶囊；,8.头孢克,肟,肟,颗,粒,7.头孢丙,烯,烯9.,头,头孢丙烯片,；,；10.头,孢,孢丙烯干混,悬,悬剂,8.拉氧头,孢,孢钠11.,注,注射用拉氧,头,头孢钠,9.盐酸头,孢,孢他美酯12.盐酸,头,头孢他美酯,片,片；13.,盐,盐酸头孢他,美,美干悬剂；,14.盐酸,头,头孢他美酯,胶,胶囊；15.盐酸头孢,他,他美酯,颗,粒,10.头孢,孟,孟多酯钠16.注,射,射用头孢孟,多,多酯钠,11.头孢,泊,泊肟酯17.,头,头孢泊肟酯,片,片；18.,头,头孢泊肟,酯,酯胶囊；,19.头孢,泊,泊肟酯干混,悬,悬剂,品种,收载情况,原料,制剂,总计,青霉素类,2010年版药典收载品种,新增品种,16,2,28,6,44,8,酶,抑制剂,类,2010年版药典收载品种,新增品种,4,1,4,1,碳青霉烯类,2010年版药典收载品种,新增品种,1,1,2,单环,-内酰胺类,2010年版药典收载品种,新增品种,1,1,1,1,2,2,表1.2,青,青霉素类,，,，酶抑制剂,，,，碳青霉烯,类,类与单环-内,酰,酰胺类品种,收,收载情况,青霉素类与,酶,酶抑制剂:,新增品种：,原料：,制,制剂：,1.阿洛西,林,林钠1.,注,注射用阿洛,西,西林钠,2.美洛西,林,林钠2.,注,注射用美洛,西,西林钠,3.他唑巴,坦,坦3.注射,用,用哌拉西林,钠,钠他唑巴坦,4. 阿莫,西,西林克拉维,酸,酸钾分散片,；,；,5.阿莫西,林,林克拉维酸,钾,钾颗粒；,6.阿莫西,林,林克拉维酸,钾,钾干混悬剂,单环-内,酰,酰胺类新增,品,品种：,原料：,制,制,剂,剂：,氨曲南,注,注,射,射用氨曲南,1.22010年,版,版药典本类,抗,抗生素药质,量,量标准要点,1.2.1,性,性状,本类药物均,为,为半合成的,头,头孢菌素及,其,其制剂，原,料,料药外观性,状,状一般为白,色,色至微黄色,粉,粉末或结晶,性,性粉末。,注射用粉针,剂,剂的外观性,状,状与原料相,同,同。,1.2.2,鉴,鉴别,原料药与注,射,射用粉针的,鉴,鉴别均采用,色,色谱法HPLC，光谱,法,法IR以及,钾,钾、钠离子,火,火焰反应，,也,也有多个品,种,种采用HPLC与TLC二法并列,。,。少数品种,有,有用UV鉴,别,别。,固体口服制,剂,剂一般用HPLC或HPLC与TLC作为鉴,别,别，二法并,列,列。少数有,用,用UV法作,为,为鉴别。,1.2.3,溶,溶液的澄清,度,度与颜色,检查溶液的,澄,澄清度与颜,色,色是控制-内酰胺类,注,注射用的原,料,料药与制剂,内,内在质量的,一,一个重要指,标,标。标准中,大,大部分采用,与,与标准管进,行,行比浊和比,色,色的目测法,。,。,本版药典有,多,多个品种采,用,用紫外-可,见,见分光光度,法,法在特定的,波,波长处测定,吸,吸光度，控,制,制溶液的颜,色,色，如：头,孢,孢尼西钠、,头,头孢噻,肟,肟钠。,1.2.4,有,有关物,质,质,1.2.4.1,头,头孢菌,素,素类药物,原,原料27,个,个品种均,规,规定检查,有,有关物质,，,，制剂42个品种,除,除6个品,种,种颗粒与,干,干混悬剂,由,由于辅料,干,干扰未规,定,定检查有,关,关物质外, 其他,品,品种均有,有,有关物质,检,检查。,头孢菌素,品,品种有关,物,物质检查,均,均采用HPLC法,，,，除头孢,西,西丁钠以,苯,苯基键合,硅,硅胶为填,充,充剂外；,其,其他均以,十,十八烷基,硅,硅烷键合,硅,硅胶为填,充,充剂，反,相,相色谱，,紫,紫外检测,。,。,其中有头,孢,孢地尼、,头,头孢克洛,、,、头孢唑,啉,啉钠、,头,头孢西丁,钠,钠、 头,孢,孢克肟、,头,头孢噻肟,钠,钠、 头,孢,孢噻吩钠,、,、 拉氧,头,头孢钠、,头,头孢呋,辛,辛钠、头,孢,孢丙烯、,头,头孢氨苄,、,、头孢羟,氨,氨苄及其,制,制剂共29个品种,用,用HPLC法梯度,洗,洗脱。,表1.3,头,头孢,菌,菌素的有,关,关物质检,查,查,总数,有关物质,HPLC梯度洗脱,原料,27,27,12,制剂,42,36,17,1.2.4.2,青,青霉素类,、,、酶抑制,剂,剂、碳青,霉,霉烯类与,单,单环-,内,内酰胺类,原,原料22,个,个品种均,规,规定检查,有,有关物质,，,，,制剂25,个,个品种除5个品种,片,片，颗粒,与,与干混悬,剂,剂等由于,辅,辅料干扰,未,未规定检,查,查有关物,质,质外,其,其他品种,均,均有有关,物,物质检查,。,。,有关物质,检,检查均采,用,用HPLC法，,以十八烷,基,基硅烷键,合,合硅胶为,填,填充剂，,反,反相色谱,，,，紫外检,测,测。,其中有阿,莫,莫西林、,阿,阿莫西林,钠,钠、青霉,素,素钠(钾)、青霉,素,素V钾、,氨,氨苄西林,、,、氨苄西,林,林钠、氨,曲,曲南等原,料,料及其制,剂,剂共27,个,个品种采,用,用梯度洗,脱,脱方法。,总数,有关物质,HPLC梯度洗脱,原料,20,20,11,制剂,28,23,15,表1.5,碳青霉烯,类,类与单环,-内酰,胺,胺类,有关物质,检,检查,总数,有关物质,HPLC梯度洗脱,原料,2,2,1,制剂,2,2,1,表1.4,青,青霉,素,素类与酶,抑制剂,有关物质,检,检查,1.2.4.3采用梯度,洗,洗脱时，,由,由于不同,色,色谱柱的,行,行为略有,差,差异，故,在,在系统适,用,用性试验,中,中，应规,定,定主峰的,出,出峰时间,，,，主峰与,已,已知杂质,的,的分离度,等,等要求。,如：头孢,地,地尼规定:,主成分头,孢,孢地尼峰,保,保留时间,约,约为22,分,分钟，E-异,构,构体峰保,留,留时间约,为,为头孢地,尼,尼峰保留,时,时间的1.5倍，,理,理论板数,按,按头孢地,尼,尼峰计算,不,不低于7000，头孢地尼,峰,峰与其相,对,对保留时,间,间0.95和1.1处杂质,峰,峰的分离,度,度均应不,小,小于1.0。,如：头孢,丙,丙烯规定,：,：,头孢丙烯(Z)异,构,构体峰的,保,保留时间,约,约为23,30分,钟,钟，头孢,丙,丙烯（E,）,）异构体,峰,峰的保留,时,时间约为3040分钟，理论板数,按,按头孢丙,烯,烯（Z）,异,异构体峰,计,计算应不,小,小于10000，头孢丙烯,（,（Z）异,构,构体峰与,相,相邻杂质,峰,峰间的分,离,离度应符,合,合要求。,如：头孢,克,克洛规定:,头孢克洛,峰,峰的保留,时,时间约为23分钟,，,，头孢克,洛,洛峰与头,孢,孢克洛-3-异,构,构体峰的,分,分离度应,不,不小于2.0，头,孢,孢克洛峰,的,的拖尾因,子,子应小于1.2。,1.2.4.4,由,由于,梯,梯度洗脱,基,基线噪音,相,相对较大,，,，故规定,供,供试品溶,液,液色谱图,中,中小于对,照,照溶液主,峰,峰面积0.05倍,或,或0.1,倍,倍的峰可,忽,忽略不计,。,。以免基,线,线噪音影,响,响结果正,确,确性。,1.2.4.5,有,有关物质,测,测定结果,计,计算可分,为,为三种方,法,法：,(1).,不,不加校,正,正因子的,自,自身对照,法,法；,(2).,加,加校正,因,因子的自,身,身对照法,；,；,(3).,已,已知杂,质,质对照品,外,外标法。,用杂质对,照,照品外标,法,法计算已,知,知杂质的,含,含量,用,加,加校正因,子,子与不加,校,校正因子,的,的自身对,照,照法计算,已,已知杂质,和,和未知杂,质,质的含量,和,和杂质的,总,总量。,有关物质,包,包括已知,杂,杂质与未,知,知杂质，,故,故在方法,中,中可分别,规,规定用杂,质,质对照品,外,外标法、,加,加校正因,子,子与不加,校,校正因子,的,的自身对,照,照法计算,。,。,如：头孢,他,他啶中吡,啶,啶与头孢,拉,拉定中头,孢,孢氨苄均,采,采用杂质,对,对照品外,标,标法。,头孢拉定,、,、头孢氨,苄,苄、头孢,羟,羟氨苄中7-氨基,去,去乙酰氧,基,基头孢烷,酸,酸（7-ADCA,）,）及头孢,哌,哌酮钠中,杂,杂质A等,均,均采用杂,质,质对照品,外,外标法。,如：头孢,拉,拉定中已,知,知杂质：,7-氨基,去,去乙酰氧,基,基头孢烷,酸,酸（7-ADCA,）,）,双氢苯苷,氨,氨酸（220nm,）,）,头孢氨苄,头孢氨苄,中,中已知杂,质,质：,7-氨基,去,去乙酰氧,基,基头孢烷,酸,酸（7-ADCA,）,）,-苯苷,氨,氨酸,头孢羟氨,苄,苄中已知,杂,杂质：,7-氨基,去,去乙酰氧,基,基头孢烷,酸,酸（7-ADCA,）,）,-对羟,基,基苯苷氨,酸,酸,头孢哌酮,钠,钠中已知,杂,杂质：,杂质A（,原,原称为头,孢,孢哌酮降,介,介物）,如：头孢,羟,羟氨苄:,供试品溶,液,液色谱图,中,中如有杂,质,质峰，含-对羟,基,基苯甘氨,酸,酸和7-,氨,氨基去乙,酰,酰氧基头,孢,孢烷酸按,外,外标法以,峰,峰面积计,算,算，均不得过1.0%,；,；其他单,个,个杂质峰,面,面积不得,大,大于对照,溶,溶液主峰,面,面（1.0%），,其,其他各杂,质,质峰面积,的,的和不得,大,大于对照,溶,溶液主峰,面,面积的3,倍,倍（3.0%）,供,供试品溶,液,液色谱图,中,中任何小,于,于对照溶,液,液主峰面,积,积0.05倍的峰,可,可忽略不,计,计.,如：头孢,哌,哌酮钠,供试品溶,液,液色谱图,中,中如有杂,质,质峰，含杂质A按,外,外标法以,峰,峰面积计,算,算，不得过3.0%，,其,其他单个,杂,杂质峰面,积,积不得大,于,于对照溶,液,液主峰面,积,积的2倍,（,（2）,，,，其他各,杂,杂质峰面,积,积的和不,得,得大于对,照,照溶液主,峰,峰面积的3倍（3.0%）,供试品,溶,溶液色谱,图,图中任何,小,小于对照,溶,溶液主峰,面,面积0.1倍的峰,可,可忽略不,计,计。,1.2.4.6在检测中,根,根据杂质,最,最大吸收,波,波长的不,同,同，采用,双,双波长测,定,定，,如,：,：,头,头,孢,孢,拉,拉,定,定,有,有,关,关,物,物,质,质,测,测,定,定,时,时,，,，,用,用,不,不,同,同,波,波,长,长,测,测,定,定,不,不,同,同,杂,杂,质,质,，,，,用220nm,波,波,长,长,检,检,测,测,双,双,氢,氢,苯,苯,苷,苷,氨,氨,酸,酸,，,，,用254nm,波,波,长,长,检,检,测,测,其,其,他,他,杂,杂,质,质,。,。,1.2.5,高,高,分,分,子,子,聚,聚,合,合,物,物,1.2.5.1,高,高,分,分,子,子,聚,聚,合,合,物,物,是,是,-,内,内,酰,酰,胺,胺,类,类,抗,抗,生,生,素,素,临,临,床,床,过,过,敏,敏,反,反,应,应,的,的,一,一,个,个,主,主,要,要,因,因,素,素,，,，,故,故,在,在,注,注,射,射,用,用,原,原,料,料,及,及,其,其,制,制,剂,剂,标,标,准,准,中,中,增,增,加,加,检,检,查,查,高,高,分,分,子,子,聚,聚,合,合,物,物,，,，,控,控,制,制,一,一,定,定,的,的,限,限,度,度,，,，,对,对,临,临,床,床,用,用,药,药,安,安,全,全,有,有,效,效,具,具,有,有,重,重,大,大,的,的,意,意,义,义,。,。,2005,年,年,版,版,药,药,典,典,已,已,有,有,个,个,品,品,种,种,收,收,载,载,高,高,分,分,子,子,聚,聚,合,合,物,物,检,检,查,查,，,，,本,本,版,版,药,药,典,典,增,增,加,加,到,到42,个,个,品,品,种,种,。,。,其,中,中40,个,个,品,品,种,种,以,以,葡,葡,聚,聚,糖,糖,凝,凝,胶,胶G-10(40,120,m),为,为,填,填,充,充,剂,剂,的,的,玻,玻,璃,璃,柱,柱,（,（1.0,1.4,30cm,）,）,色,色,谱,谱,柱,柱,的,的,凝,凝,胶,胶,色,色,谱,谱,法,法,测,测,定,定,，,，,2个品,种,种以球,状,状蛋白,色,色谱用,亲,亲水硅,胶,胶（分,子,子量为10005000,）,）为填,充,充剂为,色,色谱柱,的,的HPLC法,测,测定。,表1.6 凝,胶,胶色谱,测,测定高,分,分子聚,合,合物,（,200,年版,已,已收载21个,品,品种,）,原料,制剂,头孢哌酮钠,注射用头孢哌酮钠,头孢唑林钠,注射用头孢唑林钠,头孢曲松钠,注射用头孢曲松钠,头孢噻肟钠,注射用头孢噻肟钠,头孢呋辛钠,注射用头孢呋辛钠,头孢他啶,注射用头孢他啶,青霉素钠,注射用青霉素钠,青霉素V钾,青霉素V钾胶囊,阿莫西林,阿莫西林胶囊,头孢拉定,表1.7.,凝,凝胶,色,色谱测,定,定高分,子,子聚合,物,物,（2010年,版,版新增19个,品,品种）,原料,制剂,头孢唑肟钠,注射用头孢唑肟钠,头孢替唑钠,注射用头孢替唑钠,头孢尼西钠,注射用头孢尼西钠,头孢噻吩钠,注射用头孢噻吩,磺苄西林钠,注射用磺苄西林钠,阿洛西林钠,注射用阿洛西林钠,美洛西林钠,注射用美洛西林钠,氯唑西林钠,注射用氯唑西林钠,苯唑西林钠,注射用苯唑西林钠,普鲁卡因青霉素,表1.8HPLC测定,高,高分子,聚,聚合物,（2010年,版,版新增2个品,种,种）,原料,制剂,头孢地嗪钠,注射用头孢地嗪钠,1.2.5.2,国,国内关,于,于-,内,内酰胺,类,类抗生,素,素高分,子,子杂质,的,的研究,工,工作是,于,于70,年,年代开,始,始，经,历,历了近40年,的,的研究,，,，于2000,年,年版药,典,典在4,个,个品种8个药,品,品标准,中,中正式,收,收载了,高,高分子,杂,杂质检,查,查。,2005年版,药,药典扩,大,大到11个品,种,种的21个药,品,品标准,中,中均有,高,高分子,杂,杂质检,查,查。,但在2005,年,年版药,典,典-,内,内酰胺,类,类抗生,素,素品种,进,进行高,分,分子杂,质,质检查,时,时，由,于,于该方,法,法的分,析,析周期,较,较长，,加,加之在,执,执行过,程,程中涉,及,及到较,多,多生产,厂,厂与检,验,验部门,，,，工作,量,量大幅,度,度增加,。,。,作为常,规,规检验,方,方法有,必,必要进,行,行改进,，,，考虑,到,到原药,典,典收载,的,的方法,在,在原理,，,，系统,适,适用性,试,试验，,以,以及方,法,法验证,专,专属性,、,、重现,性,性、准,确,确性等,方,方面均,符,符合要,求,求，而,仅,仅仅是,分,分析周,期,期过长.,因此在,研,研究建,立,立新的,方,方法时,，,，我们,仍,仍采用,凝,凝胶色,谱,谱的分,离,离模式,，,，并采,用,用原方,法,法中的,自,自身对,照,照外标,法,法，进,行,行高分,子,子聚合,物,物杂质,的,的测定,。,。在上,述,述二个,基,基本条,件,件不变,的,的前提,下,下进行,方,方法学,的,的改进,完善,。,。,1.2.5.2.1,拟,拟,采,采用直,径,径较细,，,，内径,为,为1cm,长,为,为30cm的,玻,玻璃柱,作,作为色,谱,谱柱。,以,以sephadexG10,为,为填充,剂,剂，柱,内,内径的,缩,缩小，,柱,柱床体,积,积随之,也,也变小,。,。Kv=0也,降,降低。,分,分析周,期,期缩短,至,至45-60,分,分钟，,是,是原方,法,法周期,的,的1/3。（,见,见图1.1，,图,图1.3）,1.2.5.2.2在系统,适,适用性,试,试验中,规,规定分,离,离度的,要,要求，,在,在高分,子,子杂质,检,检查时,，,，某些,药,药物分,子,子单体,与,与高聚,物,物不能,达,达到基,线,线分离,时,时，其,分,分离度,计,计算公,式,式为：,R=聚,合,合体的,峰,峰高/,单,单体与,聚,聚合体,之,之间的,谷,谷高,（分离,度,度R应大于2.0,）,）。,由于高,分,分子聚,合,合物的,对,对照品,不,不易获,得,得，样,品,品中的,高,高聚物,量,量较少,，,，故不,能,能直接,用,用样品,与,与聚合,物,物对照,品,品配制,分,分离度,试,试验用,溶,溶液，,根据本,方,方法的,分,分离原,理,理，拟,加,加入一,定,定量的,蓝,蓝色葡,聚,聚糖2000,，,，制成,含,含一定,浓,浓度蓝,色,色葡聚,糖,糖2000的,样,样品溶,液,液来进,行,行分离,度,度试验,。,。,根据,上,上面,公,公式,，,，分,离,离度,随,随着,聚,聚合,物,物峰,高,高的,增,增大,而,而增,大,大，,故,故加,入,入蓝,色,色葡,聚,聚糖2000,的,的量,应,应该,有,有一,定,定的,要,要求,，,，在,研,研究,方,方法,时,时，,根,根据,品,品种,项,项下,规,规定,的,的限,度,度及,蓝,蓝色,葡,葡聚,糖,糖2000在,该,该系,统,统中,的,的响,应,应值,般,般加,入,入的,量,量为,聚,聚合,物,物规,定,定限,度,度响,应,应值,的,的1-2,倍,倍即,可,可。,（,（见,图,图1.2,，,，图1.4）,图1.1,阿,阿莫,西,西林,样,样品,分,分析,全,全程,色,色谱,图,图,图1.2,阿,阿莫,西,西林,分,分离,度,度计,算,算色,谱,谱图,图1.3,头,头孢,他,他啶,样,样品,分,分析,全,全程,色,色谱,图,图(,流,流速:0.8ml/min),图1.4,头,头孢,他,他啶,分,分离,度,度计,算,算色,谱,谱图,1.2.5.2.3方法,比,比较,用2005年,版,版药,典,典方,法,法和,改,改进,后,后的,方,方法,测,测定2005,年,年版,药,药典,收,收载11,个,个品,种,种的F值,与,与高,聚,聚物,的,的含,量,量,结,结果,基,基本,一,一致,（,（见,表,表1.9,1.10）,。,。,因此,本,本版,药,药典,凝,凝胶,色,色谱,高,高分,子,子聚,合,合物,项,项下,仅,仅将,色,色谱,柱,柱修,订,订为,内,内径1.01.4cm,长,长为30,40cm的,玻,玻璃,柱,柱。,即,即两,种,种不,同,同规,格,格柱,并,并列,，,，可,根,根据,实,实际,条,条件,选,选择,，,，测,定,定结,果,果是,一,一致,的,的。,品种,2005年版药典方法,F值,改进后的方法,F值,相对偏差,阿莫西林,均值：F=42.63*10,-3,(n=36),均值：F=41.0236*10,-3,(n=31),1.92%,头孢唑林钠,均值：F=1.3807*10,-3,(n=11),均值：F=1.3794*10,-3,(n=33),0.17%,头孢拉定,均值 F=0.815010,-3,(n=5),均值：F=1.676810,-3,(n=5),1.42%,头孢他啶,均值:F= 0.868210,-3,(n=5),均值：F=0.898410,-3,(n=5),1.71%,*F值,为,为对,照,照品,溶,溶液,浓,浓度(g/ml)与,峰,峰面,积,积的,比,比值,表1.9F值,的,的比,较,较,表1.10,高,高,分,分子,聚,聚合,物,物测,定,定结,果,果的,比,比较,品种,批号,2005年版药典方法,高聚物含量（%）,改进后的方法,高聚物含量（%）,相对偏差,阿莫西林囊,0507501,（联邦制药）,均值：0.056%,(n=2),均值：0.0506%,(n=4),5.1,阿莫西林,308507016A,（联邦制药厂）,均值：0.0355%,(n=2),均值：0.033%,(n=3),2.9,头孢唑林钠,比对样品,（苏州制药）,均值：0.0093%,(n=2),均值：0.011%,(n=6),8.3,头孢唑林钠,比对样品,（上海新先,锋,）,均值：0.0154%,(n=2),均值：0.0148%,(n=5),2.0,头孢唑林钠,CZSS051142,（奥奇特）,均值：0.016%,(n=3),均值：0.017%,(n=3),0.3,1.2.6应用HPCE,测,测定,盐,盐酸,头,头孢,吡,吡肟,中,中,N,-甲,基,基吡,咯,咯烷,的,的含,量,量，,是,是本,版,版药,典,典正,文,文收,载,载应,用,用HPCE的2个,品,品种,之,之一,。,。,1.2.7,标,标,准,准中,增,增加,有,有机,溶,溶媒,检,检查,的,的品,种,种较,多,多,1.2.7.1,本,本,检,检查,法,法大,多,多采,用,用涂,层,层毛,细,细管,柱,柱为,色,色谱,柱,柱，,等,等温,，,，程,序,序升,温,温，,顶,顶空,进,进样,，,，,内标,法,法，,外,外标,法,法计,算,算结,果,果。,本,本版,药,药典,部,部分,品,品种,溶,溶媒,残,残留,检,检查,项,项下,采,采用,标,标准,加,加入,法,法计,算,算，,该,该方,法,法可,提,提高,检,检测,灵,灵敏,度,度。,1.2.7.2,由,由,于,于生,产,产工,艺,艺的,不,不同,，,，各,厂,厂使,用,用的,有,有机,溶,溶媒,也,也不,同,同，,同,同一,品,品种,中,中可,能,能有,几,几十,种,种的,溶,溶媒,，,，为,方,方便,操,操作,、,、经,试,试验,在,在标,准,准中,规,规定,各,各溶,剂,剂的,相,相对,调,调整,保,保留,时,时间,（,（RART）,，,，,检查,时,时可,先,先做,供,供试,品,品，,从,从供,试,试品,中,中检,出,出的,溶,溶媒,的,的RART与,规,规定,的,的RART比,较,较，,确,确定,为,为何,种,种溶,媒,媒时,，,，再,进,进行,对,对照,品,品测,定,定，,可,可减,少,少工,作,作量,，,，大,大,大降,低,低检,验,验成,本,本，,提,提高,工,工作,效,效率,。,。,如：,头,头孢,泊,泊肟,酯,酯,残留,溶,溶剂,甲,甲醇,、,、乙,腈,腈、,丙,丙酮,、,、二,氯,氯甲,烷,烷、,异,异丙,醇,醇、,丁,丁酮,、,、乙,酸,酸乙,酯,酯、,四,四氢,呋,呋喃,、,、乙,酸,酸丁,酯,酯、1,2-,二,二氯,乙,乙烷,、,、乙,酸,酸异,丙,丙酯,、,、苯,、,、四,氯,氯化,碳,碳、,环,环己,烷,烷、,二,二氧,六,六环,、,、甲,基,基异,丁,丁基,酮,酮、,吡,吡啶,、,、甲,苯,苯,照,照残,留,留溶,剂,剂测,定,定法,（,（附,录,录P,）,）测,定,定。,色谱,条,条件,与,与系,统,统适,用,用性,试,试验,以,以6%氰,丙,丙基,苯,苯基-94%,二,二甲,基,基聚,硅,硅氧,烷,烷为,固,固定,液,液（,或,或极,性,性相,近,近）,的,的毛,细,细管,柱,柱为,色,色谱,柱,柱，,柱,柱温40,，,维,维持22,分,分钟,，,，以,每,每分,钟,钟100,速,率,率升,温,温至120,，,，维,持,持10分,钟,钟。,进,进样,口,口温,度,度为200,，,，检,测,测器,温,温度,为,为250,，,顶,顶空,瓶,瓶平,衡,衡温,度,度为70,，,平,平衡,时,时间,为,为30分,钟,钟，,取,取系,统,统适,用,用性,溶,溶液,顶,顶空,进,进样,，,，按,正,正丙,醇,醇（,内,内标,）,）、,丁,丁酮,、,、乙,酸,酸乙,酯,酯的,顺,顺序,出,出峰,，,，各,峰,峰间,的,的分,离,离度,均,均应,符,符合,要,要求,。,。,内标溶液,的,的制备,取,取正丙,醇,醇适量，,用,用二甲基,亚,亚砜稀释,制,制成每1ml中约,含,含200,g的溶,液,液，作为,内,内标溶液,。,。,系统适用,性,性溶液的,制,制备,取,取丁酮和,乙,乙酸乙酯,各,各适量，,用,用内标溶,液,液定量稀,释,释成每1ml中约,含,含丁酮和,乙,乙酸乙酯,各,各1mg,的,的溶液，,精,精密量取1.0ml，置顶,空,空瓶中，,密,密封瓶口,，,，作为系,统,统适用性,溶,溶液。,供试品溶,液,液的制备,取,取本,品,品约0.2g，精,密,密称定，,置,置顶空瓶,中,中，精密,加,加入内标,溶,溶液1.0ml使,溶,溶解，密,封,封瓶口，,作,作为供试,品,品溶液。,对照品溶,液,液的制备,根,根据,试,试验确定,的,的具体检,测,测对象，,制,制备对照,品,品溶液。,分,分别精密,称,称取各溶,剂,剂适量，,用,用内标溶,液,液定量稀,释,释制成规,定,定浓度的,溶,溶液，作,为,为混合对,照,照品溶液,，,，混合对,照,照品溶液,中,中各溶剂,的,的浓度分,别,别为每1ml中含,甲,甲醇600 ug,、,、丙酮1mg、异,丙,丙醇1mg、乙腈82ug,、,、二氯甲,烷,烷120ug、丁,酮,酮1mg,、,、乙酸乙,酯,酯1mg,，,，四氢呋,喃,喃150ug、,四,四氯化碳1 ug,、,、环己烷760ug、苯1 ug,、,、1,2-二氯乙,烷,烷1 ug、乙酸,异,异丙酯1mg、二,氧,氧六环76 ug,、,、甲基异,丁,丁基酮1mg、吡,啶,啶40ug、甲,苯,苯178ug。,乙,乙酸丁酯1mg、,精,精密量取,混,混合对照,品,品溶液1.0ml,，,，置顶空,瓶,瓶中，密,封,封，作为,对,对照品溶,液,液,。,测定法,首,首,先,先取甲,烷,烷气体,顶,顶空进,样,样，记,录,录甲烷,的,的保留,时,时间作,为,为色谱,系,系统的,死,死时间,（,（t0,）,）再取,供,供试品,溶,溶液顶,空,空进样,，,，记录,色,色谱图,，,，供试,品,品溶液,色,色谱图,中,中如有,色,色谱峰,，,，按下,式,式计算,各,各色谱,峰,峰的保,留,留时间,（,（tR,）,）相对,于,于正丙,醇,醇保留,时,时间（tR（,正,正丙醇,）,）的,相,相对调,整,整保留,时,时间（RART）；,将得到,的,的RART值,与,与下表,的,的RART值,比,比较，,确,确定供,试,试品中,的,的残留,溶,溶剂种,类,类；再,制,制备相,应,应的对,照,照品溶,液,液，取,对,对照品,溶,溶液顶,空,空进样,，,，记录,色,色谱图,，,，按内,标,标法以,峰,峰面积,比,比值计,算,算，甲,基,基异丁,基,基酮不,得,得过0.5%,；,；、其,他,他均应,符,符合规,定,定。,溶剂,RART值,甲醇,丙酮,异丙醇,乙腈,二氯甲烷,正丙醇,丁酮,乙酸乙酯,四氢呋喃,四氯化碳,环己烷,苯,1,2-二氯乙烷,乙酸异丙酯,甲基异丁基酮,二氧六环,吡啶,甲苯,乙酸丁酯,0.182,0.482,0.529,0.571,0.649,1.000,1.264,1.343,1.454,1.686,1.701,1.941,1.879,2.014,2.404,2.838,3.023,3.053,3.386,1.2.8.2-乙,基,基己酸,对生产,工,工艺过,程,程中使,用,用2-,乙,乙基己,酸,酸的原,料,料，增,加,加2-,乙,乙基己,酸,酸检查,，,，采用,气,气相色,谱,谱法测,定,定。方,法,法也收,载,载在2010,年,年版药,典,典二部,（,（附录, L,）,）.,如:头,孢,孢地嗪,钠,钠、,头孢呋,辛,辛钠、,头孢孟,多,多酯钠,、,、,氨苄西,林,林钠等,。,。,1.2.9 水,分,分,本类药物,原,原料药均,采,采用水分,测,测定法第,一,一法A测,定,定水分，,制剂中辅,料,料对水分,测,测定法有,干,干扰时，,则,则改为干,燥,燥失重。,如:注射,用,用头孢他,啶,啶，因含,有,有10%,的,的碳酸钠,对,对水分测,定,定有干扰,，,，改为60真空,减,减压干燥,，,，,头孢地尼,胶,胶囊也改,为,为60,真,真空减压,干,干燥。,1.2.10不溶性微,粒,粒与可见,异,异物,供注射用,的,的原料药,增,增加不溶,性,性微粒与,可,可见异物,检,检查,以,保,保证制剂,能,能符合注,射,射剂的要,求,求。,由于不溶,性,性微粒光,阻,阻法测定,结,结果仅与,一,一定浓度,范,范围内的,样,样品溶液,成,成正比关,系,系，因此,在,在标准中,规,规定不溶,性,性微粒检,查,查供试品,溶,溶液浓度,。,。,本类药物,制,制剂规格,较,较多，最,多,多有11,个,个规格。,考,考虑临床,使,使用的安,全,全性，在,标,标准中规,定,定：,规格1.0g以下,的,的制剂按,标,标示量折,算,算，每1g样品中,，,，含10,m以上,的,的微粒不,得,得过6000粒，,含,含25m以上的,微,微粒不得,过,过600,粒,粒；,规格1.0g以上,（,（包括1.0g）,的,的制剂按,每,每1个供,试,试品容器,中,中含10,m以上,的,的微粒不,得,得过6000粒，,含,含25m以上的,微,微粒不得,过,过600,粒,粒。,1.2.11 含,量,量测定,本类共127个品,种,种的含量,测,测定均采,用,用HPLC法或HPLC梯,度,度洗脱。,以十八烷,基,基硅烷键,合,合硅胶为,填,填充剂，,反,反相色谱,，,，紫外检,测,测。,为保证方,法,法的专属,性,性与结果,的,的正确性,。,。利用该,类,类药物遇,光,光照或加,热,热能产生,反,反式异构,体,体或E异,构,构体等有,关,关物质。,用,用于制备,系,系统适用,性,性试验用,分,分离度溶,液,液,，,测定分离,度,度，,结果按外,标,标法以峰,面,面积计算,即得。,如：拉氧,头,头孢钠,【含量测,定,定】 照,高,高效液相,色,色谱法（,附,附录D）测定,。,。,色谱条件,与,与系统适,用,用性试验,用,用十八,烷,烷基硅烷,键,键合硅胶,为,为填充剂,；,；以0.01mol/L醋,酸,酸铵溶液-甲醇（19:1,）,）为流动,相,相；检测,波,波长为254nm,。,。取拉氧,头,头孢对照,品,品适量，,加,加水溶解,并,并稀释制,成,成每1ml中约含0.25mg的溶,液,液，取上述溶,液,液适量，,在,在80,水,水浴中加,热,热30分,钟,钟，冷却,，,，取10,l注入,液,液相色谱,仪,仪，记录,色,色谱图，,拉,拉氧头孢R异构体,、,、拉氧头,孢,孢S异构,体,体依次流,出,出；拉氧,头,头孢R异,构,构体和拉,氧,氧头孢S,异,异构体的,分,分离度应,不,不小于4.0，两,主,主峰与相,邻,邻杂质峰,的,的分离度,均,均应符合,要,要求。,测定法,取,取本品,适,适量（约,相,相当于拉,氧,氧头孢25mg）,，,，精密称,定,定，置100ml,量,量瓶中，,加,加水溶解,并,并稀释至,刻,刻度，摇,匀,匀；精密,量,量取10,l注入,液,液相色谱,仪,仪，记录,色,色谱图；,另,另取拉氧,头,头孢对照,品,品适量，,同,同法测定,，,，按外标,法,法以峰面,积,积计算供,试,试品中C,20,H,20,N,6,O,9,S的含量,。,。,如：头孢,地,地尼,【含量测,定,定】,照,照高效液,相,相色谱法,（,（附录D）测,定,定。,色谱条件,与,与系统适,用,用性试验,用,用十,八,八烷基硅,烷,烷键合硅,胶,胶为填充,剂,剂；以0.25%,四,四甲基氢,氧,氧化铵溶,液,液（用磷,酸,酸调节pH值至5.5）-,乙,乙腈-甲,醇,醇（900：60,：,：40）,，,，每1000ml,中,中加入0.1mol/L乙,二,二胺四醋,酸,酸二钠溶,液,液0.4ml为流,动,动相，检,测,测波长为254nm。取头孢地,尼,尼对照品,约,约20mg，置100ml,量,量瓶中，,加,加上述0.1mol/L磷,酸,酸盐缓冲,液,液2ml,溶,溶解后，,用,用流动相,稀,稀释至刻,度,度，摇匀,，,，在水浴,中,中加热不,少,少于30,分,分钟，放,冷,冷，得每1ml中,约,约含0.2mg头,孢,孢地尼与,其,其降解杂,质,质的混合,溶,溶液（其,中,中相对主,峰,峰保留时,间,间0.9,与,与1.2,处,处杂质的,量,量各约为2%），,取20l注入液,相,相色谱仪,，,，记录色,谱,谱图，头,孢,孢地尼峰,保,保留时间,约,约为8分,钟,钟，E-,异,异构体峰,保,保留时间,约,约为头孢,地,地尼峰保,