实验五 鱼的卫生检验

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Central Laboratory of Biology,College of Life Sciences,Hubei Normal University,Central Laboratory of Biology,实验五 鱼的卫生检验,食品营养与卫生学学实验,熟悉鲜鱼类的国家卫生标准,淡水鱼类卫生标准,（,GB2736-94,），掌握鱼类卫生标准的分析方法（,GB/T5009.45-1996,）；,【,实验目的,】,1,、实验材料 淡水鱼,2,、实验设备 具塞锥形瓶、分液漏斗、比色管、紫外分光光度计。,3,、实验试剂,碳酸纳、氢氧化钠、对硝基苯胺、盐酸、亚硝酸钠、正戊醇、三氯乙酸、磷酸组胺、,【,实验材料和设备,】,【,实验方法,】,1,、,溶液配制,碳酸钠溶液（,50g/L,）、氢氧化钠溶液（,250g/L,）、三氯乙酸溶液（,100g/L,）,偶氮试剂：甲液：称取,0.5g,对硝基苯胺，加,5ml,盐酸溶解，再加水稀释至,200ml,，置于冰箱中；乙液：亚硝酸钠溶液（,5g/L,），临用现配。甲液,5ml,与乙液,40ml,混合后立即使用。,组胺标准溶液：精密称取,0.2767g,于（,100,5,）干燥,2h,的磷酸组胺，溶于,100ml,容量瓶中，再加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于,1.0mg,组胺。,磷酸组胺标准使用溶液：吸取,1.0ml,组胺标准溶液置于,50ml,容量瓶中，加致刻度。此溶液每毫升相当于,20,微克组胺。,【,实验方法,】,2,感官检验,淡水鱼：体表有光泽，鳞片较完整不易脱落，粘液无混浊，肌肉组织致密有弹性，腮丝清晰，色鲜红或暗红，无异臭味。眼球饱满，角膜透明或稍有混浊，紧缩或稍有突出。,3,、主要操作步骤,（,1,）样品处理：称取,510g,切碎样品置于具塞锥形瓶中，加入,15.020.0ml100g/L,三氯乙酸溶液，浸泡,23h,过滤。吸取,2.0ml,滤液置于分液漏斗中，加,250g/L,氢氧化钠溶液使呈碱性，每次加入,3ml,正戊醇，振摇,5min,，提取,3,次，合并正戊醇并稀释至,10.0ml,。吸取,2.0ml,正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加,3ml1mol/L,的盐酸，合并盐酸提取液并稀释至,10.0ml,备用。,（,2,）测定：吸取,2.0ml,盐酸提取液于,10ml,比色管中。另吸取,0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00ml,组胺标准使用液（相当,0,4,8,12,16,20,微克组胺），分别置于,10ml,比色管中，加水至,1ml,再各加,1ml,的,1mol,盐酸。样品管和标准管各加,3ml50g/L,的碳酸钠溶液,3ml,偶氮试剂，加水至刻度，混匀，放置,10min,后，倒入,1cm,比色杯。以零管调节零点，于,480nm,处测定吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准系列目测比较。,4,结果计算,X=(A/1000)*100/m*(2/V)*(2/10)*(2/10),式中：,X-,样品中组胺含量，,mg/100g,；,V-,加入三氯乙酸溶液（,100g/L,）体积，,ml,；,A-,测定时样品中组胺质量，微克；,m-,样品质量，,g,。,组胺测定的原理是什么？,