芳香胺类药物的分析

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Page,*,Pharmaceutical,Analysis,第七章 芳香胺类药物的分析,Analytical of Aromatic amines,芳香胺,(,Aromatic amines,),芳胺类,芳烃胺类,（,1,）,（,2,）,例：,benzocaine,procaine hydrochloride,例：,paracetamol,lidocaine,hydrochloride,例：,adrenaline,dopamine hydrochloride,（,1,）,（,2,）,例：,oxprenolol,carteolol,hydrochloride,Page,2,第一节 芳胺类药物的分析,结 构,(,Structure,),1.,芳伯氨基,：重氮化偶合反应；与芳醛缩合成,Schiff,碱；易氧化变色等,2.,水解,：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因,BABA，,其余药物,PABA,3.,弱碱性,：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂滴定,4.,溶解性,：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。,化学性质,(,Feature,),苯佐卡因(,benzocaine,),盐酸普鲁卡因(,procaine hydrochloride),盐酸丁卡因(,tetracaine,hydrochloride).,1.对氨基苯甲酸酯类,Page,3,2.酰胺类,paracetamol acedapsone,lidocaine,hydrochloride,1.,水解,2.,醋酸 乙醇/硫酸 醋酸乙酯,3.对乙酰氨基酚三氯化铁,4.弱碱性：叔胺氮原子生物沉淀剂沉淀,5.酰胺氮原子与金属离子络合显色,bupivacaine,hydrochloride,结 构,(,Structure,),化学性质,(,Feature,),对乙酰氨基酚(,paracetamol,),醋氨苯砜(,acedapsone,),盐酸利多卡因(,lidocaine,hydrochloride),盐酸布比卡因(,bupivacaine,hydrochloride).,(共性),(特性),Page,4,芳伯氨基,：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺,NaNO,2,/,HCl,碱性,-,萘酚 有色偶氮染料（橙黄到猩红色）,潜在芳伯氨基,：对乙酰氨基酚、醋氯苯砜,盐酸或硫酸加热水解,NaNO,2,/,HCl,碱性,-,萘酚 有色偶氮染料（红色）,区别盐酸丁卡因,：,（乳白色）,（一）重氮化偶合反应,鉴别试验,(,Identification),Page,5,（二）与三氯化铁反应,（蓝紫色）,（三）与金属离子反应,与铜和钴离子反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因）,硫酸铜/碳酸钠试液,蓝紫色配合物,氯化钴/酸性溶液,亮绿色细小钴盐沉淀,显黄色（溶于氯仿）,2.,羟肟酸铁盐反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因胺）,浓过氧化氢/加热至沸 羟肟酸 三氯化铁 羟肟酸铁,（紫红色）,3.,与汞离子反应,芳酰胺类，如盐酸利多卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸,对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸,黄色,红色,或,橙黄色,鉴别试验,(,Identification),Page,6,（四）水解产物反应,1.盐酸普鲁卡因10氢氧化钠溶液白色（加热变为油状物）,继续加热 蒸气（二乙氨基乙醇）（能使润湿的红色石蕊试纸变为蓝色）,加热至油状物消失 放冷、加盐酸 白色（能溶于过量的盐酸）,2.苯佐卡因氢氧化钠试液 煮沸 乙醇 加入碘试液/加热 黄色（碘仿臭气）,（五）制备衍生物测熔点,1.盐酸利多卡因 三硝基苯酚 三硝基苯酚利多卡因（,mp.228232）,盐酸布比卡因 三硝基苯酚布比卡因（,mp.194）,2.,盐酸丁卡因 25硫氰酸铵溶液/5醋酸溶液 丁卡因硫氰酸盐（,mp.131）,鉴别试验,(,Identification),Page,7,（六）紫外特征吸收光谱,药物,溶剂,浓度,(,g/,mL,),max,(nm),备注,对乙酰氨基酚,HCl,(10.3g/L)-,甲醇(1:99),0.4%,NaOH,10,249,860980,BP2003,8,257,715,Chp2005,用于含量测定,苯佐卡因,氯仿,278,USP24,与对照吸收相同，两者之差不超过3.0%,盐酸丁卡因,pH6,磷酸盐缓冲液,10,310,同上，两者之差不超过2.0%,盐酸普鲁卡因胺,0.1,mol/L,NaOH,10,273,580610,BP2003,水,5,280,Chp2005，,片剂和注射剂鉴别,醋氨苯砜,无水乙醇,5,256，284,Chp2005,鉴别试验,(,Identification),Page,8,（七）红外吸收光谱,盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺,波数,cm,-1,波数,cm,-1,鉴别试验,(,Identification),酯羰基,C=O 1692 ,酯基,C-O 1271,1170,1115 ,二乙胺盐,N-H 2585 2645（,略向高波数）,1550（,N-H,酰胺带）,1280（,N-H,酰胺带）,Page,9,（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质,工艺：,对乙酰氨基酚,的有色氧化产物,乙醇溶液的澄清度与颜色,：中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色。（比浊，比色）,有关物质：,中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、,O-,乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）,药典规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，,TLC,限度检查。,对氨基酚的检查,特殊杂质检查,(,Detection of specific impurities),Page,10,对氨基酚,乙酰化不完全或贮藏不当引起水解毒性较大并有色泽,检查方法：,取本品1.0,g，,加甲醇溶液（1,2,）20,ml,溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1,ml，,摇匀，放置30,min；,如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0,g,加对氨基酚50,g,用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005%）。,注：对氨基酚对照溶液不稳定，应临用前新鲜配制。,特殊杂质检查,(,Detection of specific impurities),Page,11,（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,限度：,水解产物对氨基苯甲酸，不得超过1.2%。,检查方法：,TLC,法，对氨基苯甲酸对照品对照，对二甲氨基苯甲醛溶液显色。,黄色,特殊杂质检查,(,Detection of specific impurities),Page,12,容量分析方法,色谱法,分光光度法,亚硝酸钠滴定法,非水溶液滴定法,含量测定,(,Assay),spectrometry,sodium nitrite method,non-aqueous,titrimetry,volumetric analysis,chrometography,Page,13,亚硝酸钠滴定法,sodium nitrite method,原理：,条件：,1、加入适量溴化钾加快反应 2、加入过量盐酸1:2.56,3、室温10 30 4、滴定管尖端插入液面下滴定,终点指示方法：,1、永停法,2、外指示剂法（碘化钾淀粉）,Page,14,非水溶液滴定法,non-aqueous,titrimetry,盐酸丁卡因,盐酸利多卡因,侧链烃胺的叔胺氮,侧链哌啶环的叔胺氮,弱碱性,高氯酸非水滴定,注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰,盐酸丁卡因加醋酐以突出终点；,例,：盐酸利多卡因的非水滴定反应过程：,指示剂：结晶紫,指示剂：萘酚苯甲醇,盐酸布比卡因,Page,15,分光光度法,(,spectrometry),对乙酰氨基酚在257,nm,波长处有最大吸收，中国药典2005版采用百分吸收系数（）法，测定对乙酰氨基酚的含量。,【含量测定】取本品约40,mg，,精密称定，置250,ml,量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50,ml,溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5,ml，,至100,ml,量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10,ml，,加水至刻度，摇匀，照紫外可见分光广度法（药典,Chp2005,版附录,A），,在257,nm,的波长处测定吸光度，按,C,8,H,9,NO,2,的吸收系数（）为715计算，即得。,例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂,Page,16,比色法,芳伯氨基的重氮化偶合反应生成有色偶氮染料,专属性差,盐酸普鲁卡因与1,2-萘醌-4-磺酸钠溶液反应生成棕红色化合物,适用于盐酸普鲁卡因及其制剂的常规分析,快速荧光测定,盐酸普鲁卡因胺结构中的芳伯氨基与荧胺反应，生成荧光物，可在,400nm,、,485nm,波长处测定荧光强度,较重氮化法灵敏、简便，适用于普鲁卡因胺制剂的测定。,Page,17,以苯甲酸为内标，可以同时测定盐酸普鲁卡因注射液中的普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸（,PABA），,不需分离提取，准确简便。,色谱条件,（色谱柱、流动相、检测器）,测定方法,（供试品溶液、对照品溶液的制备，进样量，计算方法）,高效液相色谱法,(,HPLC),Page,18,体内药物分析,应用示例：对乙酰氨基酚急性中毒的血药浓度测定,色谱条件：,Nova-PackC,18,柱（4,m,150mm3.9mm），Nova-PackC,18,预柱,柱温：25，流动相为甲醇水（50:50）流速：0.8,ml/min,二极管阵列检测器，检测波长254,nm,血浆样品制备：,取静脉血34,ml，,置含肝素抗凝剂的离心管中，离心分离5,min(3000rpm)，,上清液为待测血浆。吸取上述血浆1,ml，,加饱和硫酸锌溶液1,ml，,沉淀蛋白后，加入乙醚5,ml,涡旋混合1,min，,离心20,min(3000rpm)。,精密吸取乙醚液3.0,ml,于50 氮气流吹干，冷至室温，以蒸馏水500,l,溶解残渣，取10,l,进样。,对照品溶液的制备：,配制对乙酰氨基酚甲醇溶液（10,mg/ml），,并用甲醇逐级稀释成浓度为0.01,mg/ml5mg/ml,的对照品溶液，4 冰箱存放备用。,意义：准确快速 有效帮助临床医生确诊，提高医疗质量。,Page,19,