《DNA重组技术的基本工具》课件一（）（人教版选修3）

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,1.1 DNA,重组技术的基本工具,1.1 DNA重组技术的基本工具,DNA重组技术的基本工具课件一（）（人教版选修3）,DNA,重组技术的基本工具,准确切割,DNA,的工具（,“,分子手术刀,”,）,DNA,片段的连接工具（,“,分子缝合针,”,）,基因转移工具（,“,分子运输车,”,）,基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具：,DNA重组技术的基本工具准确切割DNA的工具（“分子手术刀”,思考,在自然界中有一些生物的,DNA,可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例？,现今存在的生物为什么没有在长期的进化过程中被外源,DNA,的入侵而灭绝，仍能保持一种稳定状态？,怎样才能使外来的,DNA,失效从而保护自身？,思考在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。,识别双链,DNA,分子的某种,特定的核苷酸序列,，并且使每一条链中,特定部位,的两个核苷酸之间的,磷酸二酯键,断开。,主要是从,原核生物中分离纯化出来,的一种酶。能将外来的,DNA,切断,，由于这种切割作用是在,DNA,分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。,4000,种。,1,、来源：,2,、种类：,3,、作用：,4,、结果：,形成两种末端,一、“分子手术刀”,限制性核酸内切酶,黏性末端,平末端,识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中,限制酶切割,DNA,后形成的末端,黏性末端、平末端是如何形成的？,限制酶切割DNA后形成的末端黏性末端、平末端是如何,DNA重组技术的基本工具课件一（）（人教版选修3）,重播,重播,什么叫黏性末端？,当限制酶,从识别序列的中心轴线两侧切开时，,被限制酶切开的,DNA,两条单链的切口，带有几个,伸出的核苷酸,，他们之间正好,互补配对,，这样的切口叫,黏性末端,。,什么叫黏性末端？当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开,什么叫平末端？,当限制酶,从识别序列的中心轴线处切开时，,切开的,DNA,两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫,平末端,。,什么叫平末端？当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,基因的针线,DNA,连接酶,切断的,DNA,片段要与受体细胞的,DNA,连接，你觉得可以用什么酶？,DNA,聚合酶和,DNA,连接酶有何相同点和不同点？,基因的针线DNA连接酶切断的DNA片段要与受体细胞的DN,DNA,连接酶,DNA,聚合酶,连接,DNA,链,双链,单链,连接部位,在两,DNA,片段之间形成磷酸二酯键,将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的,3,末端的羟基上，形成磷酸二酯键,DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链双链单链连接部位在两DN,限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，所用,DNA,连接酶是否可以不加选择？,E.coliDNA,连接酶：连接黏性末端,T,4,DNA,连接酶：连接黏性末端和平末端,限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端,基因进入受体细胞的载体,要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。,基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的,基因进入受体细胞的载体,假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？,作为载体没有切割位点将怎样？,目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？,如果载体对受体细胞有害将怎样？,基因进入受体细胞的载体假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎,作为载体的必要条件,能自我复制,有切割位点,能与目的基因结合,能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；,有遗传标记基因,对受体细胞无害,比较容易得到,作为载体的必要条件能自我复制,3,、基因的运输工具,运载体,能复制并带着插入的目的基因一起复制,有切割位点,有标记基因的存在，将来可用含青霉素的培养基鉴别。,3、基因的运输工具运载体能复制并带着插入的目的基因一起复,练习,在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的,DNA,片段，需使用（）,同种限制酶,B.,两种限制酶,同种连接酶,D.,两种连接酶,练习在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使,不属于质粒被选为基因运载体的理由是,A,、能复制 （）,B,、有多个限制酶切点,C,、具有标记基因,D,、它是环状,DNA,D,练习,不属于质粒被选为基因运载体的理由是D练习,3),基因工程是在,DNA,分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （）,A,、人工合成目的基因,B,、目的基因与运载体结合,C,、将目的基因导入受体细胞,D,、目的基因的检测和表达,C,练习,3)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作,大肠杆菌的一种限制酶（,EcoR),能识别,GAATTC,序列，并在,G,和,A,之间切开形成黏性末端。,Sma,能识别,CCCGGG,序列，并在,C,和,G,之间切割形成平末端。,大肠杆菌的一种限制酶（EcoR)能识别GAATTC序列,T,磷酸二酯键,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,A,T磷酸二酯键1234512345 A,