自身抗体的检测及应用--课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,ppt课件,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,自身抗体的检测及应用,1,ppt课件,自身抗体的检测及应用 1ppt课件,自身抗体,【,概念,】,由各种原因造成的机体,B,细胞产生针,对自身组织成分的抗体，称为自身抗体。,自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志,，,每,种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体谱,。,2,ppt课件,自身抗体 2ppt课件,自身抗体的意义,自身免疫性疾病的诊断；,疾病活动性的判断；,疗效的观察及预后；,指导临床用药等；,进行不同疾病的鉴别诊断。,3,ppt课件,自身抗体的意义 自身免疫性疾病的诊断；3ppt课件,自身抗体的检测方法,4,ppt课件,自身抗体的检测方法4ppt课件,(1),间接免疫荧光法(,IFT):,检测,ANA,的金标 准，具有很高的敏感性和特异性。,将稀释的血清与生物载片（反应区内固定有包被基质的生物薄片）温育，如果样本是阳性的，特异性,IgG,、,IgA,和,IgM,抗体与相应的核抗原结合。在第二次温育时，荧光素标记的抗人抗体与结合在生物基质上的抗体反应，形成荧光显微镜下所观察到的特异性荧光模式。,5,ppt课件,(1)间接免疫荧光法(IFT):检测ANA的金标,（,2,）免疫印记法：,将经亲和层析纯化的抗原包被在固定的位置,，,每一种抗原只对应一条条带,，,不会产生非特异性反应条带,，,结果灵敏度高,、,特异好,，,判断实验结果简单,，,每个反应区均有质控带，可以显示操作是正确,，,阴性与阳性的结果明显,，,容易判断,，,条带显色与抗体滴度相关,。,6,ppt课件,（2）免疫印记法：将经亲和层析纯化的抗原包被在固定的位置，每,（,3,）酶联免疫吸附测定法（,ELISA,）：,该法检测自身抗体快速、敏感及特异性高，但对抗原的要求很高，必须使用高质量的纯化抗原，由于一种抗原只能检测一种抗体，多种抗体的检测就必须多种单独的抗原，因此该法在临床免疫实验室的应用受到一定限制,。,7,ppt课件,（3）酶联免疫吸附测定法（ELISA）：该法检测自身抗体快速,自身抗体检测常用方法学,间接免疫荧光法：解决有与无的问题,免疫印迹法：解决有什么的问题,酶联免疫吸附试验：解决有多少的问题,8,ppt课件,自身抗体检测常用方法学间接免疫荧光法：解决有与无的问题,2024/11/17,9,ppt课件,2023/8/39ppt课件,抗核抗体（,ANA,）,【,定义,】,ANA,是抗核酸和核蛋白抗体的总称，泛指抗各种细胞核成分的抗体。,【,分类,】,(1),抗核蛋白抗体,(2),抗,DNA,抗体,(,包括抗,dsDNA,和抗,ssDNA),(3),抗可提取性核抗原,(ENA),抗体,10,ppt课件,抗核抗体（ANA）【定义】ANA是抗核酸和核蛋白抗体的总称,抗核抗体（,ANA,）,检测方法：间接免疫荧光法（检测总抗）,根据荧光显微镜下细胞的形态确定核型,(,颗粒型，均质型等,),，用荧光强度判定抗体滴度,(1:100,，,1:320,，,1:1000,，,1:3200,等,),优点：敏感性高,缺点：操作复杂，对人员要求高，各实验室标准有差异,11,ppt课件,抗核抗体（ANA）检测方法：间接免疫荧光法（检测总抗）11,抗核抗体（,ANA,）,均质型,与,AHA,（抗组蛋白抗体,）,、抗,DNA,有关，引起,LE,形成主要见于,SLE,、药物性狼疮,核膜型,与抗,ds-DNA,有关，,多见于,SLE,，特别是有肾炎者,12,ppt课件,抗核抗体（ANA）均质型核膜型12ppt课件,抗核抗体（,ANA,）,核点型,与抗,ENA,有关，应进一步查特异性抗体,核仁型,多见于系统性硬皮病,13,ppt课件,抗核抗体（ANA）核点型核仁型13ppt课件,特异性抗体检测,检测除,ANA,以外其他项目。,其中抗中性粒细胞胞浆抗体,(ANCA),和抗双链,DNA,抗体,(,抗,dsDNA),是用间接免疫荧光法。,而其他特异性抗体,(,包括抗,Sm,抗体，抗着丝点抗体，抗,SSA,抗体等,),均采用免疫印迹法。,14,ppt课件,特异性抗体检测 检测除ANA以外其他项目。14ppt课,抗,ENA,抗体谱,是以核内可提取核抗原为靶抗原的自身抗体,的总称,，,它主要包括抗,S,m,、抗,RNP,、,抗,SSA,、,抗,SSB,、,抗,J,o,-1,、,抗,S,cl,-70,、,抗组蛋白抗体、抗核,小体抗体、抗核糖体,P-,蛋白抗体,、,抗着丝点抗体,抗,ds,DNA,。,不同的自身免疫性疾病可以产生不同的抗,ENA,抗体,，,ENA,抗体的检测对自身免疫性疾病的诊,断和鉴别具有重要意义,。,15,ppt课件,抗ENA抗体谱是以核内可提取核抗原为靶抗原的自身抗体15p,16,ppt课件,16ppt课件,欧蒙印迹法试剂盒用于体外定性检测血清或血浆中的人抗,nRNP,、,Sm,、,SS-A,（天然,SS-A,和,Ro-52,）、,SS-B,、,Scl-70,、,Jo-1,、,CENP B,、,dsDNA,、核小体、组蛋白和核糖体,P,蛋白等,14,种不同抗原,lgG,类抗体。,17,ppt课件,欧蒙印迹法试剂盒用于体外定性检测血清或血浆中的人抗nR,自身抗体检测结果正确解读,检测方法局限性：假阳性，假阴性,临床意义局限性：非特异性，生理性，疾病前期,临床表现阳性，实验室检查阴性,实验室检查阳性，临床表现阴性,18,ppt课件,自身抗体检测结果正确解读检测方法局限性：假阳性，假阴性临床意,“,自相矛盾”的结果,ANA(,间接免疫荧光法,),阳性，靶抗原阴性,ANA(,间接免疫荧光法,),阴性，靶抗原阳性,（膜条法），占,10%,，为客观存在,ANCA,：荧光法阴性，但靶抗原阳性（,5%,）,19,ppt课件,“自相矛盾”的结果ANA(间接免疫荧光法)阳性，靶抗原阴,指标阴性是否意味着疾病的排除？,指标阳性意味着什么？,20,ppt课件,20ppt课件,ANA,阳性,可见于多种临床情况，出了风湿病外，也可见于正常人或非风湿病。,(1),健康人,:,年龄越大,阳性率越高,(60,岁的阳性率为,20%-25%),但为低滴度。,(2),有,SLE,家族史的一级亲属,有近,50%,为阳性,(3),肺疾病、肝病、血液病、慢性感染等。,注意：,正常人中一般,ANA,滴度较低。,21,ppt课件,ANA阳性 可见于多种临床情况，出了风湿病外，也可见于正,ANA,阳性,ANA,阳性的意义需结合临床资料综合分析,阳性并不能确定某种临床诊断,反之,ANA,阴性也不能排除自身免疫性疾病。,但是临床上如果,ANA,滴度,1:1000,肯定可以考虑为结缔组织病或自身免疫性疾病，具体是哪一种疾病，要结合其他临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑下结论。,一般,ANA,滴度为,1:100,时，临床意义不大。,22,ppt课件,ANA阳性 ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析,阳性,ANA,阴性,(1),正常人或非结缔组织病患者，其体内应该不存在,ANA,。,(2),疾病初期，,ANA,含量不足以被检测出,;,临床治疗有效，病情缓解，,ANA,确实转阴。,(3),实验室误差，特别是试剂，不同厂家的试剂检测结果会有差异。,23,ppt课件,ANA阴性 (1)正常人或非结缔组织病患者，其体内应该不,谢谢大家,24,ppt课件,谢谢大家24ppt课件,