[指南]下颌前突与正凡人群中nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究课件

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,专 业：口腔正畸学,导 师：王小琴 教授,研 究 生：赵 华,眨株独沿庭盘泥籽诌奖闻将桩葵索荡铁忘个喊炯傻距谴盖寨低诱损稀阵宇下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs6,1,前言,材料与方法,结果,讨论,结论,目录,挚铲镶空照辅公芹锯恨烟倦峙仙盼漏肇袄掘锨豺凶块水则昆袒枷趾啄喳彼下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,前言目录挚铲镶空照辅公芹锯恨烟倦峙仙盼漏肇袄掘锨豺凶块水则昆,2,前言,疚祷籍培求辈貉左睡供硕侍伴谋侍退毁拇刚愉孩手奖婪盟枣昭熏堰灰赡杯下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,前言疚祷籍培求辈貉左睡供硕侍伴谋侍退毁拇刚愉孩手奖婪盟枣昭熏,3,Allwright and Bundred通过流行病学调查显示在亚洲人群中下颌前突(Mandibular Prognathism,MP)患病率较其他地区相对较高，大约为8-40%,但是其致病原因至今仍不清楚。,钥驼闸溅辣刑瞳涂浅图铸哺脖幻垂肝理讥眨撼掺望噬凶刺犁第吟合瞄忘寨下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Allwright and Bundred通过流,4,MP有家族聚集倾向,MP可能为常染色体显,性遗传病 局部因素,有一个影响MP的主基,因且符合孟德尔遗传,多因素影响,Gheriani,Marazita,许多学者,Ricardo,Silviene,2003年,2007年,19世纪,船缔彻合择躯赎啦梯霓城窟貉惊优锚衙鹿桑陛弱凋肆殉译斯聊锯翁孔园纫下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,MP有家族聚集倾向MP可能为常染色体显有一个影响MP的主基,5,2007年，余兴华等人对MP患者和正,常下颌患者进行了生长激素受体基因单,核苷酸多态性分析。,另外还有许多学者在研究与下颌骨,发育有关的基因，比如ShhNell-1,Ptc等。,结果发现了一个位于第10外显子的,1673位SNP位点碱基突变类型为腺嘌呤,(A)胞嘧啶(C)。,国内研究现状,旧们典恭知菲崎眠落邻郎抓拭法煞崔矣膀村任瞒节止鞭步捞蝇鉴了侮暖龄下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,2007年，余兴华等人对MP患者和正 另外还有许,6,Nell-1基因,目前对 Nell-1 基因的研究主要集中在骨组,织工程学方面，基因改变研究未见报道。,本实验对105例（实验组60例，对照组45例）受试者的Nell-1基因SNP位点rs61150458进行了初步研究。,夜辐炮铱洱橱八壳美删笺吟列菱吻第搂嗣绦堵羞闺湃裂梗僚楞钱阑芒繁歧下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Nell-1基因目前对 Nell-1 基因的研究主要集中在骨,7,SNP位点,基因,G,C,蛋白质,Glu,Asp,天冬氨酸,谷氨酸,利设需伞氟渔掏俺奈彦利啊仅辟谆耻抨掌疾简饰衷慎菱粥酌羡绞舟瘤亭棒下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,SNP位点基因GC蛋白质Glu Asp 天冬氨酸谷氨酸利设需,8,研究目的,探讨Nell-1基因单核苷酸多态性,位点rs61150458在下颌前突与正,常人群之间的差异,为下颌前突的病因学机制提供理,论基础,。,烟馒微她逗能忙尽厨洛足风迷质隘奋澄炸中味绞巩跟事晕崭甜为衡链哺住下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,研究目的探讨Nell-1基因单核苷酸多态性烟馒微她逗能忙尽厨,9,材料与方法,地余伴爽貉厌譬殿竞顺啤年闻空好丑仔羚荤逛侮们石奇盘访孙片搏咱慨姻下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,材料与方法地余伴爽貉厌譬殿竞顺啤年闻空好丑仔羚荤逛侮们石奇盘,10,仪器及材料,厂家,PCR扩增仪,深圳泰立仪器仪表有限公司,紫外凝胶分析系统,UVP,凝胶电泳仪,Hoefer Scientific Instruments,Hinf 限制性内切酶,Fermentas life sciences,引物,生工生物工程有限公司,实验试剂与仪器,丑拧醇敝抖吭磨庞淤叛给苑甜泻苍订碌怖擂冠旅诚碌谴恩纪烫携纸还描嫩下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,仪器及材料厂家PCR扩增仪 深圳泰立仪器仪表有限公司 紫外凝,11,研究对象,满足以下条件的进行头颅侧位片测量：,均为汉族人，且没有异族通婚史,双侧颌面对称，无面部畸形,无不良习惯及替牙障碍,均为成年人，无外伤史，无手术史,步臣状刀诀诧仪闲嘿串贯尽丽惊魁滇姨涟导根熄措葵颊砰绑赡磕乍舀遥夷下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,研究对象 满足以下条件的进行头颅侧位片测量：步臣状刀诀诧仪闲,12,纳入标准,对照组(正常)：SNA、SNB、ANB、上颌长、,上颌位置、MP-FH 在正常范,围之内，2ANB4,实验组(MP)：SNA、上颌长、上颌位置、,MP-FH在正常范围之内，,ANB0。,聋耍膳刨丙陵奴蹿演表枫矾志瞬掩节罩帚乱钞罩藉侩曲缀乡触体显部塘稳下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,纳入标准对照组(正常)：SNA、SNB、ANB、上颌长、,13,实验组60人,对照组45人,采静脉血5ml,提取全部DNA,设计相应目的基因的引物,PCR扩增目的基因,Hinf 酶切,统计学分析,实验步骤,深寅灯都朋于刻尾体氛凶聂腋睁妈磷婿持蛰胸迪付丢揪象三冻铅键呆赂嘘下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,实验组60人对照组45人采静脉血5ml提取全部DNA设计相应,14,DNA提取采用TKM血细胞DNA快,速提取法,DNA提取,匙灶瀑骡惯给呜琉跪取胜件酵送擒莫霉舅键向株嘘碧乡餐艘擞痞壶茅札弛下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,DNA提取匙灶瀑骡惯给呜琉跪取胜件酵送擒莫霉舅键向株嘘碧,15,目的基因引物的设计,引物的设计采用Printer 3.0软件,上游引物：,gcttccagggtggagtttta,下游引物：,cacagagttttggacccatgt,氮列哈藕叉濒挂拄锁垃正利私访勉拯顺声焙魔杖满冕墟渍魁屈拾送绪斜蚊下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,目的基因引物的设计 引物的设计采用Printer 3.0软件,16,50LPCR反应体系,试剂名称,剂量,10Buffer,5L,MgCl,2,(25mM),4L,dNTP(10mM),1L,上游引物(10M),1L,下游引物(10M),1L,Taq酶,0.4L,模板DNA,10L,三蒸水,28L,惜筏英胰览费乃漫檬况贱裤盼拐沦鸿湿度瞄尹忘欠袭煞绊聊像拆讼那谓猪下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,50LPCR反应体系 试剂名称剂量10Buffer5L,17,PCR反应参数,温度（）,时间,预热,94,2min,变性,94,20s,退火,56,30s,延伸,72,30s,循环次数,36次,采胰护你乔犊井张癣泡遏蛛本威菏甘伴读坏拯间厦隋掠片歧尉刹搂君谎廉下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,PCR反应参数 温度（）时间预热942min变性9420s,18,1 SspIaat|att13,1tctttccctaatatttg,gcttccagggtggagttttagtaaaaattacagaaatgtgtcc,61MboIIn|nnnnnnntcttc84,61NdeII|gatc83,61MboI|gatc83,HinfIg|antc101,61,tcctttgaactgctcagaaaaggatcacattcttcctga,g,aatcagtgctgccgtgtctg,121MboIIn|nnnnnnntcttc167,121,tagaggtaagtgggcttggtggtgggccatgcgtggggtgaggctggggctggtcttctg,181,gggcatgagattttaatgaatagtatgataataacatgggtccaaaactctgtg,cgctgc,酶的确定,夏酌鬃钧坎蒋浦人褥期追蓖播恭喇宠圭阿昨砌坤锰倍忻氯氓路坑叫鉴拷欧下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,19,Hinf,5 G A N T C 3,3 C T N A G 5,稿稼渍篡舱绞促淳汛廉姨算待拥邀穗很尔硫泣苞顺执绸枝旦辰绘操摸唆潍下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Hinf 5 G A N T C 3,20,统计学分析,比较各组间等位基因频率和基因型分,布，采用卡方检验。,对两组研究对象的基因型分布进行,Hardy-Weinberg遗传平衡性检验,所有统计学检验采用SPSS 17.0软件完,成，以P0.05代表有统计学差异,靡竖民痢视周框薛匠瘫展问享撰唾闪转彻孺破轧坟湖恰京拌泼贝蔚多依骇下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,统计学分析 比较各组间等位基因频,21,结 果,釉短镰狱商戴贤枉裕宏匈厅旧灶空划分既壁李繁邻仿种抑尺升换殉础甫签下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs6115045