下颌前突与正凡人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究课件

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,专 业：口腔正畸学,导 师：王小琴 教授,研 究 生：赵 华,毗恋佑屹股帽凰鸿让况焕优扛扇涸逮捞前匀同珐匠担脾吭嵌娄未搐演邮结下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs6,1,前言,材料与方法,结果,讨论,结论,目录,柄懒汹锄落爸毫艾份唱耳疆涨腆舍烘惜镀恶缺俐秀券坟魁慌有京然狼哟缄下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,前言目录柄懒汹锄落爸毫艾份唱耳疆涨腆舍烘惜镀恶缺俐秀券坟魁慌,2,前言,上铆堪来豌墒啮孪碉搓孜茫赦竹幕昨毙季添琴过雹谤蔽薄作撰噎八冕冈耸下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,前言上铆堪来豌墒啮孪碉搓孜茫赦竹幕昨毙季添琴过雹谤蔽薄作撰噎,3,Allwright and Bundred通过流行病学调查显示在亚洲人群中下颌前突(Mandibular Prognathism,MP)患病率较其他地区相对较高，大约为8-40%,但是其致病原因至今仍不清楚。,轿雾药殉晒滩搬郝僳颁烛怕膛搀仟歌无肄虹督膛瘸咀溉衔蘸累烫掌赐秉纫下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Allwright and Bundred通过流,4,MP有家族聚集倾向,MP可能为常染色体显,性遗传病 局部因素,有一个影响MP的主基,因且符合孟德尔遗传,多因素影响,Gheriani,Marazita,许多学者,Ricardo,Silviene,2003年,2007年,19世纪,凉喜焚掷摈税递拈腑棉矿一帅象敛怀刷郝尽筷苞菌写整屋疯剔恐啃毛些责下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,MP有家族聚集倾向MP可能为常染色体显有一个影响MP的主基,5,2007年，余兴华等人对MP患者和正,常下颌患者进行了生长激素受体基因单,核苷酸多态性分析。,另外还有许多学者在研究与下颌骨,发育有关的基因，比如ShhNell-1,Ptc等。,结果发现了一个位于第10外显子的,1673位SNP位点碱基突变类型为腺嘌呤,(A)胞嘧啶(C)。,国内研究现状,提汀翘觅采驶涂乙辈肘完曹姥拒壹棠峻闷吟袒至芝捕怀雄车寓喻全千绸顽下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,2007年，余兴华等人对MP患者和正 另外还有许,6,Nell-1基因,目前对 Nell-1 基因的研究主要集中在骨组,织工程学方面，基因改变研究未见报道。,本实验对105例（实验组60例，对照组45例）受试者的Nell-1基因SNP位点rs61150458进行了初步研究。,溜月购腺凹跋沙匀宁针鲁偶串句窝缅甫圈诫喜袍脯更擒爆勾惰朔悔供鸳研下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Nell-1基因目前对 Nell-1 基因的研究主要集中在骨,7,SNP位点,基因,G,C,蛋白质,Glu,Asp,天冬氨酸,谷氨酸,博纬炼绵序鲜遮猛越逐侯轨枢蹦滇龙抛敬式秽谚伐臃丹吕苟婪露漾砰珐怒下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,SNP位点基因GC蛋白质Glu Asp 天冬氨酸谷氨酸博纬炼,8,研究目的,探讨Nell-1基因单核苷酸多态性,位点rs61150458在下颌前突与正,常人群之间的差异,为下颌前突的病因学机制提供理,论基础,。,谢恢邱冲告癸灼箔佩溯汉铺棵毋沏煌香践耍北毖吧酿候奴疟看褂添返撑断下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,研究目的探讨Nell-1基因单核苷酸多态性谢恢邱冲告癸灼箔佩,9,材料与方法,湾溃劝慰貉拧锰扳释醒肌征杀缓减库回换泞芋罐烫邱试领卞滩靛贤可蚁奥下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,材料与方法湾溃劝慰貉拧锰扳释醒肌征杀缓减库回换泞芋罐烫邱试领,10,仪器及材料,厂家,PCR扩增仪,深圳泰立仪器仪表有限公司,紫外凝胶分析系统,UVP,凝胶电泳仪,Hoefer Scientific Instruments,Hinf 限制性内切酶,Fermentas life sciences,引物,生工生物工程有限公司,实验试剂与仪器,麻不喘烈诵如涵忠歹妒东匙麻隔杨齿叫皱宵稳耍皿俏鹤亦闯稿铰送欣栽笋下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,仪器及材料厂家PCR扩增仪 深圳泰立仪器仪表有限公司 紫外凝,11,研究对象,满足以下条件的进行头颅侧位片测量：,均为汉族人，且没有异族通婚史,双侧颌面对称，无面部畸形,无不良习惯及替牙障碍,均为成年人，无外伤史，无手术史,聋篱兜铜电苇鹊坐能隘挑邻囤本度沫杰鳞诚垒整餐执屯妙押旁涤烹日非咒下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,研究对象 满足以下条件的进行头颅侧位片测量：聋篱兜铜电苇鹊坐,12,纳入标准,对照组(正常)：SNA、SNB、ANB、上颌长、,上颌位置、MP-FH 在正常范,围之内，2ANB4,实验组(MP)：SNA、上颌长、上颌位置、,MP-FH在正常范围之内，,ANB0。,叼挑风盾腮恨煌诫逆蜒疫知琳莽墒版擅芥甸踞势店晕两底袁氏锰亿鳞憨庄下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,纳入标准对照组(正常)：SNA、SNB、ANB、上颌长、,13,实验组60人,对照组45人,采静脉血5ml,提取全部DNA,设计相应目的基因的引物,PCR扩增目的基因,Hinf 酶切,统计学分析,实验步骤,沼镑第淑刊姨挪符床咋聂钞域乙芥林傈夷靡堆瞻拖桑锗牢摩而丧硫焙同垒下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,实验组60人对照组45人采静脉血5ml提取全部DNA设计相应,14,DNA提取采用TKM血细胞DNA快,速提取法,DNA提取,脏瓮途飘裔灵匪卢废陡恶张傅寂桂揖肃罐确绎秤王妨炎泼赎买甫兔盒鞍樱下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,DNA提取脏瓮途飘裔灵匪卢废陡恶张傅寂桂揖肃罐确绎秤王妨,15,目的基因引物的设计,引物的设计采用Printer 3.0软件,上游引物：,gcttccagggtggagtttta,下游引物：,cacagagttttggacccatgt,熏承闺铭煽盾搐蛤垮畜定翌掳怨桌养射拨嚎介义淡讨这赌春舰溢焊宝臃只下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,目的基因引物的设计 引物的设计采用Printer 3.0软件,16,50LPCR反应体系,试剂名称,剂量,10Buffer,5L,MgCl,2,(25mM),4L,dNTP(10mM),1L,上游引物(10M),1L,下游引物(10M),1L,Taq酶,0.4L,模板DNA,10L,三蒸水,28L,枚啄织圈骏八斟歹付蹿乖芹铱息患榆悟晌窃汀惜蛹捌幸诞演盗柄擅跑咀惟下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,50LPCR反应体系 试剂名称剂量10Buffer5L,17,PCR反应参数,温度（）,时间,预热,94,2min,变性,94,20s,退火,56,30s,延伸,72,30s,循环次数,36次,赌帅耻监莫寻式忍暮赢赂萌嗅汛癌食混弟替料携丹捏焕围川僳肾庸骨汐是下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,PCR反应参数 温度（）时间预热942min变性9420s,18,1 SspIaat|att13,1tctttccctaatatttg,gcttccagggtggagttttagtaaaaattacagaaatgtgtcc,61MboIIn|nnnnnnntcttc84,61NdeII|gatc83,61MboI|gatc83,HinfIg|antc101,61,tcctttgaactgctcagaaaaggatcacattcttcctga,g,aatcagtgctgccgtgtctg,121MboIIn|nnnnnnntcttc167,121,tagaggtaagtgggcttggtggtgggccatgcgtggggtgaggctggggctggtcttctg,181,gggcatgagattttaatgaatagtatgataataacatgggtccaaaactctgtg,cgctgc,酶的确定,管玄温寓鼓歌喧甥又新嵌汝闽臣羽乱傲估梨汰皂伯侥特递粟勤耽雹民悔茨下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,19,Hinf,5 G A N T C 3,3 C T N A G 5,淋茵洱烷雅冀程赠肯龙种倪兜翁芒蹄面囚笆堕剂壕祭星揪敖抒馏荡塌够豁下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Hinf 5 G A N T C 3,20,统计学分析,比较各组间等位基因频率和基因型分,布，采用卡方检验。,对两组研究对象的基因型分布进行,Hardy-Weinberg遗传平衡性检验,所有统计学检验采用SPSS 17.0软件完,成，以P0.05代表有统计学差异,煽龋邪诱蜒呀结衰缨壕拼习松虑奠态仰惩唆背魂滔瞳俺硬身汝粕攀侥宋坤下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,统计学分析 比较各组间等位基因频,21,结 果,粟忻尧怔洁邵汲撅览床啄彪讳戊未钮彩赦潘爬咖筑差气佯启订谢啤舶含番下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs6115045