非洲猪瘟ASF的分子病毒学课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,非洲猪瘟的分子病毒学,非洲猪瘟的分子病毒学,非洲猪瘟病总列数,确诊时间,发生省份,发生地点,发病头数,死亡头数,扑杀数,1,8,月,3,日,辽宁省,沈阳市沈北,8116,2,8,月,16,日,河南省,郑州,30,30,1362,3,8,月,19,日,江苏省,连云港海川,88,14577,4,8,月,23,日,浙江省,温州市乐青,340,1332,5,8,月,30,日,安徽省,芜湖市南陵县,185,80,1264,6,9,月,2,日,安徽省,宣城市宣州五星乡,94,725,7,9,月,2,日,安徽省,宣城市宣州古泉镇,40,8,9,月,3,日,安徽省,宣城市金坝,152,8,9,9,月,3,日,江苏省,无锡市宜兴,12,9,97,10,9,月,5,日,黑龙江省,佳木斯长青乡,39,12,11,9,月,6,日,安徽省,滁州市凤阳县,62,22,12,9,月,6,日,黑龙江省,佳木斯向阳区,26,10,13,9,月,6,日,安徽省,芜湖市南陵县许镇,13,4,14,9,月,6,日,安徽省,宣城市宣州区天湖,15,15,15,9,月,10,日,安徽省,铜陵市义安区,63,23,16,9,月,14,日,内蒙古,阿巴嘎旗,17,9,月,14,日,河南省,获嘉县,非洲猪瘟病总列数确诊时间发生省份发生地点发病头数死亡头数扑杀,科技日报,2018,年,8,月,22,日报道,我国发生非洲猪瘟的病毒基因测序初步结果显示，引起我国本次非洲猪瘟疫情的毒株为,基因,型,，部分基因序列与,格鲁吉亚,2007,株,和,俄罗斯伊尔库茨克,2017,株,的相应序列完全一致。,科技日报2018年8月22日报道我国发生非洲猪瘟的病毒基因测,提要,ABSTRACT,01/,病毒的简述,02/,分类学地位,03/,形态学特征,04/,病毒稳定性,05/,基因组特征,06/,主要的蛋白,提要01/病毒的简述02/分类学地位03/形态学,非洲猪瘟,非洲猪瘟（,African Swine fever,，,ASF,）是一种急性，发热传染性很高的滤过性病毒所引起的猪病，其特征是发病过程短，但死亡率高，临床表现为发热（达,4042,），心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血；,非洲猪瘟在临床症状上与典型猪瘟极为相似,，以高热、高死亡率、全身广泛性出血、呼吸障碍以及神经功能紊乱为主要特征。,非洲猪瘟非洲猪瘟（African Swine fever，A,联系,区别,病毒分类,CSF,是黄病毒科瘟病毒属，单链,RNA,病毒，可分为,3,种基因型，,11,个亚型，,1,个血清型,ASF,是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属，双链,DNA,病毒，根据编码,p72,蛋白的,B646L,核酸序列，非洲猪瘟可分为,23,个基因型，,1,个血清型,毒株特点,不同毒株毒力差异大,CSF,在中国流行主要是基因,2.1b,亚型的中等毒力毒株,ASF,强毒株感染,4-10,天后,100%,死亡，中等毒株死亡率,30%-50%,，低毒株仅少量死亡,传播特点,CSF,与,ASF,都可通过接触传播或由于接触污染的媒介物传播，发病无季节性,欧洲野猪与家猪比较容易被,ASFV,感染，有三种非洲野猪（疣猪、巨林猪、丛林猪）不表现出症状，隐性带毒，成为病毒的贮存器。,ASFV,是唯一的虫媒,DNA,病毒,，可通过软蜱传播，病毒在其体内保持感染性造成持续传播，,ASFV,在蜱和野猪感染圈中长期存在，难以根除，并在一定条件下感染家猪，引起暴发,联系区别病毒分类CSF是黄病毒科瘟病毒属，单链RNA病毒，可,联系,区别,临床症状,+,剖检病变,临床症状和剖检病变整体相似性很高，肉眼无法鉴别，实验室检测是诊断最可靠、最准确的方法,CSF,剖检病变脾脏肿大不明显，边缘梗死灶明显，肺脏病变主要以出血性病变为主,ASF,剖检病变脾脏肿大，梗死灶不多见，肺脏表现水肿,ASF,死亡前,48h,体温下降为其特征同时临床症状直到体温下降才显示出来，与,CSF,体温升高时症状就出现不同,宿主免疫,不感染人，不是人兽共患病,预防,CSF,最有效的方法就是接种猪瘟疫苗,ASFV,强毒株基因组可编码多种蛋白质，用以干扰宿主的天然免疫系统，从而抑制和逃避宿主的免疫应答反应，为自身的增殖、扩散创造有利条件，,ASFV,拥有庞大的基因组结构和复杂的免疫逃逸机制，为疫苗研发工作带来诸多困难,防控手段,具有高度的传染性与致死性，易大面积发病感染,CSF,：接种猪瘟疫苗，免疫后可完全保护，不会再出现大面积发病，疫情较容易控制,ASF,：无有效疫苗，以扑杀为主并进行无害化处理,联系区别临床症状+剖检病变CSF剖检病变脾脏肿大不明显，边缘,分类学地位,国际病毒分类委员会第四次报告将其归类于虹彩病毒科,（粒子结构）,国际病毒分类委员会第五次报告将其归类于痘病毒科,（基因结构、复制,方式）,国际病毒分类委员会第六次报告增加了非洲猪瘟科，将其列入非洲,猪瘟属，,是其中的唯一成员,（分子生物学发展）,分类学地位国际病毒分类委员会第四次报告将其归类于虹彩病毒科（,形态学特征,ASFV,是有囊膜包裹的的正二十面体病毒。毒粒,外周,包裹有六角形的囊膜，,外部,是直径为,170-200nm,的二十面体衣壳，对应,2000,个左右衣壳粒，衣壳粒长约,13nm,，宽约,5-6nm,，衣壳粒间距离为,7.4-8.1nm,，呈中间有孔的六边形棱柱体。粒子的,内部,是直径为,70-100nm,的病毒核心，由包含基因组核酸的核蛋白以及类核结构组成。,病毒从外至内由,5,个部分组成：,外囊膜,、,病毒衣壳,、,内囊膜,、,核壳,、,类核,形态学特征ASFV是有囊膜包裹的的正二十面体病毒。毒粒外周包,DNA,外囊膜,病毒衣壳,内囊膜,核壳,类核,形态学特征,DNA外囊膜病毒衣壳内囊膜核壳类核形态学特征,病毒稳定性,ASFV,具有很强的致病性，对外界不同的极端环境有很好的抗性,。,56,下加热,70 min,或,60,下加热,20 min,可使病毒失活。在,pH 4-10,的条件下，病毒仍可保持活性。将猪肉自然风干制成的腊肠，或者,32-49,下烟熏,12 h,，然后自然风干,25-30,天制成火腿，猪肉中携带的非洲猪瘟病毒也无法被全部杀死，仍然具有感染活性。,病毒稳定性ASFV具有很强的致病性，对外界不同的极端环境有很,基因组特征,ASFV,的基因组为具有末端共价闭合特点的单分子线状双链,DNA,，大小为,170-190Kb,，两末端部分碱基配对形成发夹环，,中间区域较为保守，长度约,125Kb,，是一段高度保守的基因序列,。两端靠近发夹环部位有末端重复序列和可变区，,可变区分别命名为,VL,（,38-47Kb,）与,VR,（,13-16Kb,），是不同病毒毒株之间基因组差异主要的部分，与病毒的变异、逃避宿主防御系统等机制密切相关，,ASFV,基因组大小变化由可变区决定,。整个基因组含有约,150,个开放阅读框（,ORFs,），可编码,150-200,种蛋白质。,基因组特征ASFV的基因组为具有末端共价闭合特点的单分子线状,基因组特征,截止目前，完成全基因组测序的毒株共有,20,株，其中，适应,Vero,细胞培养的无毒力,BA71V,毒株，是广泛应用于实验室研究的毒株。,毒株名称,基因组大小（,kb,）,毒株名称,基因组大小（,kb,）,BA71V,170,Warmaths,191,L60,182,Tengani 62,186,BA71,180,Pretorisukop_96-4,190,NHV,172,Mkuzi 1979,193,Kenya 1950,194,Malawi Lil-20-1 1983,188,Kenya 05/TK1,191,47/Ss/2008,185,Ken 06.Bus,184,Benin 97/1,182,26544/OG1O Italy,183,OURT 88/3,172,Odintsovo_02/14,189,E75,181,Warthog,187,Georgia 2007/1,189,基因组特征截止目前，完成全基因组测序的毒株共有20株，其中，,病毒蛋白质,非结构蛋白,结构蛋白,病毒基因组编码的，在病毒复制过程中产生并,具有一定功能，但并不结合于毒粒中的蛋白质,构成一个形态成熟的具有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质,（,衣壳蛋白,，,囊膜蛋白,，,存在于毒粒中的酶,）,主要的蛋白,病毒蛋白质非结构蛋白结构蛋白病毒基因组编码的，在病毒复制过程,DNA,外囊膜,病毒衣壳,内囊膜,核壳,类核,p12,（,O61R,）,p24,CD2v,（,EP402R,）,p14,（,E120R,）,p49,（,B438L,）,p72,（,B646L,）,p150,p37,p34,p14,p5,p35,p15,p8,pp220,pp62,Protease,p12,（,O61R,）,p17,（,D117L,）,p22,p54,（,E183L,）,pE248R,pH108R,pE199L,RP1 RP5,RP2 RP6,RP3 RP7,pD1133L pQ706L,pG1340L pB962L,Poly(A)pol Capping enzyme,Methyltransferase,p10,pA104R,RNA,聚合酶亚基,转录因子,RNA,修饰酶,与,DNA,结合的主要结构蛋白,DNA pol X DNA ligase,AP endonuclease,碱基切除修复,DNA外囊膜病毒衣壳内囊膜核壳类核p12（O61R）p14,