单克隆抗体ppt课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,专题,2,细胞工程,动物细胞融合与单克隆抗体,专题2 细胞工程,肺癌在全国的发病率居肿瘤之首，小细胞肺癌是恶性程度最高的一种，上海肿瘤研究所细胞与分子免疫研究室在国内率先研制出一种名叫“,2F7”,的靶向,生物导弹,。这种生物导弹对小细胞肺癌具有,特定靶向性,。,“生物导弹”,这个“生物导弹”与你知道的哪个物质有关？,肺癌在全国的发病率居肿瘤之首，小细胞肺癌是恶性程度最高的一,问题：,什么是抗体？,抗体由什么细胞产生？,与抗原作用的特点？,其化学本质是什么？,机体受,抗原,刺激后，,浆细胞,产生的，能,与抗原发生特异性结合,的具有免疫功能的,免疫球蛋白,问题：机体受抗原刺激后，浆细胞产生的，能与抗原发生特异性结合,抗体的传统生产方法,从,血清,中分离抗体,该法制备抗体的缺点：,产量低、纯度低，且抗体的特异性差,多种浆细胞,动物体内,多种抗体,抗原,注射抗原，血清分离,抗原,免疫,抗血清,抗体的传统生产方法从血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：多种浆,读下面一段文字资料，,找出单克隆抗体的概念,人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的浆细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个浆细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个浆细胞进行无性繁殖，即克隆。,1.,单克隆抗体的概念,单,:,单个细胞 克隆,:,无性繁殖,单克隆,抗体,:,单个细胞克隆产生的,化学性质单一特异性强,的抗体,读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动,提示,1,：对,B,细胞进行细胞培养可行吗？,提示,2,：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？,提示,3,：如何使一种细胞既能产生特异性抗体，又能大量繁殖,？,问题：,如何大量生产单克隆抗体？,2.,单克隆抗体的制备的设计方案,分泌一种特异性抗体的,B,淋巴细胞,能无限增殖的骨髓瘤细胞,杂交瘤细胞,提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？提示2：我们所学的哪种细,1975,年科学家,米尔斯坦,和,柯勒,的制备单克隆抗体实验,1975年科学家米尔斯坦和柯勒的制备单克隆抗体实验,3.,单克隆抗体的制备过程,阅读并分组讨论，单抗制备过程分哪几步？,请用,箭头,把下列各图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？,3.单克隆抗体的制备过程阅读并分组讨论，单抗制备过程分哪几,注射抗原,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,多种杂交细胞,单克隆抗体,1.,注射抗原的目的是什么？,注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞多种杂交细胞单克隆抗体1.注射抗,注射抗原,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,融合,多种杂交细胞,单克隆抗体,2.,诱导细胞融合的方法有哪些？,注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞单克隆抗体2.诱,注射抗原,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,融合,多种杂交细胞,单克隆抗体,3.,若细胞两两融合后，有几种融合情况？,注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞单克隆抗体3.若,注射抗原,B,淋巴细胞,融合,选择性培养基,筛选,单克隆抗体,4.,怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点？,骨髓瘤细胞,注射抗原B淋巴细胞融合选择性培养基 筛选单克隆抗体4.怎样筛,实验中使用的骨髓瘤细胞是,HGPRT酶缺陷细胞,在含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶的培养基（,HAT,）中，因为不能正常合成,DNA,而无法生长,;,B,细胞虽含有,HGPRT,酶，但不能在体外培养存活（只存活,57d,，且功能下降,),；,杂交瘤细胞融合了,B,细胞和瘤细胞，其中瘤细胞核利用,B,细胞的,HGPRT,酶合成,DNA,而存活。,参考上述材料，简述筛选过程与结果,选择培养基中,细胞不能存活，,细胞存活下来,实验中使用的骨髓瘤细胞是HGPRT酶缺陷细胞,在含有次黄嘌呤,注射抗原,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,融合,多种杂交细胞,选择性培养基,筛选,专一抗体检测,克隆化,单克隆抗体,有限稀释法培养,筛选,5.,为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选？,注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基 筛,有限稀释法,计数,10,3,/ml,10,2,/ml,10/ml,1,个细胞,/,孔,有限稀释法计数103/ml102/ml10/ml1个细胞/,克隆化培养,抗体检测,克隆化培养抗体检测,注射抗原,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,融合,多种杂交细胞,选择性培养基,筛选,专一抗体检测,克隆化,单克隆抗体,有限稀释法培养,筛选,6.,大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法,注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基 筛,单克隆抗体ppt课件,特异性强、灵敏度高、产量大,4.,单克隆抗体的优点,5.,单克隆抗体的应用,诊断试剂,准确、高效、简易、快速,治疗疾病,癌症,运载药物,(“,生物导弹”,单抗做导向，药物为弹头,),特异性强、灵敏度高、产量大4.单克隆抗体的优点5.单克隆抗体,课堂练习,下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的实验方案,2,、该方案能达到预期效果吗？为什么？,4,、图中,B,为,_,过程，常用,_,作为诱导剂，该细胞继承,_,的遗传特性，既能,_,又能,_,。,1,、该实验方案的目的是,_,3,、,A,是从小鼠的脾脏中取得,_,该细胞能够产生,_,制备单克隆抗体,B,细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,B,体外培养,骨髓瘤细胞,杂交瘤细胞,足够数量的细胞群,注射到,小鼠腹腔,A,C,课堂练习下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的实验方案,