影响血液凝固因素-PPT

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,14,影本一班,张琛,201452623,血液实验,影响血液凝固的因素,实验目的：,了解血液凝固的基本过程及影响血液凝固的一些因素,实验原理：,血液由流体状态变为不能流动的胶冻状凝块的过程称为血液凝固。本质是可溶性纤维蛋白原转换为不可溶性纤维蛋白多聚体。纤维蛋白交织成网，从而形成血凝块。,血液凝固过程：凝血酶原酶复合物形成,凝血酶原 凝血酶,纤维蛋白质 纤维蛋白,凝血酶原酶复合物的形成中有两个途径，内源性和外源性。内源性是指参与凝血的全部物质均在血液中。外源性是指在凝血的过程中有其他组织的凝血物质。,Ca2+,在血液凝固中的作用：,FII,、,FVII,、,FIX,、,FX,这四个因子的生化特征是分子上都有,Ca2+,结合的部位，通过与,Ca2+,结合发生变构，暴露出与磷脂结合的部位来参与凝血。因此,Ca2+,在血凝过程中具有很重要的作用。,血小板在凝血过程中的作用：,(1),激活的血小板为凝血因子提供磷脂表面，参与内外源性凝血途径因子,X,和凝血酶原的激活；,(2),血小板质膜表面结合有许多凝血因子，如纤维蛋白原、,FV,、,FXI,、,FXIII,，这些因子的相继激活可加速凝血过程；,(3),血小板激活后，释放颗粒的内容物，如：,颗粒内纤维蛋白原的释放，可增加纤维蛋白的形成，加固凝块。,肝素在凝血过程中的作用；肝素在体内和体外都有抗凝作用，主要通过增加抗凝血酶的活性而发挥间接抗凝作用，使血液不凝。,温度对血液凝固的影响：适宜酶发挥效能的温度（,37,左右）环境中，血凝速度加快。,接触面光滑程度对血液凝固的影响：接触面越粗糙血液凝固速度越快,实验材料,动物：,家兔，,2,3kg,，雌雄均可,药品：,20%,乌拉坦溶液、肝素、草酸钾、,0.025mol/L,氯化钙溶液、肺组织浸液、富血小板血浆、少血小板血浆、生理盐水、石蜡油,器材：小烧杯、带橡皮刷的玻璃棒或竹签、清洁小试管,9,支、水浴装置一套、冰块、棉花、移液器（,1ml,、,0.2ml,）,实验方法,1.,观察内源性与外源性凝血的过程,取干净小试管,3,支，编号后按表,7-2,加入各种成分摇匀后静置，在加入,0.025mol/LCaCl2,溶液的同时开始计时，每,15,倾斜一次，观察是否开始凝血，并分别记录,3,支试管的血凝时间，比较,3,个管的血液凝固时间。比较血液凝固的时间,(1,与,2,比，,2,与,3,比,),，分析产生差别原因,2.,观察影响血液凝固的理化因素,取小试管,7,支，编号并按表,7-4,准备后，取家兔颈动脉血，每管,2ml,立即计时，每,15,倾斜试管一次，以观察血液是否凝固，至血液呈凝胶状不再流动时记录血凝时间。,3.,观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用,取血,10ml,，注入两个小烧杯中，一杯静置，另一杯用试管刷轻轻搅拌，几分钟后试管刷上结成红色血团，用水冲洗，观察纤维蛋白的形状，比较两杯的血凝情况。,注意事项,1,每试管口径大小及取血量应基本一致，判断试管倾斜角度（,45,）、间隔时间（,30s/,次）、标准（血液不见流动）都应一致。,2,采血有先有后，计时不应统一要求，各组和个人应分别单独计时。,3,棉花不要压试管太紧，要松软。,4,用石蜡油将试管表面全部润滑后，将石蜡油倒入水池中。,5,取血前先准备好冰块，取完血后立即把第,3,号试管放入水浴锅，,4,号试管放入装有冰块的烧杯中。,出血时间和凝血时间的测定,实验目的：学习出血时间和凝血时间测定的方法,实验原理：,出血时间是指从针刺使毛细血管破损，血液自行流出到自行停止的时间。当毛细血管受损时，受伤血管可立即引起收缩反应，从而局部血流减慢，有利于血小板粘着并聚集于血管的破损处，形成松软止血栓。接着部分血小板破裂，释放出血小板因子，在局部迅速出现血凝块，使出血停止。出血时间的测定可以反映毛细血管及血小板功能正常与否。,凝血时间是指血液流出体外至凝固所需要的时间。它反应的是血液本身的凝血过程是否正常。凝血时间的延长常见于一些凝血因子缺乏或异常的疾病。,实验材料,对象：人,药品,：,75%,酒精棉球,器材：采血针、载玻片、滤纸条、秒表,实验方法：,1,出血时间的测定,(1),以,75%,酒精棉球消毒耳垂或中指指端腹侧，待酒精自然挥发后，用消毒采血针刺入上述部位,2,3mm,深，让血液自然流出，切勿挤压，从血流流出算起计算时间。,(2),每隔半分钟用滤纸吸干流出的血流一次，直到吸不到血液为止。,(3),记录开始出血到止血的时间，或以滤纸上的血点数,0.5,分钟来计算，其结果即为出血时间（分）。,2,凝血时间的测定,(1),以,75%,的酒精棉球消毒，待酒精自然挥发后用消毒采血针刺入上述部位,2,3mm,深，让血液自然流 出，用棉球轻轻拭去第一滴血液，待血液重新自然流出即开始计时。,(2),将第二滴血置于玻片上，每隔半分钟用大头针挑血一次，直到挑起细纤维状的血丝，即表示开始凝血,.,从开始流出到挑起细纤维状的血丝所需要的时间即为凝血时间。,注意事项,1,各种用具严格消毒。,2,针刺手指或耳垂不宜过浅，深度,2,3mm,使血可自然流出为宜。如针刺部位深度不够，流血量太少不能用力挤压局部，应重新针刺。,3,用滤纸吸血时，注意不要用滤纸触及皮肤伤口，以免影响结果的准确性。,4,测定凝血时，应严格每隔半分钟用大头针挑血一次，不可太频繁，同时每次挑动血液要按一定方向和顺序进行，以免破坏纤维蛋白的网状结构而造成不凝的假象。,ABO,血型的鉴定,实验目的：,学习,ABO,血型鉴定的实验方法，加深对,ABO,血型划分的理解,实验原理：,是指红细胞膜上特异性抗原的类型。根据红细胞膜上是否有,A,或,B,抗原可分为四种血型：,A,型、,B,型、,AB,型和,O,型。当凝集原遇到与其相对抗的凝集素会发生凝集。根据抗原抗体反应原理，利用已知的血清凝集素,(,抗,A,凝集素、抗,B,凝集素,),来确定未知的红细胞膜上的凝集原（,A,凝集原和,B,凝集原）的种类，从而鉴定,ABO,血型,。,+,含,B,抗原的红细胞,抗,B,抗体,红细胞,凝集反应,抗,B,血型的抗原和抗体分布情况,实验材料,对象：人,药品：抗,A,抗体和抗,B,抗体，生理盐水,器材：采血针、凹玻片、,75%,酒精棉球、显微镜,实验方法,1,取双凹片一块，用蜡笔在两端分别写上,A,、,B,字 样，在两侧凹内分别滴一滴抗,A,抗体和抗,B,抗体。,2,用镊子夹取,75%,酒精棉球，消毒指端或耳垂及采血针，用采血针采一滴血，用玻片一角刮取少许血液在抗,A,抗体中摇匀，在再用玻片另一角刮取少许在抗,B,抗体中摇匀。,3,将玻片轻轻转动数次，使血液血清充分混合，放置,10,15min,后肉眼观察有无凝集现象，若肉眼不能判断是否凝集，应放在显微镜下观察，鉴定结果。,Rh,血型系统,人类红细胞含有一种与恒河猴的红细胞相同的凝集原称为,Rh,因子,含,Rh,因子,Rh,阳性,不含,Rh,因子,Rh,阴性,输血原则,1,当给人体输入血型不相容的血液时,在血管内会发生红细胞凝集反应,且在补体作用下,凝集红细胞破裂,发生溶血反应,甚至危及生命,.,因此血型鉴定是安全输血的前提,.,2,即使在,ABO,系统血型相同的人之间进行输血,输血前还必须进行交叉配血试验,(cross-match test,注意事项,1,用于刮取血液的玻片的两角不能混用，否则会使 双凹片中,A,、,B,血清相混。,2,注意区分红细胞凝集和聚集，后者加生理盐水可 分散，前者不能分开。,3,判断红细胞是否凝集，要有一定时间,(,一般,10,15min),，尤其是室温低时，凝集所需的时间更长。,4,一定用笔在双凹片两端写上,A,、,B,，以免血清弄混,.,进行交叉配血试验时，应在,37,下进行，以保证可能的凝集反应充分显示。,