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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,单击此处编辑母版标题样式,体外诊断试剂的分类和基本原理,洛阳惠尔纳米科技有限公司,体外诊断试剂的分类和基本原理洛阳惠尔纳米科技有限公司,1,体外诊断试剂和器械在国外统一称为体外诊断医疗器械。属于医疗器械的一部分。,在我国，体外诊断试剂是指：可单独使用或与仪器、器具、设备或系统组合使用,在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、健康状态评价以及遗传性疾病的预测过程中,用于对人体样本(各种体液、细胞、组织样本等)进行体外检测的试剂、试剂盒、校准品(物)、质控品(物)等。,概念,体外诊断试剂和器械在国外统一称为体外诊断医疗器械。属于医,2,根据国家管理类别：按照产品风险程度的高低，体外诊断试剂依次分为第三类、第二类、第一类产品。,不同类的产品在审查、批准后颁发医疗器械注册证书上由不同的机构进行：,第三类由国家食品药品监督管理局审查、批准；,第二类由省级食品药品监督管理局审查、批准；,第一类由市级食品药品监督管理局审查、批准。,体外诊断试剂的分类（一）,根据国家管理类别：按照产品风险程度的高低，体外诊断试剂依次分,3,第三类产品：,1,与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等检测相关的试剂；,2,与血型、组织配型相关的试剂；,3,与人类基因检测相关的试剂；,4,与遗传性疾病相关的试剂；,5,与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的试剂；,6,与治疗药物作用靶点检测相关的试剂,;,7,与肿瘤标志物检测相关的试剂,;,8,与变态反应（过敏原）相关的试剂。,第三类产品：1与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等,4,除已明确为第三类、第一类的产品，其他为第二类产品，主要包括：,1,用于蛋白质检测的试剂；,2,用于糖类检测的试剂；,3,用于激素检测的试剂；,4,用于酶类检测的试剂；,5,用于酯类检测的试剂；,6,用于维生素检测的试剂；,7,用于无机离子检测的试剂；,8,用于药物及药物代谢物检测的试剂；,9,用于自身抗体检测的试剂；,10,用于微生物鉴别或药敏试验的试剂；,11,用于其他生理、生化或免疫功能指标检测的试剂。,第二类产品：,除已明确为第三类、第一类的产品，其他为第二类产品，主要包括：,5,1,微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）；,2,样本处理用产品，如溶血剂、稀释液、染色液等。,*,注：第二类产品中的某些产品，例如蛋白质、糖类、激素、酶类等的检测，如果用于肿瘤的诊断、辅助诊断、治疗过程的监测，或用于遗传性疾病的诊断、辅助诊断等，则按第三类产品注册管理。在药物及药物代谢物检测的试剂中，如果该药物属于麻醉药品、精神药品或医疗用毒性药品范围，则按第三类产品注册管理。,第一类产品：,1微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）；第一类产,6,按照受理和审评分为：按照药品受理和审评的和按照 医疗器械受理审评的。,一、按药品受理和审评的体外诊断试剂：,*1.ABO,血型定型试剂（盒）,*,2.,乙型肝炎表面抗原（,HBsAg,）试剂（盒）,*,3.,丙型肝炎病毒（,HCV,）抗体试剂（盒）,*,4.,人类免疫缺陷病毒,HIV,抗原,/,抗体诊断试剂（盒）,*,5.,梅毒螺旋体抗体试剂（盒）,6.,放免试剂,(,盒,),注：*号的品种，预期用途为血源筛查时按药品受理和审评，为临床诊断时，按第三类医疗器械进行管理。,体外诊断试剂的分类（二）,按照受理和审评分为：按照药品受理和审评的和按照 医疗器械受理,7,二、按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂：,1,、临床血液学和体液学检验试剂,2,、临床化学检验试剂,3,、临床免疫学检验试剂。,4,、微生物学检验试剂,5,、组织细胞学检验试剂,6,、变态反应、自身免疫诊断检验试剂（盒）,7,、遗传性疾病检验试剂,8,、分子生物学检验试剂,9,、其它检验试剂（盒）,体外诊断试剂的分类,（二）,二、按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂：体外诊断试剂的分,8,按照技术方法分：,1.,比色法（颜色反应）；,2.,分光光度法；,3.,凝集法；,4.,散射法（沉淀反应）；,5.,透射比浊法（沉淀反应）；,6.,速率法、终点法（产物或底物量）；,7.,标记技术；,8.,生物亲和；,9.,免疫技术；,10.,发光技术；,11.,荧光技术；,12.,放射技术；,13.,形态分析；,14.,流式细胞；,15.,电泳技术；,体外诊断试剂的分类,（三）,按照技术方法分：体外诊断试剂的分类（三）,9,按照技术方法分：,16.,克隆技术；,17.,酶技术；,18.,基因技术；,19.,聚合酶链反应,-PCR,（分子生物技术）；,20.,杂交技术（分子生物技术）；,21.,印迹技术；,22.,层析技术；,23.,色谱技术；,24.,质谱技术；,25.,溶出法；,26.,伏安法；,27.,多技术联合应用，如：酶联免疫、免疫比浊、放射免疫、免疫化学发光、免疫层析、荧光杂交、免疫组化、流式荧光、电极溶出伏安法等。,体外诊断试剂的分类,（三）,按照技术方法分：体外诊断试剂的分类（三）,10,在实际应用中，单一技术往往不能满足检测需要，因此，诊断试剂会联合使用多种技术。,常见的体外诊断产品：,1.,生化分析仪、生化试剂；,2.,酶标仪、酶免试剂；,3.,免疫化学发光仪及试剂；,4.,胶体金（乳胶、荧光）免疫层析试剂；,5.,血细胞分析仪、细胞检测试剂；,6.,尿液分析仪、尿液检测试剂（试纸）；,7.,（血气）电解质分析仪、电解质试剂；,8.,细菌、微生物培养及鉴定试剂；,9.,免疫组化染色液、液基细胞试剂、免疫印迹试剂,10.PCR,仪及试剂；,11.,血型试剂；,12.,流式细胞仪。,12.,微量元素（原子吸收法）,常见的体外诊断产品技术原理及应用,在实际应用中，单一技术往往不能满足检测需要，因此，诊断试剂会,11,生化分析仪、生化试剂,全自动生化分析仪；,肝功类、肾功类等,比色法、比浊法、散射法、速率法、终点法,生化分析仪、生化试剂全自动生化分析仪；,12,酶标仪、酶免试剂,酶标仪：比色计；,酶免试剂：酶联免疫法比色法,抗原抗体特异性结合、酶作为标记物和催化物，加入底物产生颜色反应，放入比色计进行比色。,酶标仪、酶免试剂酶标仪：比色计；,13,化学发光仪及试剂,以酶为催化剂，通过氧化反应，使底物发光。,过氧化物酶（,HRP),促发光，底物,鲁米诺,碱性磷酸酶,(AP),促发光，底物,螺旋金刚烷环氧化物苯磷酸酯（,AMPPD),化学发光仪及试剂以酶为催化剂，通过氧化反应，使底物发光。,14,非酶促化学发光及电化学发光,非酶促化学发光：,以吖啶酯、过氧化氢为发光系统，不需要酶的催化。仪器成本高，技术复杂，尚未国产化（,Abbott),电化学发光：,氧化反应是通过电极上的电化学反应产生，标记物为三氯联吡啶钌。仪器成本高，技术复杂，尚未国产化。（,Roche,）,非酶促化学发光及电化学发光非酶促化学发光：以吖啶酯、过氧化氢,15,胶体金（乳胶、荧光）层析试剂,胶体金免疫层析法：将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，当移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。,胶体金（乳胶、荧光）层析试剂 胶体金免疫层析法：将特异性的抗,16,胶体金免疫层析法反应示意图,吸样垫,胶体金,垫,包被T线,包被C线,上样垫,NC,膜,支撑物,胶体金免疫层析法反应示意图吸样垫胶体金垫包被T线包被C线上样,17,HIV,胶体金类快速诊断试剂检测结果,HIV胶体金类快速诊断试剂检测结果,18,第三类）免疫印迹试剂,免疫印迹试剂盒,:,风湿病自身抗体检测试剂盒（免疫印迹法）,第三类）免疫印迹试剂 免疫印迹试剂盒:风湿病自身抗体检测,19,免 疫 印 迹 法 示 意 图,免 疫 印 迹 法 示 意 图,20,（第四类）蛋白芯片（微阵列）类试剂,蛋白芯片（微阵列）：丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（蛋白芯片法）；,多肿瘤标志物检测试剂盒（蛋白芯片法）,（第四类）蛋白芯片（微阵列）类试剂 蛋白芯片（微阵列）：丙,21,（第五类）单抗类试剂,血型定型类试剂：血型定型试剂盒（单克隆抗体）,免疫组化：,ImmuChem,免疫组化试剂盒（单抗）,免疫比浊：血清载脂蛋白,A1,免疫比浊试剂盒,乳胶凝集：,D-dimer,二聚体乳胶凝集试剂盒,（第五类）单抗类试剂 血型定型类试剂：血型定型试剂盒（单克,22,（第六类）多抗类试剂,血型定型类试剂：血型定型试剂盒（人血清,/,马血清）,免疫组化：癌胚抗原检测试剂盒（多抗）,免疫比浊：,-,微球蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）,乳胶凝集：沙门氏菌乳胶凝集试剂盒,（第六类）多抗类试剂 血型定型类试剂：血型定型试剂盒（人血,23,抗原,抗原：指进入有免疫活性的组织（宿主）而引发免疫应答的物质。或虽不能引发免疫，但可以同抗体结合的物质。,蛋白质，多糖，核酸，糖脂，青霉素,全抗原性具有多个抗原决定族,抗原抗原：指进入有免疫活性的组织（宿主）而引发免疫应答的物质,24,抗体,宿主对体内存在的外来分子，微生物或其他因子的应答而产生的蛋白质（免疫球蛋白，丙种球蛋白）,根据抗体性质：多克隆抗体，单克隆抗体,根据抗体分子结构：,IgA,D,E,G,M,抗体宿主对体内存在的外来分子，微生物或其他因子的应答而产生的,25,IgG,IgM,抗体模式图,IgGIgM抗体模式图,26,单克隆抗体,由一株淋巴细胞产生，针对一种抗原决定族,抗原免疫小鼠,-,取脾脏,-,与瘤细胞融合,-,克隆筛选,-,单克隆抗体细胞株,扩增细胞,-,注射入小鼠腹腔,-,采腹水,-,纯化抗体,单克隆抗体由一株淋巴细胞产生，针对一种抗原决定族,27,流,程,杂交瘤技术,流杂交瘤技术,28,多克隆抗体,针对多个抗原决定族,抗原免疫动物,-,采集动物血清,纯化抗体,多克隆抗体针对多个抗原决定族,29,（第七类）诊断血清（菌液）,诊断血清：侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清；,志贺氏菌属四种混合多价血清,诊断菌液：伤寒沙门菌菌体（,O,）抗原、鞭毛（,H,）抗原诊断菌液,（第七类）诊断血清（菌液）诊断血清：侵袭性大肠埃希氏菌诊,30,（第八类）血球凝集类试剂,抗体致敏血球：破伤风抗体诊断试剂（血凝法）；,白喉抗体诊断试剂（血凝法）,（第八类）血球凝集类试剂 抗体致敏血球：破伤风抗体诊断试剂,31,（第九类）核酸扩增类试剂,荧光,PCR,：乙型肝炎病毒核酸定量测定试剂盒,PCR-ELISA,：结核分支杆菌检测试剂盒（核酸扩增酶联免疫法）,PCR-,毛细管电泳：性染色体多倍体（分型与突变）检测试剂盒；,PCR-,电泳：,-,地中海贫血基因诊断试剂盒（,gap-PCR,法）,转录介导扩增（,TMA,）：沙眼衣原体与结核分枝杆菌检测试剂盒,（第九类）核酸扩增类试剂 荧光PCR：乙型肝炎病毒核酸定量,32,PCR,基本原理示意图,PCR基本原理示意图,33,PCR,过氧化物酶联物,96,孔酶标法,加样,分析,观察,数据,PCR,产物的检测,96,孔酶标法,PCR过氧化物酶联物96孔酶标法加样分析观察PCR产物的检测,34,（第十类）基因芯片（微阵列）类试剂,基因芯片（微阵列）：,-,地中海贫血基因芯片诊断试剂盒,PCR-,杂交：人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒（,PCR-,反向杂交法）,（第十类）基因芯片（微阵列）类试剂 基因芯片（微阵列）：,35,（第十一类）探针放大（原位杂交）类试剂,bDNA,类：,HIV-1 bDNA,检测试剂盒；,mRNA,检测试剂盒,(,生物素原位杂交法,),（第十一类）探针放大（原位杂交）类试剂 bDNA类：HIV,36,探针放大类试剂,-,支链,DNA,技术,病毒的RNA释放后加入微孔板中板
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