医学科研设计-假说-三要素概要

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,科学争论的第一步,-提出假说,医学科研设计,罗自强,中南大学根底医学院,假说是依据肯定的科学事实和科学理论，对拟争论的问题提出的假定性说明或摸干脆解释,科学争论就是提出假说-试验检验假说-修正和进展假说的过程,一、假说的作用,为形成新理论供给毛胚,为试验设计供给方向,为科研进展供给焦点,二、假说的特性,1.来源的科学性和客观性,胃肠道神经支配的第三成分假说的提出,2.说明的假定性,3.预见的可验性 可以被检验,4.进展的螺旋性,假设检验再假设再检验,澳大利亚某地羊发生贫血 水草丰富，假定缺铁,粗制铁剂可预防假设成立,纯铁剂无效第2假设：疗效来自铁的杂质,各种微量元素，钴有效第2假设成立,口服钴有效，注射无效第3假设：肠道微生物利用钴合成抗贫血物质,比较不同微生物利用钴，觉察大肠杆菌可利用钴合成B12，再抗贫血,三、假说形成的方法,假说的提出需要创新性思维,假说形成的根底,假说建立在客观事实的根底上,假说是科学的想象和推理,假说应能解释已有现象,假说需突破传统思维,假说形成的方法,1.比较分类,比较对象间的异同，并进展分类,受体分类,血型的觉察,2.归纳推理-由特殊到一般,1求同法 依据事物发生的全都性,2 求异法 依据事物间的差异,Robert F.Furchgott,EDRF的觉察,1998年获诺贝尔奖,3剩余法,3.演绎推理-由一般到特殊,由规律推论未知事物,依据DNA碱基序列推出蛋白质的一级构造,从蛋白质的一级构造猜测蛋白质的高级构造,从蛋白质的高级构造猜测它的细胞定位和功能,依据两个或两类对象有局部属性一样，从而推出它们的其他属性也一样,4.类比推理-从特殊推向特殊,EDRF与NO生物学作用的相像性,半衰期短,被Hb和超氧阴离子灭活,舒张血管作用伴随cGMP的增高,推想：EDRF本质可能是NO,解释性原则,*有事实依据,*解释已有事实,能解释旧理论能解释的事实,能解释旧理论不能解释的事实,相容性原则,不应与已有的根本理论相冲突,如 休克的微循环学说,休克的细胞因子学说,简洁性原则,可检验性原则,建立假说的原则,假说上升为理论的条件,能解释旧理论能解释的事实,能解释旧理论不能解释的事实,能够正确预见尚未观看到的自然现象,证明与证伪,天下乌鸦一般黑,证明：观看每一只都是黑的后才成立,证伪：只要觉察一只不是的就不成立,破译西塔潘猜测,医学科研方法学,医学科研的根本要素,中南大学根底医学院生理学系,罗自强,内皮素-1对肺型细胞外表活性物质合成的调控,被试因素,试验对象,试验效应,一、被试因素,1.因素factor与水平 level,*雌二醇对肺成纤维细胞增殖的调控,*不同季节环磷酰胺对小鼠精子细胞致畸效应的争论,*性别与年龄和心肌堵塞病死率的争论,*心理应激与高血压发生的关系,*CC16 gene polymorphism influences the degree of,airway responsiveness in asthmatic children,外源性的：,人为赐予的物理、化学、生物因素,外界客观存在的：气候、季节等,内源性的的自身特征：,性别、年龄、心理、遗传因素,因素,试验的目的是说明被试因素的作用,被试因素T+非被试因素N t+n,试验组：T+N t+n,比照组：N n,必需明确被试因素；各组间非被试因素必需全都,效应,T,t,水平的选定,水平：试验因素的不同的量或状态,被试因素的效应与水平有依靠关系,药物假设没有量-效关系，为非特异作用,水平的选择与目的有关,药效筛选：最大安全量通常LD50的1/10,影响药效的因素：半数有效浓度EC50,半数有效剂量ED50,毒性试验：半数致死量LD50,最大致死量LD100,单因素单水平：简洁易行，效率不高,单因素多水平：比较不同剂量,多因素单水平：比较不同因素药物、疗法,多因素多水平：探究联合用药方案、最正确反响条件,因素与水平的组合,2.因素的施加,确保因素的施加,被试因素标准化：保证被试因素在整个试验过程中始终保持全都,剂量、剂型、给药时间、用药时间、给药途径、药品批号,季节节律,苯丙胺 LD50 1月小于7月,试验组和比照组平行进展,给药途径,*吸取速度 静脉注射吸入肌肉=腹腔皮下口服经肛贴皮,*药物的生物转化,口服,先经肝转化,皮下、肌肉、静脉,先经肺转化,正确选择剂量,口服 100%,灌胃 100%,灌肠 100-200%,皮下 30-50%,肌肉 25-30%,腹腔 25-30%,静脉 20-25%,二、受试对象,试验对象确实定取决于试验目的,1.受试对象的选择,1敏感、稳定,动脉粥样硬化 兔,过敏反响 豚鼠,心肌缺血 狗、兔、大鼠、猪,降压治疗 高血压II期,2可行性,3病人诊断明确客观指标,试验动物,种属、品系、窝别、性别、龄、体重、养分状态和饲养条件,试验动物分为四级：,一级，一般动物conventinal animal：教学和预试,二级，清洁动物clean animal：大多数的科研,三级，无特定病原体动物specific pathogen free,animal：为国际标准级，全部科研,四级，无菌动物germfree animal：特殊课题,试验动物治理条例国家科委，1988,第四章 试验动物的应用,第十九条 应用试验动物应当依据不同的试验目的，选用相应的合格试验动物。申报科研课题和鉴定科研成果，应当把应用合格试验动物作为根本条件。应用不合格试验动物取得的检定或者安全评价结果无效，所生产的制品不得使用。,其次十条 供给用的试验动物应当具备以下完整的资料：,一品种、品系及亚系的准确名称；,二遗传背景或其来源；,三微生物检测状况；,四合格证书；,五饲育单位负责人签名。,试验动物治理条例国家科委，1988,以下状况一般不作为临床争论对象,*存在影响结果的并发症,*危重状态,*多种疗法无效,*不协作者,2.选择适当的争论水平,整体试验 in vivo：综合性试验,离体试验 in vitro：分析性试验,器官水平,细胞水平,分子水平,半体内试验ex vivo：分析性试验,3.受试对象的纯化,所用受试对象力求全都，尽力削减个体差异，降低非被试因素对效应的影响,1 表现典型确实诊病例,2 病情轻重全都，先从病情中等的病例开头,3 使用统一、公认的诊断和分型分级标准,试验动物,种属、品系、窝别、性别、龄、体重、养分状态和饲养条件,人体为争论对象,种族、性别、年龄、体重、职业、工种、工龄、精神状态、居住条件、生活习惯、嗜好、经济及社会因素,病人为争论对象,病种、病程、病期、病型、既往史、治疗和护理条件,Case,某人为了争论“补充维生素A对学龄前儿童血红蛋白的影响”，选择1999年秋季入托的三岁儿童进展体检，排解呼吸道、消化道等系统疾病，测定174名儿童的血清VA、血红蛋白、血清铁浓度，将血红蛋白110g/L定为贫血。再将贫血组儿童随机分为两组，一组为治疗组33例，每日投VA2023IU，另一组为比照组25例。三月后，两组儿童分别查血清VA、血红蛋白、血清铁浓度。结果：治疗组三月后血清VA、血红蛋白、血清铁浓度明显上升P0.01，比照组治疗后无明显变化P0.05。,4.受试对象的依从性,按预定打算承受被试因素的合作程度,*增加患者的信任感,*试验时间不要太长,*盲法单盲、双盲、三盲,三、试验效应,客观指标,主观指标,定量指标,定性指标 率,定量和定性指标的转换,特异性指标,非特异性指标 如肌酸激酶(CK):,CK-BB(主要在脑，CK-MB(主要在心，CK-MM主要在骨骼肌和心肌,比较生物效应,可以用引起同一水平效应所需要的量,半数致死量 LD50,半数有效量 ED50,半数有效浓度 EC50,阈强度,比较生物效应的时间,潜伏期,半衰期,效应持续期：从起效到作用消逝所需时间,三、试验效应,一指标的要求,扣题-关联性,TXA2 TXB2 11脱氢TXB2,PGI2 6酮PGFI 去二甲6酮PGFI,自由基 膜磷脂,MDA,血小板AA代谢,自由基 膜磷脂,异构前列腺素isoprostane),结果 两名医生读 名医生在两次,同一批片子 不同时间读片,结果全都 6245 701,结果不全都 268630%19221%,X线胸片读片结果,2.客观化,三、试验效应,一指标的要求,1.扣题-关联性,指标与争论主题要有本质联系,2.客观化,*统一标准,*仪器相对定量,*多人盲法，加权平均,3.灵敏度,能正确反映效应变化的最小数量或水平,4.指标的可用性,敏感度：是否可检动身生的变化，真阳性率,特异度：检出变化的专一性，真阴性率,真阳性率=a/a+c,真阴性率=d/b+d,漏诊率=1-真阳性率,误诊率=1-真阴性率,5.指标的准确性,准确度：与真实值的接近程度，测定的正确性,主要取决于系统误差,血糖正常值：100-120mg/100ml化学法),80-100mg/100ml酶法),周密度：各次测定值的集中程度，测定的可重复性,主要取决于随机误差,二留意事项,1.标本的采集于储存标准化,采样时间、部位、方法、保持、运输,2.测定方法标准化,方法、仪器、试剂、条件、人员,3.依据专业学问选指标,药物 显效 好转 无效 恶化 死亡 合计 有效率 死亡率,A 55 80 0 15 88 238 56.7%37.0%,B 1 3 2 30 18 51 7.1%33.3%,A、B两药治疗肝癌的近期效果,4.多指标,5.尽量选高、精、尖、新指标,6.重视试验方法的牢靠性,7.削减其他因素对指标的干扰,