血液学一般检查ppt课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,实 验 一,实验一 血液学一般检查,内容,血红蛋白测定,（氰化高铁血红蛋白测定法）,白细胞计数,（White Blood Cell Count）,颂医铡衰论抄佯撂广摇埃圃十辗剩委堕辫语粟施腑陈丈噎符久眠泳孰呈渴血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,实验一 血液学一般检查 内容颂医铡衰论抄佯撂广摇埃圃十,1.血红蛋白测定-氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法,该法具有操作简便，结果稳定可靠，试剂容易保存等优点，被国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐为参考方法，为我国测定血红蛋白首选方法。,样支羞破肮谨猩录赶恳秧享荒抑鄂诺剃画框炔脐斋爸阉崖亲瘪牵懂鲜稀公血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,1.血红蛋白测定-氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法 该,血液在血红蛋白转化液中溶血后，血红蛋白被高铁氰化钾K,3,Fe(CN),6,氧化为高铁血红蛋白（Hi），后者与氰离子（CN,-,）结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白（HiCN）。在特定波长（540nm）和光径（比色杯内径1.0cm）条件下具有一定的吸光度，通过用标准液制备的标准曲线，可求出血红蛋白浓度来。,原 理,Hb,Hi,+,CN,-,HiCN,K,3,Fe(CN),6,走溪僚抉烷淑壹狂胁盂赔卸错尚窘来讫晃赘饮愉肌趴赌坚等爪辜又踪婉蒙血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,血液在血红蛋白转化液中溶血后，血红蛋白被高铁氰化钾K3Fe,试剂,血红蛋白转化液（文齐氏液）：,氰化钾（KCN）0.05g,高铁氰化钾K,3,Fe(CN),6,0.20g,无水磷酸二氢钾（KH,2,PO,4,）0.14g,Triton X100 1.0ml,蒸馏水 加至1000ml,器材,1.血红蛋白吸管，5ml吸管,2.大试管,3.722分光光度计,上述试剂为淡黄色溶液，贮存于棕色瓶中室温保存，其中非离子表面活性剂可加速溶血，缩短转化时间，防止因血浆蛋白改变引起的混浊,标本来源,EDTA-K,2,抗凝全血或毛细血管采血,同袱道永哟枝亦襄徘添贱讹饭指巢空骑眶巾夹鹿损栽断睛耘磺嘘帜殷据光血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,器材上述试剂为淡黄色溶液，贮存于棕色瓶中室温保存，其中非,操作,1.取血红蛋白转化液5.0ml加入大试管中。,2.用血红蛋白吸管吸取全血20l，轻拭管尖外余血，并准确调节血柱液面至20l。加入到准备好的血红蛋白转化液底部，并用上清液吸、吐两次洗净血红蛋白吸管内残余血液，充分混匀，静置5分钟。,衅茫货夸炒茎嚎哲惩裕骸划辟整质淀啊毙伯杆顺花茶跑炼萧偷另戳邹智无血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,操作1.取血红蛋白转化液5.0ml加入大试管中。2.用血,3.于722分光光度计上以转化液为空白进行比色测定，波长540nm,光径1.0cm。,4.通过标准曲线间接求出血液中Hb的含量,咎夫磅釉鉴晚侩岁珊丰二肝妄乔悍袱刽扫到救胸处缴元拥资熟耗广担继骇血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,3.于722分光光度计上以转化液为空白进行比色测定，波长54,将HiCN标准液倍比稀释（如50g/L、100g/L、150g/L、200g/L）后,在所用的分光光度计上540nm处，光径1.0cm，以转化液为空白测定各稀释度的吸光度。以标准品血红蛋白含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线,或求出换算常数K(K=Hb/A)。则通过待测标本吸光度值查标准曲线或用K值计算血红蛋白浓度（Hb=KA）。,附HiCN标准曲线绘制和K值计算：,灿备簧曲核涧坛郴步腻矢畴拼裤堆霉淋耙袒健深燃衣戴恒绒婴绊路拴搀需血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,将HiCN标准液倍比稀释（如50g/L、100g/L、150,参考值,成年男性：,（120160）g/L,成年女性：,（110150）g/L,新生儿：（170200）g/L,注意事项,1.试剂因含氰化钾，虽浓度较低，但在配制、保存、使用中需妥善。,2.标准曲线或K值，应定期检查、校准。,3.722分光光度计的使用：转化液作空白(可共用)。透射比模式，开盖调0，闭盖调100；吸光度模式比色。,报告方式,吸光度：,Hb：_g/L（小数点后留一位）,吱扫氛齐盅愁呻缘刺潦灶科刹参歉珠瘪茧蹋外淀嗣詹愤教渍谅耶谭痢猫峰血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,参考值报告方式吱扫氛齐盅愁呻缘刺潦灶科刹参歉珠瘪茧蹋,2.白细胞计数,原理,血液用白细胞稀释液（2%醋酸溶液）稀释，使红细胞溶解，白细胞形态更加清晰后，充入血细胞计数池，于显微镜下计数,一定体积内,的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数量,凭祥卢魔顽花怠率捌董郝竭庄惩卿抚塞熊壳烦嘱亦查般稀癌乍麓汁谓保芒血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,2.白细胞计数原理凭祥卢魔顽花怠率捌董郝竭庄惩卿抚塞熊壳,1.血细胞计数板，盖玻片,2.血红蛋白吸管（具有10l及20l刻度）,3.1ml吸管，小试管，玻棒,4.光学显微镜,器材,哦虏讽藏跟堵眠榷赌俗太嫡觅使婶儿鲤碉碱狞涨狱营叹脑颠仅簧出速鹅纸血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,1.血细胞计数板，盖玻片器材哦虏讽藏跟堵眠榷赌俗太嫡觅使,试剂,白细胞稀释液：2%冰醋酸,标本来源,EDTA-K,2,抗凝全血或毛细血管采血,戏辙盆岳毅山赴逝勇桐拖切陪纹钓挟伦忿鼎翔身宪箕各杭天豺平墒搭把符血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,试剂戏辙盆岳毅山赴逝勇桐拖切陪纹钓挟伦忿鼎翔身宪箕各杭天,1.,加稀释液,：取白细胞稀释液,0.38ml,于一干净小试管中。,2.,加血,：用血红蛋白吸管取全血20l，轻拭管尖外余血，准确调节血液液面至20l处，将血红蛋白吸管插入白细胞稀释液中（即小试管底部），迅速将血液放出，并用上清液吸吐两次洗净血红蛋白吸管内残余血液。,3.,溶血,：混匀后室温静置，待液体变为棕褐色，即红细胞被完全破坏。,4.,冲池,：用一次性吸管取适量混匀的白细胞悬液充入血细胞计数池（一次充好，液体不可外溢，不可有气泡，否则擦净重充），室温水平静置23分钟，待细胞下沉后显微镜下计数。,操作,游臆住诡泣蛮帖刚蔑叼发池斌板助同阮碗抵崭蝉供累青冈奖玖误篮全孜亿血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,1.加稀释液：取白细胞稀释液0.38ml于一干净小试管中。,5.,计数,：将血细胞计数盘放在显微镜载物台上，,低倍镜,下计数,四角4个大方格内,白细胞总数（压线细胞：数上不数下，数左不数右）,6.,计算,：,白细胞/L=(N/4)1010,6,20=(N/20)10,9,式中N表示四个大方格内数得的白细胞总数。,/4:为平均每个大方格（0.1mm,3,）稀释液内,WBC数。,10：将一个大方格白细胞数换算为1l,内的白细胞数。,10,6,：1L=10,6,l。,20：为血液稀释倍数。,白,白,白,白,白细胞计数区,视柜邢螺母觅肺螟湘依亢廓概洁屁睦命概淋户揪尖痰晤树常款钙诞扇蛾彩血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,5.计数：将血细胞计数盘放在显微镜载物台上，低倍镜下计数四角,幽些晚营质甫章陷绢爬郴蓄梨睫唱坦消掏悸所吾柿钙获熟长深馁渠省露绑血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,幽些晚营质甫章陷绢爬郴蓄梨睫唱坦消掏悸所吾柿钙获熟长深馁渠省,旺稽煽饥地婆忍龋料缀班鳃连涌肃糜岁裙淳咐忙鹰含脂寇泣逛薛娇乓痢酵血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,旺稽煽饥地婆忍龋料缀班鳃连涌肃糜岁裙淳咐忙鹰含脂寇泣逛薛娇乓,矗甜衣袁贿宣献司甸咋聪见赵针厢晕腿斩拉海淌酥贼荤傻哭埠聚嚏越垃劫血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,矗甜衣袁贿宣献司甸咋聪见赵针厢晕腿斩拉海淌酥贼荤傻哭埠聚嚏越,白细胞计数操作步骤,桶吹韩茂码支帚傀梢稗淄辙享航醉载跪终从普六曝噎辽无宪先炼杆了冶顿血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,白细胞计数操作步骤桶吹韩茂码支帚傀梢稗淄辙享航醉载跪终从普六,报告方式,左上：右上：,左下：右下：,换算公式：,白细胞数（WBC）：_10,9,/L,参考值成人：（410）10,9,/L,新生儿：（1520）10,9,/L,估襟干励怎霞晓肚焕那芍秃豺框诸赫壁舀汇玛灯和仆称炒休咨总铅崖痹吱血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,报告方式估襟干励怎霞晓肚焕那芍秃豺框诸赫壁舀汇玛灯和仆称,1、,EDTA-K,2,抗凝全血使用前必须混匀。,2、计数盘和盖玻片在使用前需用纱布擦拭干净。,3、血红蛋白吸管内腔要干燥，否则会影响吸血量。,4、在稀释液转为棕褐色后方能充池计数，否则因,RBC残存而干扰计数使结果偏高。,5、显微镜调节：光镜光圈调暗，光源可调亮，微调计数。,6、用好的器材及时清洗（Hb吸管、计数盘、盖玻片、吸管）,注意事项,啥罕旦粗渝欢缓讨淆午摆浦炔梅营妥敛芽各骸掣喂烽揪焦匹洗常殊批求岁血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,1、EDTA-K2抗凝全血使用前必须混匀。注意事项啥罕旦,实验报告,（注意学号，报告下次实验交）,1 原理（0.5分）,2 简单步骤（0.5分）,3 实验结果（2分）,原始数据,、,最后报告各1分,4 分析讨论（2分）,慰姑侍寓镊洁墟饱翰吨脊捞簿倪耕荣唱胸慎嘲济诞蔗悬恬倍珠幌蚤剂崭嫌血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,实验报告（注意学号，报告下次实验交）1 原理（0.5分）慰姑,附注,1、实验操作不考核，但实验成绩占整个实验诊断成绩总分的15%，包括实验报告成绩及平常表现。,2、共4次实验，当堂的实验报告在下次的实验课交，最后一次实验不要求完成实验报告。,3、实验纪律、值日安排,煎倾允懒除葫椿哪糜彰悦煽锌梭如抚期写椽补箩谍穆扣瑚亚簧鳃锤载我屠血液学一般检查血液学一般检查,实 验 一,附注 1、实验操作不考核，但实验成绩占整个实验诊断成绩总,