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成才之路,高中新课程,学习指导,人教版,生物,必修,3,成才之路,高中新课程,学习指导,人教版,生物,必修,3,成才之路,高中新课程,学习指导,人教版,生物,必修,3,学习目标,成才之路,高中新课程,学习指导,人教版,生物,必修,3,整合一,自主预习,自我领悟,成才之路,高中新课程,学习指导,人教版,生物,必修,3,整合二,自主预习,自我领悟,成才之路,高中新课程,学习指导,人教版,生物,必修,3,整合三,自主预习,自我领悟,成才之路,高中新课程,学习指导,人教版,生物,必修,3,整合四,自主预习,自我领悟,成才之路,高中新课程,学习指导,人教版,生物,必修,3,难重聚焦,质疑解惑,第二章 克隆技术,第二章 克隆技术,细胞全能性,体细胞杂交,流动,单克隆抗体制备,动物细胞培养,细胞全能性体细胞杂交流动单克隆抗体制备动物细胞培养,1.,植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术的理论基础都有细胞的全能性，后者还有细胞膜的流动性；动物细胞核移植技术的原理是动物细胞核的全能性。,2.,人工诱导原生质体融合的方法有物理法,(,离心、振动、电场诱导,),和化学法,(,聚乙二醇处理,),，而动物细胞融合还可以用灭活的病毒诱导。,3.,植物分生区附近,(,如茎尖,),的病毒极少，甚至无病毒，因此用分生区组织进行组织培养，再生的植株就不会或极少感染病毒。,基础知识巩固,1.植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术的理论基础都有细胞的,4.,动物细胞培养一般选用胚胎或幼龄动物的组织，细胞在培养过程中会出现细胞贴壁,(,生长,),和接触抑制的现象。培养的条件包括：无菌、无毒的环境，适宜的营养、温度和,pH,及气体环境。,5.,杂交瘤细胞是由经免疫的,B,淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成的，具有既能无限增殖又能产生专一抗体的能力。,6.,制备单克隆抗体过程中第一次筛选是为了获得杂交瘤细胞，第二次筛选是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。,7.,单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高，并可大量制备。主要用途有：作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物。,4.动物细胞培养一般选用胚胎或幼龄动物的组织，细胞在培养过程,生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点如下表：,激素使用,实验结果,使用顺序,先使用生长素，后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂，但细胞不分化,先使用细胞分裂素，后使用生长素,细胞既分裂也分化,生长素与细胞分裂素同时使用,分化频率提高,植物激素在组织培养中的作用,生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,生长素用量与细胞分裂素用量的比例,该比值高时,有利于根的分化，抑制芽的形成,该比值低时,有利于芽的分化，抑制根的形成,该比值适中时,促进愈伤组织的形成,生长素用量与细胞分裂素用量的比例该比值高时有利于根的分化，抑,【,例,1】,请回答下列有关植物组织培养的问题：,(1),用于植物组织培养的植物材料称为,_,。,(2),组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的过程称为,_,。,外植体,脱分化,(,或去分化,),(3),在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素,X,和植物激素,Y,。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系。,当植物激素,X,与植物激素,Y,的浓度比等于,1,时，,_,_,。,未分化细胞,群经分裂形成愈伤组织,【例1】请回答下列有关植物组织培养的问题：外植体脱分化(或去,当植物激素,X,与植物激素,Y,的浓度比大于,1,时，,_,；,当植物激素,X,与植物激素,Y,的浓度比小于,1,时，,_,。,未分化细胞群分化形成芽,未分化细胞群分化形成根,(4),生产上用试管苗保存植物的优良性状，其原因是,_,。,组织培养形成试管苗的过程属于无性繁殖，后代不发生性状分离,当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，_,【,解析,】,（,1,）,植物组织培养的材料叫外植体。,（,2,）植物组织培养的核心过程是脱分化与再分化，脱分化指由分化状态变为未分化状态，再分化指由未分化状态变为分化状态。,（,3,）仔细分析所给示意图，可知植物激素,X,与植物激素,Y,浓度比为,1,时，利于愈伤组织的形成；大于,1,时利于细胞群分化出芽；小于,1,时利于细胞群分化出根。,（,4,）植物组织培养是一种无性繁殖技术，有利于保持亲本的优良性状。,【解析】（1）植物组织培养的材料叫外植体。,1.,关键思路及操作依据,(1),关键思路,克隆单一的,B,淋巴细胞，形成细胞群。,将,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞。,(2),用,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因,每一个,B,淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体；不同种类的,B,淋巴细胞分泌的抗体不同。,B,淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖；骨髓瘤细胞能够无限增殖。,单克隆抗体制备的关键思路及筛选原因,1.关键思路及操作依据单克隆抗体制备的关键思路及筛选原因,2.,单克隆抗体制备过程中的筛选及原因,(1),第一次筛选是在,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，因为有三种融合情况,(,只考虑细胞两两融合,),：,B,淋巴细胞与,B,淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，而只有,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞才是需要的杂种细胞。,(2),第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的，所以产生的抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗体。,【,特别提醒,】,上述,B,淋巴细胞为经过免疫的,B,淋巴细胞。,2.单克隆抗体制备过程中的筛选及原因,【,解析,】,灭活的病毒和聚乙二醇均可诱导动物细胞融合；杂交瘤细胞同时具有两个亲代细胞的遗传特性；可以在体外也可以在体内培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体。,【,例,2】,1975,年科学家首次利用,B,淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请据图回答下列问题：,(1),病原体注入小鼠体内后，,要经过,_,细胞处理后，,才能被免疫细胞识别。,吞噬,【解析】灭活的病毒和聚乙二醇均可诱导动物细胞融合；杂交瘤细胞,(2),制备单克隆抗体所用的,B,淋巴细胞一般从脾中采集，然后以,_,作诱导剂，使,B,淋巴细胞和骨髓瘤,细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有,_,的特点。,(3),单克隆抗体的特点是,_,_,。,根据图示写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法,_,。,既能产生特异性抗体，又能无限增殖,特异性强，纯度高、并可大量制备,(,或专一性强、灵敏度高,),体外培养法和动物体内培养法,灭活的病毒或聚乙二醇,(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以_,1.,关于影响植物组织培养的因素，下列说法正确的是,（）,A.,不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同,B.,在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素,C.,植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是相互独立的,D.pH,、温度、光照条件等对植物组织培养特别重要,【,专题集训,】,1.关于影响植物组织培养的因素，下列说法正确的是【专题集训】,【,解析,】,不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会因年龄、保存时间的长短等导致培养的难易程度不同；在植物组织培养中，培养基中常常要添加植物激素，但不是都必须添加植物激素，如菊花茎段组织培养比较容易，不必添加植物激素；各种植物激素的作用是相互联系的，而不是相互独立的。,【,答案,】D,【解析】不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会因,2.,为了培育菊花新品种，科学家利用二倍体野生夏菊和六倍体栽培秋菊进行杂交，培育过程如图所示。下列有关叙述正确的是,（）,A.d,植株含有夏菊和秋菊的遗传物质,B.,与,过程有关的细胞器只有高尔基体比较活跃,C.,过程常选择酶解法去壁，一般在低渗溶液中进行,D.,野生夏菊和栽培秋菊自然杂交后是四倍体，属于同一物种,2.为了培育菊花新品种，科学家利用二倍体野生夏菊和六倍体栽培,【,解析,】,d,植株含有野生夏菊和栽培秋菊的遗传物质，,A,正确；,过程是杂种细胞形成细胞壁，有关的细胞器有高尔基体、线粒体，,B,错误；,过程为去除细胞壁的过程，植物体细胞杂交的实质是植物原生质体的融合，所以在融合前需要使用酶解法,(,纤维素酶和果胶酶,),去除植物的细胞壁，获得植物的原生质体，此操作一般在等渗溶液中进行，如在低渗溶液中进行，则去掉细胞壁的原生质体会因吸水而涨破，,C,错误；野生夏菊和栽培秋菊自然条件下不能杂交，存在生殖隔离，属于不同物种，,D,错误。,【,答案,】A,【解析】d植株含有野生夏菊和栽培秋菊的遗传物质，A正确；过,3.,有关细胞全能性的叙述，正确的是,（）,A.,植物体只有体细胞才具有发育成完整个体所必需的全套基因,B.,高度分化的植物细胞只有处于离体状态时才有可能表现出全能性,C.,植物体内某些体细胞没有表现出全能性，其原因是所含基因发生了改变,D.,紫色糯性玉米种子培育成植株，这反映植物种子具有全能性,3.有关细胞全能性的叙述，正确的是（）,【,解析,】,细胞具有全能性的原因是细胞具有发育成完整个体所必需的全套基因，而配子也具有这样的全套基因，同样具有全能性；植物体内细胞没有表现出全能性是细胞内基因在特定时间和空间条件下选择性表达的结果；种子是器官，种子发育成植株是个体正常发育的过程，不能反映全能性；细胞表达全能性的前提是处于离体状态。,【,答案,】B,【解析】细胞具有全能性的原因是细胞具有发育成完整个体所必需的,4.,用甘薯的茎尖分生组织离体培养，可快速繁殖脱毒的种苗。下列说法不正确的是,（）,A.,该过程依据的主要原理是植物细胞的全能性,B.,形成脱毒的种苗只经过细胞分裂，没有细胞分化的发生,C.,显微镜下观察处于细胞周期中的细胞，在多数细胞中看不到染色体,D.,甘薯的茎尖细胞中含有甘薯的全套遗传物质,4.用甘薯的茎尖分生组织离体培养，可快速繁殖脱毒的种苗。下列,【,解析,】,植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，,A,正确；该过程中细胞都通过有丝分裂方式增殖，由茎尖分生组织到脱毒苗经过植物组织培养，要发生细胞分化过程，,B,错误；细胞周期包括分裂间期和分裂期，其中分裂间期所占的时间长，因此显微镜下观察细胞周期中的细胞，绝大多数细胞处于分裂间期，看不到染色体，,C,正确；甘薯的茎尖细胞是由受精卵有丝分裂形成的，含有甘薯的全套遗传物质，,D,正确。,【,答案,】B,【解析】植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，A正确；该过程,5.,实验小鼠皮肤细胞培养,(,非克隆培养,),的基本过程如图所示。下列叙述错误的是,（）,A.,甲过程需要对实验小鼠进行消毒,B.,乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶处理,C.,丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型,D.,丁过程得到的细胞具有异质性,5.实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下,【,解析,】,动物细胞培养需要无毒无菌的环境，甲过程是指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，,A,项正确；乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶进行处理，,B,项正确；丙过程表示原代培养，此时的细胞仍能保持正常的二倍体核型，,C,项错误；丁过程表示传代培养，少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展，,D,项正确。,【,解析,】C,【解析】动物细胞培养需要无毒无菌的环境，甲过程是指从实验小鼠,6.,美国德克萨斯州科学家培育出世界上第一只克隆猫，这只小猫毛色花白，看上去完全不像生养它的花斑猫妈妈，也不完全像为它提供细胞核的基因猫妈妈。对该克隆猫毛色的解释合理的选项是,（）,基因重组所造成的结果,提供卵细胞的雌猫细胞质基因表达的结果,表现型是基因型与环境共同作用的结果,生养
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