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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2023/10/4,食物过敏的实验诊断,血清,sIgE,检测的现在,和未来,食物过敏的实验诊断 血清sIgE检测的现在和未来,1,食物过敏,F,ood Allergy,IgE-Dependent Immune Responses,食物不耐受,F,ood Intolerance,与食物相关的超敏反应,食物过敏与食物相关的超敏反应,2,食物过敏(,F,ood Allergy,),临床诊断,询问病史,体内试验,体外试验,SPT,sIgE,食物过敏(Food Allergy)临床诊断SPTsIgE,3,实验诊断,tIgE,sIgE,McAb,PcAb,问题:蛋白含量与生物活性,实验诊断tIgE问题:蛋白含量与生物活性,4,血清,sIgE,检测的现状,血清sIgE检测的现状,5,免疫球蛋白,E,(,IgE,)的发现,花粉过敏患者,1819,年,,Dr.John Bostock,输血所致过敏性哮喘,1919,年,,Ramirz,免疫球蛋白,E,(,IgE,),1967,年,,Ishizaka,(瑞典)和,Bennich&Jonansson,(美国),Fig,免疫球蛋白,E,(,IgE,)分子结构,免疫球蛋白E(IgE)的发现 花粉过敏患者Fig 免疫球蛋白,6,免疫球蛋白,E,(,IgE,)的体内分布,结合型,IgE,抗体,与嗜碱性粒细胞或肥大细胞结合,游离型,IgE,抗体,未与嗜碱性粒细胞或肥大细胞结合,图:,IgE,与,IgE,受体结合,免疫球蛋白E(IgE)的体内分布结合型IgE抗体图:IgE与,7,免疫球蛋白,E,(,IgE,)的检测(,1,),血清(游离),IgE,的检测,总,IgE,水平,Total IgE,,,tIgE,特异性,IgE,水平,Specific IgE,,,sIgE,牛奶蛋白,某一蛋白,抗原表位,牛奶,sIgE,抗体:,免疫球蛋白E(IgE)的检测(1)血清(游离)IgE的检测牛,8,血清,tIgE,水平,放射免疫吸附试验(经典),radio,immno,sorbent test,R,I,ST,血清tIgE水平放射免疫吸附试验(经典),9,血清,tIgE,水平,化学发光免疫分析(现状),chemiluminescence immunoassay,CLIA,优点,准确;快速,血清tIgE水平化学发光免疫分析(现状),10,血清,sIgE,水平,放射过敏原吸附试验(经典),radioallegosorbent test,RAST,血清sIgE水平放射过敏原吸附试验(经典),11,血清,sIgE,水平,荧光酶免疫分析,immuno-CAP,血清sIgE水平荧光酶免疫分析,12,血清,sIgE,水平,荧光酶免疫分析,金标准,单种过敏原,随机组合,定量分析,血清sIgE水平荧光酶免疫分析,13,血清,sIgE,水平,斑点酶联免疫吸附试验,Dot-ELISA,(膜条),多种过敏原联合测定,廉价(符合国情),组合模式(固定),血清sIgE水平斑点酶联免疫吸附试验,14,血清,sIgE,水平,酶联免疫吸附试验,ELISA,(捕获法),血清sIgE水平酶联免疫吸附试验,15,免疫球蛋白,E,(,IgE,)的检测(,2,),外周血嗜碱性粒细胞激活试验,Basophil Activation Tests,BAT,细胞表面(结合型),sIgE,体内,sIgE,生物学活性检测,免疫球蛋白E(IgE)的检测(2)外周血嗜碱性粒细胞激活试验,16,嗜硷性粒细胞激活试验(,BAT,),临床标本,外周抗凝血(全血),特定过敏原将外周血已致敏的嗜碱性粒细胞激活,细胞鉴定与活化状态,流式细胞仪(FCM)检测特定标志,嗜硷性粒细胞激活试验(BAT)临床标本,17,嗜硷性粒细胞激活试验(,BAT,),FCM,anti-CD123,anti-HLA-DR,anti-CD63,or CD203c,嗜硷性粒细胞激活试验(BAT)FCM,18,嗜硷性粒细胞激活试验(,BAT,),激活状态,CD63+,嗜硷性粒细胞激活试验(BAT)激活状态,19,嗜硷性粒细胞激活试验(,BAT,),卵巢发展蛋白,蟹黄,Eri s 2,Fig,rEris 2,和,CO,诱导体外嗜碱性粒细胞激活结果,嗜硷性粒细胞激活试验(BAT)卵巢发展蛋白Fig rEris,20,血清,sIgE,检测的未来,血清sIgE检测的未来,21,免疫球蛋白,E,(,IgE,)的检测,存在问题,科学问题,过敏原的复杂性与血清,sIgE,的异质性,血清,sIgE,含量测定与致病活性测定,技术问题,现有方法不能满足临床需要(简单、快速、通量),免疫球蛋白E(IgE)的检测存在问题,22,光激化学发光分析(,LICA,),发光体系,发光微球(,FG,),接受能量,受体微球(,A,),感光微球(,GG,),提供能量,供体微球(,D,),光激化学发光分析(LICA)发光体系,23,血清,tIgE,检测,双抗夹心,-LICA,免“洗涤”,高,-,精密度,Fig,血清,tIgE,定量分析原理,tIgE,血清tIgE检测双抗夹心-LICAFig 血清tIgE定量分,24,血清,tIgE,检测,(LICA),分析性能参数,批内精密度,5.3 5.8,批间精密度,5.3 9.0,血清tIgE检测(LICA)分析性能参数,25,血清,sIgE,检测,蛋清,sIgE,四种过敏原,受体微球,-,卵类黏蛋白(,Gal d 1,),受体微球,-,卵白蛋白(,Gal d 2,),受体微球,-,卵转铁蛋白(,Gal d 3,),受体微球,-,卵溶菌酶(,Gla d 4,),Fig B,血清蛋清,sIgE,检测模式,血清sIgE检测蛋清sIgEFig B 血清蛋清sIgE检测,26,血清,sIgE,检测(蛋清),-LICA,分析性能参数,ELISA,LICA,血清稀释曲线,血清sIgE检测(蛋清)-LICA分析性能参数ELISAL,27,血清,sIgE,的精准检测,分子诊断(,CRD,),The determination of specific IgE to different allergens is called molecular diagnosis or component-resolved diagnosis(CRD),血清,sIgE,抗体谱,针对每种蛋白特异性抗体(,sIgE,),血清sIgE的精准检测分子诊断(CRD),28,component-resolved diagnosis(CRD),Molecular diagnosis will help to increase the sensitivity of the testing and,on the other hand,provides a more-detailed patient-tailored risk profile.,component-resolved diagnosis(,29,血清,sIgE,的异质性,梭子蟹,过敏原,sIgE,抗体异质性,血清sIgE的异质性梭子蟹,30,血清,sIgE,抗体谱检测,过敏原组分,sIgE,抗体谱,精准,sIgE,检测,精准脱敏治疗,天然总蛋白溶液,天然单一蛋白纯品,重组单一蛋白溶液,已知抗原:,血清sIgE抗体谱检测过敏原组分sIgE抗体谱天然总蛋白溶液,31,血清,sIgE,和细胞表面,sIgE,细胞学方法,生物学活性,血清sIgE和细胞表面sIgE细胞学方法生物学活性,32,血清,sIgE,生物活性检测,嗜碱性粒细胞激活试验(,BAT,),血清,sIgE,介导,嗜碱性粒细胞,KU812,(,KU812F,),标准过敏原,血清sIgE生物活性检测嗜碱性粒细胞激活试验(BAT),33,血清,sIgE,生物活性检测,采用,FCM,技术,检测,特定过敏原激发,血清,sIgE,介导,KU812,细胞激活试验,血清sIgE生物活性检测采用FCM技术,34,血清,sIgE,生物活性检测,抗原表位谱,生物信息学,筛选技术,血清sIgE生物活性检测抗原表位谱,35,血清,sIgE,生物活性检测,血蓝蛋白表位分析,血清sIgE生物活性检测血蓝蛋白表位分析,36,
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