微生物和微生物学检验

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,绪论,微生物和微生物学检验,第1页,一、微生物（,microorganisms）：,概念：一群肉眼看不见微小生物，包含：,细菌、螺旋体、立克次体、衣原体、支原体、放线菌,（原核）、病毒（非细胞）、真菌（真核）。,原核与真核细胞区分：细胞核区分,微生物和微生物学检验,第2页,最新生物进化分类法：,古细菌,：,(,Archaeobacteria),嵌合进化或共生进化,真细菌：,真核生物：,微生物和微生物学检验,第3页,微生物与人类关系：,（1）大多数不致病，甚至是对人、动、植物有益和必需，如：固氮菌；酿酒、制醋、抗生素、肠道正常菌群。,（2）病原微生物:,pathogenic microorganisms,微生物和微生物学检验,第4页,二、微生物学(,microbiology)：,微生物进化分类、生命活动规律及与动植物、人类、自然相互关系。,按研究对象分：细菌、病毒、真菌学,按应用领域分：工业、农业、医学、兽医,按研究方向分：基础微生物、分子微生物学、,微生态学 等,微生物和微生物学检验,第5页,医学微生物学(,medical microbiology,)：,与医学相关病原微生物生物性状、致病机理、免疫性及相关技术和理论应用。,临床微生物学(,clinical microbiology,)：,测重研究感染性疾病诊疗方法，提供诊疗依据和指导用药。,微生物和微生物学检验,第6页,三、医学微生物学发展简史,1、微生物学经验时期：,（）酿酒、制醋、腌腊等食品生产、保留；,（）师道南天愚集：清乾隆年间，,“东死鼠，西死鼠，人见死鼠如见虎。鼠死未几日，人死如圻堵”；“三人行未十步路，忽死两人横截路”,（）人痘接种法：免疫最早概念。,微生物和微生物学检验,第7页,2试验微生物课时期（17世纪始）：,显微镜培养基,（）微生物发觉：列文虎克、巴斯德（发觉微生物作用，创建巴氏消毒法）、李斯特、郭霍氏（固体培养、染色技术）,郭霍氏法则：、。逐步被淘汰。,新病原确定方法：,核酸确定法,（）免疫学兴起、分离：,牛痘、巴斯德（霍乱、炭疽、狂犬疫苗）、白喉抗毒素动物血清治愈白喉。,（）抗生素发觉：,当前碰到问题：滥用造成耐药性增高,微生物和微生物学检验,第8页,3 当代微生物课时期：近二、三十年,（1）新病原微生物发觉,a,传统病原卷土重来；,b,新型病原。,（2）致病机理深入研究,a,采取新技术；,b.,各种致病原因分子机理及调控。,微生物和微生物学检验,第9页,（3）诊疗技术发展：,三大标识技术,各种分子生物学技术：核酸杂交，,PCR，,微量化，自动化。,（4）各种新型疫苗研制,传统疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗、,DNA,疫苗。,（5）免疫学独立,远远超越感染免疫范围。,微生物和微生物学检验,第10页,思索：,（）预测微生物学发展下一阶段；,（）当前科学界研究热点？,微生物和微生物学检验,第11页,4基因组微生物学,（）微生物在基因组前时代在生物学研究中地位；,（）结构简单，可做为模型，,模式生物,；,（）在基因组时代，作为急先锋；,（）微生物基因组研究成功，必定极大地改变微生物学科现实状况。,所以，微生物学研究正面临前所未有地机遇和挑战。,从上看出，医学微生物学发展，也是各种技术方法发展，也是临床微生物学发展历史。,微生物和微生物学检验,第12页,四、临床微生物学任务,研究感染性疾病病原体特征：,传统病原微生物,条件致病菌,提供快速、准确病原学诊疗；,指导合理使用抗生素；,当前检验科主要任务。,对医院感染进行监控。,微生物和微生物学检验,第13页,五、临微学习方法：,主要性：与毕业后工作紧密相关。,（）平时注意预习、复习；,（）对内容上，紧紧围绕诊疗，诊疗又是由各种经典特征建立方法来进行,抓特征、去共性,（）注意新动向。,微生物和微生物学检验,第14页,第一篇微生物学,细菌学总论,微生物和微生物学检验,第15页,一、细菌(,bacterium),形态与结构,（一）形态：,个体微小、形态各异,球菌（,coccus）,杆菌 (,Bacillus,),弧菌与弯曲菌,螺旋菌及螺旋体,不规则形。,微生物和微生物学检验,第16页,（二）结构：,微生物和微生物学检验,第17页,基本结构：包含胞壁、胞膜、胞浆及核质,细胞壁,：,主要成份,肽聚糖,。,微生物和微生物学检验,第18页,乙酰胞壁酸,聚糖骨架,.4,糖苷键,乙酰葡糖胺,四肽侧链,五肽桥（苷氨酸）,菌肽聚糖厚、层数多、立体状坚固。,微生物和微生物学检验,第19页,图 金黄色葡萄球糖细胞细胞壁,肽聚糖结构,图 大肠杆菌细胞壁肽聚糖结构,微生物和微生物学检验,第20页,膜磷壁酸,菌细胞壁 壁磷壁酸,特殊结构 表面蛋白：,SPA、M,蛋白,菌细胞壁 磷脂,特殊结构 脂蛋白,类脂,：毒性部分,(外膜),脂多糖（,LPS，,内毒素,）：,关键多糖：属和组特异,特异多糖：种和型特异,微生物和微生物学检验,第21页,和,菌细胞壁差异,：,特 征,革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌,强度,较坚韧,较疏松,厚度,厚，2080,nm,薄，510,nm,肽聚糖层数,多，可达50层,少，13层,肽聚糖含量,多，可占胞壁干重5080%,少，占胞壁干重1020%,磷壁酸,+,-,外膜,-,+,结构,三维空间（立体结构）,二维空间（平面结构）,微生物和微生物学检验,第22页,型细菌,：细胞壁缺点型细菌。,高渗培养基中：油煎蛋样菌落。,在临床上注意型带来漏诊。,微生物和微生物学检验,第23页,2.特殊结构,荚膜,(,capsule)：（）,保护作用；（）致病作用：侵袭力；（）免疫原性；（）判别与分型。,微生物和微生物学检验,第24页,鞭毛,(,flagellum)：,运动器官，抗原。,微生物和微生物学检验,第25页,菌毛,(,Pilus),：（）普通菌毛：粘附素；（）性菌毛：根，长而粗，,菌转移质粒，耐药及毒力质粒。,微生物和微生物学检验,第26页,芽胞,(,Spore,)：不利环境中一个抵抗形式，是,休眠体,而非繁殖体。,微生物和微生物学检验,第27页,二、细菌繁殖与新陈代谢：,掌握几个概念：,自养菌、异养菌；,需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌、微需氧菌,。,微生物和微生物学检验,第28页,专性厌氧菌有氧不生长，原因有二：,厌氧菌缺乏细胞色素与细胞色素氧化酶，所以不能氧化那些氧化还原电势较高氧化型物质。,厌氧菌缺乏过氧化氢酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶,不能去除有氧环境下所产生超氧离子（,O,2-,）,和过氧化氢（,H,2,O,2,），,因而难以存活。,微生物和微生物学检验,第29页,群体细菌生长繁殖曲线：,迟缓期、,对数期,、稳定时、衰退期,微生物和微生物学检验,第30页,四、消毒与灭菌,掌握几个概念：,消毒,（,Disinfection）：,杀灭病原微生物方法。,灭菌,（,Sterilization）：,杀灭物体上全部微生物（包含病原体和非病原体繁殖体和芽胞）方法。,无菌,（,Asepsis）：,物体上或容器内无活菌存在意思。,防腐,（,Antisepsis）：,预防或抑制微生物生长繁殖方法。,微生物和微生物学检验,第31页,五、微生物遗传变异,（一）遗传变异物质基础,染色体,质粒,（,plasmid）：,细菌存在于染色体外少部分（约12%）,DNA，,可决定细菌一些生物学特征。,转位因子：插入次序、转座子、转座噬菌体,微生物和微生物学检验,第32页,质粒生物学性质：,1,质粒并非细菌生存所必不可少遗传物质。,2,质粒传递（转移）是细菌遗传物质转移一个主要方式。,3,质粒可自行失去或经人工处理而消失。,4,质粒能够独立复制。,5,可有几个质粒同时共存在于一个细菌内。,微生物和微生物学检验,第33页,（二）细菌变异现象,形态与结构变异,培养特征变异,毒力变异,耐药性变异,微生物和微生物学检验,第34页,（三）细菌变异机制,突 变,基因转移和重组,转化,（,transformation）,是受体菌直接摄取供体菌游离,DNA,片段，经过与染色体重组，取得了供体菌部分遗传特征。,转导,(,transduction),是噬菌体为媒介，把供细菌基因转移到受体菌内，造成后者基因改变过程。,接合,(,conjugation),是两个经过直接接触，在暂时沟通中进行基因转移过程。,微生物和微生物学检验,第35页,微生物和微生物学检验,第36页,(四,),遗传变异研究实际意义,在细菌分类上应用,在诊疗中应用,在预防中应用,在治疗中应用,检验致癌物质作用,在遗传工程方面应用,微生物和微生物学检验,第37页,六、微生物致病性与感染,（一）微生物与宿主关系,常居菌,正常菌群,过路菌 （）抵抗力下降；,（）长久化疗、放 疗、,条件致病菌,：免疫抑制剂患者；,（）外伤；,（）,菌群失调,：菌群失调症,。,微生物和微生物学检验,第38页,正常菌群生理意义：,（）生物拮抗；,（）促进机体免疫；,（）与衰老相关：双歧杆菌；,（）合成维生素和细菌素。,微生物和微生物学检验,第39页,（二）细菌致病物质及作用,：,细菌表面成份：参加粘附、定植和侵入；,毒素及毒性蛋白和酶：,外毒素：,内毒素,：,微生物和微生物学检验,第40页,细菌外毒素举例,细菌种类,革兰氏染色,引发疾病,毒素名称,毒素作用方式,白喉杆菌,+,白喉,白喉毒素,坏死性,霍乱弧菌,-,霍乱,肠毒素,引发小肠过分分泌液体,鼠疫杆菌,-,鼠疫,鼠疫毒素,可能坏死性,破伤风杆菌,+,破伤风,破伤风溶血毒素,溶血性心脏毒素,破伤风痉挛毒素,引发骨骼肌痉挛,产生荚膜杆菌,+,气性坏疽,-,毒素,溶血性卵磷脂酶，坏死性,-,毒素,溶血性心脏毒素,-,毒素,溶蛋白性,微生物和微生物学检验,第41页,外毒素与内毒素主要区分,区分关键点,外毒素,内毒素,存在部位,由活细菌释放至细菌体外,为细菌细胞壁结组成份，菌体崩解后释出,细菌种类,以革兰氏阳性菌多见,革兰氏阴性菌多见,化学组成,蛋白质（分子量27，000900，000）,磷脂一多糖一蛋白质复合物（毒性主要为类脂,A）,稳定性,不稳定，60以上能快速破坏,耐热，60耐受数小时,毒性作用,强，微量对试验动物有致死作用（以ug计量）。各种外毒素有选择作用，引发特殊病变，不引发宿主发烧反应。抑制蛋白质合成，有细胞毒性、神经毒性、紊乱水盐代谢等,稍弱，对试验动物致死作用量比外毒素为大。各种细菌内素毒性作用大致相同。引发发烧、弥漫性血管内凝血、粒细胞降低血症、施瓦兹曼现象等,抗原性,强，可刺激机体产生高效价抗毒素。经甲醛处理，可脱毒成为类毒霉，仍有较强抗原性，可用于人工自动免疫,刺激机体对多糖成份产生抗体，不形成抗毒素，不能经甲醛处理成为类毒素,微生物和微生物学检验,第42页,