培养基的配制灭菌（精品）

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,环境微生物实验（四）,Microbiology Department,College Of Resource&Environment,SWU,Liyong,Tel:023-68250426,E-mail:,培养基的配制和灭菌,实验目的,实验材料,实验方法,实验作业,实验目的,了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。,了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的使用方法。,熟悉微生物的有关准备工作及操作方法。,实验材料,药品：相关配方,器材：高压蒸汽灭菌锅,其它：,实验方法,培养基的配制,选择配方；,称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。,溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。,过滤：除去杂质。,调,pH,值,：用,NaOH,或,HCl,调,pH,，用,pH,试纸对照。,加琼脂溶化,：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。,分装：注意不要污染棉塞。,包扎成捆，挂上标签,注明何种培养基。,灭菌备用：培养基灭菌后必须在,37,0,C,下恒温培养,24h,，确定无菌生长，方可使用。,牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,牛肉膏,3g,蛋白胨,5g,氯化钠,3g,琼脂,24g,水,1000mL,pH 7.27.4,马铃薯蔗糖琼脂培养基,去皮马铃薯（煮沸腾,30min,后过滤后用汁液）,200g,蔗糖,20g,自来水,1000mL,琼脂,24g,pH,自然,单倍乳糖蛋白胨培养液,蛋白胨：,10g,牛肉浸膏：,3g,NaCl,：,5g,乳糖：,5g,水：,1000ml,1.6,的溴甲酚紫乙醇溶液：指示剂,pH,：,7.2,分装在试管，,10ml/,管，,内放置倒置小管,；,同单倍,乳糖蛋白胨培养液；浓度三倍；,三倍乳糖蛋白胨培养液,蛋白胨：,10g,乳糖：,5g,琼脂：,24g,K,2,HPO,4,：,2g,水：,1000ml,2%,伊红：,20ml,0.5,美蓝：,13ml,注意：伊红和美蓝液单独分装灭菌，使用前再和其它成分混合使用；,伊红美,蓝,鉴别培养基,1,组：,牛肉膏蛋白胨培养基：,1500mL,斜面：,35,支,7mL,其它：分装三角瓶,2,组：,马铃薯培养基：,500mL,装入三角瓶中,3,组：,单倍乳糖发酵培养基：,600,mL,分装至试管,60,支；,三倍乳糖发酵培养基：,300,mL,分装至试管,30,支；,4,组：,伊红美兰培养基：,400mL,分装至三角瓶中；,其它准备材料：,90mL,无菌水：,250mL,三角烧瓶（,加石子,），装水,90.0mL,；塞上棉塞，包扎、灭菌备用；,1,个,/,组；,试管无菌水：试管装水,9.0mL,，塞上棉塞，包扎、灭菌备用,:,（,14,支,/,组）；,空三角瓶：,2,个,/,组；,1mL,无菌吸管,:20,支,/,组；,10mL,无菌吸管,:2,支,/,组,。,固体培养基加琼脂后加热溶化时要注意哪些问题？,培养基中加琼脂的作用是什么？为什么？,干热灭菌、高压蒸汽灭菌有何不同？,