生物化学实验10 纸层析法分离氨基酸电子课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,生物化学实验技术,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,生物化学实验10 纸层析法分离氨基酸电子课件,纸层析法分离氨基酸,实验类型：综合性,教学时数：,6,一、实验目的,通过,氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理和操作方法。,二、实验,原理,纸,层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法，层析溶剂由有机溶剂和水组成。,物质,被分离后在纸层析图谱上的位置是用,R,f,值（比移）来表示的,：,R,f,=,原点到层析点中心的距离,原点到溶剂前沿的距离,在一定条件下某物质的,R,值是常数，,R,的大小与物质的结构，性质、溶剂系统，层析滤纸的质量层析温度等因素有关，本实验利用层析法分离氨基酸。,三、仪器与试剂,1,、仪器：层析缸、毛细管、喷雾器、培养皿、层析滤纸、吹风机、小,烧杯。,2,、试剂：扩展剂（,正丁醇,-,醋酸）,、,0.5,氨基酸溶液（赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸溶液及混合氨基酸溶液）、,0.1,水,合,茚,三,酮,-,正丁醇溶液。,四、实验内容,将,盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中。,取,层析滤纸（长,22cm,宽,14cm,）一张，在纸的一端距边缘,2cm,处用铅笔划一条直线，在此直线上每隔,2cm,作一记号。,用,毛细管将各氨基酸样品分别点在,这,6,个,位置上，干后再点一次，每点在纸上扩散的直径最大不超过,3mm,。,22cm,14cm,用,线将滤纸缝成筒状，纸的两边不能接触。将盛有,20mL,扩展,剂的培养皿迅速置于密闭的层析缸中，并将滤纸直立于培养皿中,。待,溶液上升,1520cm,时,即取出滤纸，用铅笔描出溶剂前沿界线自然干燥或用热风吹干。,用,喷雾器均匀喷上,0.1%,茚,三,酮,-,正丁醇,溶液然后置烘箱中烘烤,5min,（,100,）或用热风,吹干，即,可显出各层析斑点。,计算,各种氨基酸的,R,f,值。,