土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,学习目标：,1,、明确培养基对微生物进行选择的原理。,2,、学会统计微生物数量的方法。,课题背景,尿素是一种重要的农业氮肥。但是尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氮之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。,尿素最初是从人的尿液中发现的。,1828,年，德国化学家维勒成功地通过无机物的化学反映合成了尿素，揭开了历史上人工合成有机物的新篇章。,尿素,研究思路,筛选菌株,PCR,的自动化需要耐高温的,DNA,聚合酶，这种酶要能忍受,93,左右的高温。,科学家从水生耐热细菌,Taq,中分离到耐高温的,Taq DNA,聚合酶。,为什么,Taq,细菌能从热泉中被筛选出来呢？,因为热泉,70-80,的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而使耐高温的,Taq,细菌脱颖而出。,实验室微生物的筛选原理,应用筛选,Taq,细菌的原理，,人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、,pH,等），同时抑制或阻止其他微生物生长。,问题探讨：,1,、从土壤中分离自养型微生物用什么培养基？,2,、从土壤中分离固氮微生物用什么培养基？,3,、从土壤中分离出分解尿素的细菌用什么样的培养基？在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？,4,、如果想分离出能分解石油的微生物，应该用什么培养基？,统计菌落数目,常用稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目。样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为保证结果准确，一般选择菌落数,30300,的,平板计数。,培养基上的菌落,设置对照,设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。,2,、某同学在稀释倍数为,10,6,的培养基中测得平板上菌落数的平均值为,23.4,，那么每毫升样品中的菌株数是（涂布平板时所用稀释液的体积为,0.2ml,）,_,。,3,、用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量,_,，因为,_,。,4,、某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？,1.1710,8,多,当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。,答：不能。因为杂菌可能来自培养基或来自培养过程。,实验室微生物的筛选原理,应用筛选,Taq,细菌的原理，,人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、,pH,等），同时抑制或阻止其他微生物生长。,