消毒与灭菌技术

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第二章消毒与灭菌技术,1,消毒与灭菌技术,教学内容,1,基本概念,2,物理方法,3,化学方法,4,制药工业中的消毒与灭菌（）,2,第一节 基本概念,3,灭菌,杀灭或除去,所有微生物的繁殖体和芽胞,。,消毒,杀灭或除去,病原微生物,。,防腐,抑制,微生物的生长与繁殖。抑菌剂或防腐剂。,除菌,:,用冲洗、过滤等机械手段除去微生物的方法,化疗：,用对病原菌有毒力但对机体无害的化学物质杀灭或抑制机体内病原微生物的方法,消毒与灭菌技术,基本概念,4,消毒与灭菌技术,基本概念,无菌,在一定范围内没有活的微生物存在。,。,无菌操作法,防止细菌进入机体或对象的技术,。,无菌车间,无菌操作台,5,消毒与灭菌技术,基本概念,无菌操作：防止微生物进入工作对象的方法。,无菌制剂系指采用某一无菌操作方法或技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和芽胞的一类药物制剂。,6,第二节 物理方法（,P30,）,7,消毒与灭菌技术,物理灭菌法,热力灭菌法（干热灭菌、湿热灭菌）,辐射灭菌法（紫外线、电离幅射、微波）,滤过除菌法（除菌滤器、适用物品）,其他,超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细胞、提取抗原）,干燥与低温抑菌,8,消毒与灭菌技术,热力灭菌法,原理,使微生物蛋白质变性凝固；,酶失活；,微生物体内的,DNA,断裂。,方法,干热灭菌法,湿热灭菌法,热力灭菌法,9,焚烧,-最彻底的灭菌方法,烧灼,-直接用火焰灭菌方法,如接种环、试管口、三角瓶口,干烤,-加热160-1,70 2h,玻璃器皿、陶瓷,1,、干热灭菌法,红外线-热效应，与干烤类似,灭菌效果：可杀死营养体和芽胞,10,2.,湿热灭菌法,高压蒸汽灭菌法（,热压灭菌法）,最有效的湿热灭菌法,121,15-20mim,（杀芽胞,),煮沸消毒法,水煮100 5,mim(,杀繁殖体)-2,h,(,杀芽胞),流通蒸汽消毒法,巴氏消毒法,间歇蒸汽灭菌法,水蒸汽100 15-30,mim,(,杀繁殖体),反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌,(,杀芽胞）,较低的温度,61 30,mim/71 30s,（杀致病菌）,效果比干热好,11,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：,湿热灭菌特点,蒸气比热干空气穿透力强，所以灭菌效力高于干热灭菌法。,灭菌效果可靠,简便、经济、易控制,制剂生产中广泛可靠的灭菌方法。,除对热敏感的药物外其他药物均可选用,12,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法,高采用高压饱和蒸汽杀灭微生物，是最有效的灭菌方法,115,70.91kPa,30min,121，,103.1kPa,15-20,培养基,注射液,手提式灭菌锅,灭菌箱,13,高压蒸汽灭菌,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法,温度,/,压力,/kPa(kg/cm2),时间,/min,110,40.52(0.4),40,115,70.91(0.7),30,120,101.3(1.0),20,125,141.82(1.4),15,130,182.34(1,8),10,热压灭菌所需温度与相当压力及时间,14,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法,软包装灭菌器 高压蒸汽灭菌器,15,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法,高压蒸汽灭菌常用设备,手提式热压灭菌器,（科研、检验、医务室）,16,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法）,灭菌初期先排净锅内冷空气,;,灭菌时间：从达到规定压力和温度开始计；,锅内水分要充足,;,灭菌物品装量不宜太满,;,灭菌结束需缓慢减压；,灭菌结束，趁热取出物品。,高压蒸汽灭菌注意事项,17,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：流通蒸汽灭菌法,水蒸汽100,30-60(,杀繁殖体),适用对象：不需杀死芽孢的物体的消毒。,适用于一些注射剂生产，尤其是,1,2ml,注射剂及不耐高热的品种。,若在药液中加入抑菌剂（,0.1%0.5%,苯酚等），可杀死芽孢,此法不能保证杀灭芽孢，因此制备过程要避免污染。,18,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：低温间歇灭菌法,将灭菌物体置于,6080,，,1h,后，置于,2025,，,24h,。反复三次,(,杀芽胞）,不宜高压灭菌的培养基,不耐热的药物和营养物,发酵车间的管道等,中药注射剂常用该法,适用对象,缺点：时间长、功效低，消灭芽孢效果差,19,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：煮沸灭菌法,煮沸灭菌法,100 5,(,杀繁殖体)，2,h(,杀芽胞),适用对象：注射器和外科器械的消毒。,20,消毒与灭菌技术,湿热灭菌法：,巴氏消毒法,巴氏消毒法（杀致病菌）,61 30或,71 15,82,处理,4,秒,适用对象：奶制、果汁、酒、糖浆等食品消毒。,21,消毒与灭菌技术,影响热力灭菌的因素,微生物的种类和数量,灭菌温度与作用时间,（灭菌温度与时间成反比）,被灭菌物品的性质,（所含营养、,pH,）,22,消毒与灭菌技术,热力灭菌法：湿热灭菌与干热灭菌的比较,同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好,湿热中细菌菌体蛋白较易凝固,湿热的穿透力比干热大,湿热的蒸汽有潜热,23,消毒与灭菌技术,辐射灭菌,法,非电离辐射：,紫外线,波长240-300,nm,（2,54nm,）,杀菌机理：,干扰,DNA,的复制与转录,特点：紫外线穿透力较弱,房间静态空气消毒时剂量,一般为,0.1,0.4w/m,2,通风管内流通空气可采用,大于,100w/m,2,的大剂量,24,消毒与灭菌技术,辐射灭菌法,非电离辐射：,紫外线,一般,6,15m,3,房间装,30w,紫外灯一只；,灯距地面,2.53m,温度,10,55,，湿度,45,60,应在操作前照射,1,2h,操作时关闭。,25,消毒与灭菌技术,辐射,灭菌,法,：,非电离辐射：,紫外线,杀灭繁殖体需,35s,杀灭芽孢需,10min,以上,紫外灯必须无尘、无油垢,可在使用前照射,12h,，操作时关闭,紫外灯有效使用期为,3000h,26,消毒与灭菌技术,辐射,灭菌,法,：电离辐射,包括：,射线,（电子束灭菌，,适用薄、密度低,的物料,）,60,Co,射线,（同位素辐射灭菌法）,杀菌机理：,产生游离基,破坏,DNA。,特点：,射线穿透力强,、被灭菌物体温度变化小,适用范围：一次性医用塑料制品的消毒、食品的消毒-不破坏其营养成分,27,消毒与灭菌技术,辐射灭菌法特点,适用于热敏性药物的灭菌；,射线穿透力强,特别适用于已包装密封的药品消毒灭菌可防二次污染；,杀菌作用可靠，广泛适用于固、液、半固体物料。,有可能使药效活性降低，使用中注意安全保护。,28,消毒与灭菌技术,滤过灭菌法,指药液通过无菌滤器，除去活的和死的微生物而得到无菌滤液的方法。,特点：,（,1),适用于很不耐热的药物溶液的除菌（,2),必须无菌操作（滤球、容器、药液、环境无菌等过程）。,29,消毒与灭菌技术,滤过除菌法,杀菌机理：含有微细小孔0.22,m,只允许液体或气体及孔径,0.22,m,的颗粒通过,，细菌不能滤过。,不能除病毒、支原体,适用范围：血清、毒素、输液、生物制品、抗生素以及空气等的除菌。,30,过滤灭菌,31,32,消毒与灭菌技术,物理灭菌法,方法,主要技术参数,应用特点,干热灭菌,药典规定,1601702h,或,140,，,3h,穿透力弱，温度不易,均匀，温度高，不适,于大部分药品,湿,热,灭,菌,热压灭菌,98kPa(1kg/cm,2,),15-20min,穿透力强，效果可,靠，适用广,流通蒸汽,100,，,30-60min,不能杀灭细菌芽胞,间歇灭菌,100,，,30min+,室,温,24h,，重复操作,3,次以上,适于必须加热灭菌而,又不耐高温者；时间,长，效果不理想；须,加抑菌剂,33,消毒与灭菌技术,物理灭菌法,紫外线灭菌,200-300nm,，,254nm,最强,用于空气灭菌和表面灭菌，效果与微生物敏感性有关，对酵母菌和霉菌力弱,微波灭菌,2450,MHz,，,3-6min,强热效应，快速高效，适于热不稳定者,辐射灭菌,射线,60,Co,穿透力强,不升高温度，设备费用高，辐射能引起一些药物,pH,值、含量、活性等改变，某些制品不宜选用,射线,由电子加速器产生，穿透力弱，灭菌效果差,34,第三节 化学方法（,P37,）,35,利用化学药物（消毒防腐剂）破坏微生物的化学组成、物理结构和生理活动，达到防腐灭菌目的。,消毒与灭菌技术,化学消毒法,36,促进菌体蛋白质变性凝固,（酚、醇、醛、酸碱类等）,干扰细菌酶系统和代谢,（氧化剂、重金属盐类等）,损伤细菌细胞膜，增加其通透性,（表面活性剂、脂溶剂等）,菌体成分氧化、水解或结构改变,（氧化剂、卤素、醛、酚等）,消毒与灭菌技术,化学消毒剂作用机制,37,消毒与灭菌技术,化学消毒：,气体灭菌法,使用能形成气体或蒸汽的化学药品,适用于不耐热又不能过滤的药品（混悬液、固体药物等,环氧乙烷灭菌法,（制药设备、注射器、生物制品）,甲醛蒸汽熏蒸灭菌法（,车间、制药设备,）,其他蒸汽熏蒸灭菌法,38,消毒与灭菌技术,化学消毒：,气体灭菌法,环氧乙烷,：,车间、制药设备、注射器、生物制品,甲醛溶液,：,车间、制药设备,醋酸、乳酸,丙二醇,臭氧,39,灭菌物品,灭菌器,减压排气,预热,通环氧乙烷混合气体,抽真空排除环氧乙烷,送无菌空气,消毒与灭菌技术,气体灭菌法,:,环氧乙烷灭菌法,40,消毒与灭菌技术,气体消毒与灭菌,:,环氧乙烷灭菌法,环氧乙烷混合气体,10%,环氧乙烷,90%,二氧化碳,12%,环氧乙烷,88%,氟里昂,41,消毒与灭菌技术,气体灭菌法,:,环氧乙烷灭菌法,环氧乙烷维持时间,浓度,450mg/L,45,维持,5h,浓度,850900mg/L,45,维持,3h,相对湿度：,40%60%,温度：,2255,42,消毒与灭菌技术,化学消毒：,浸泡与表面消毒法,0.1%新洁尔灭（苯扎溴铵）,0,.2,%,0.5%过氧乙酸,2,%,煤酚皂溶液（来苏水）,洁净区地面、门、墙、玻璃窗、天花板、清洁间水池和清洁工具的消毒,70%,75%乙醇：皮肤、直接,接触药物的仪器设备,43,44,消毒与灭菌技术,常用的消毒防腐剂及应用,类,型,名称及使用方法,作用原理,应用范围,醇,类,70%,75%乙醇,脱水、蛋白质变性,皮肤、器皿,醛,类,0,.5,%,10%甲醛,2%,戊二醛（,pH=8,）,蛋白质变性,房间、物品消毒（不适合食品厂）,酚,类,3%,5%石炭酸,2%来苏儿（煤酚皂）,3%,5%来苏儿,破坏细胞膜、蛋白质变性,地面、器具,皮肤,地面、器具,氧,化,剂,0,.1,%,高锰酸钾,3%过氧化氢,0,.2,%,0.5%过氧乙酸,氧化蛋白质活性基团，酶失活,皮肤、水果、蔬菜,皮肤、物品表面,水果、蔬菜、塑料等,45,类型,名称及使用方法,作用原理,应用范围,重,金,属,盐,类,0.05%0.1%,升汞,2%红汞,0.1%1%硝酸银,0.1%0.5%硫酸铜,蛋白质变性、酶失活,变性、沉淀蛋白,蛋白质变性、,酶失活,非金属器皿、体温计,皮肤、粘膜、伤口,皮肤、新生儿眼睛,防治植物病害,表,面,活,性,剂,0.05%0.1%,新洁尔灭（苯扎溴铵）,0.05%0.1%,杜灭芬,蛋白变性、破坏细胞膜,皮肤、粘膜、器械,皮肤、金属、棉织品、塑料,消毒与灭菌技术,常用的消毒防腐剂及应用,46,类型,名称及使用方法,作用原理,应用范围,卤素及其化合物,0.20.5,mg/L,氯气,10%20%漂白粉,0.5%1%漂白粉,2.5%碘酒,破坏细胞膜、蛋白质,饮水、游泳池水,地面,水、空气等,皮肤,染料,2%4%,龙胆紫,与蛋白质的羧基结合,皮肤、伤口,酸类,0,.1%,苯甲酸,0,.1%山梨酸,食品防腐,食品防腐,消毒与灭菌技术,常用的消毒防腐剂及应用,47,第四节,制药工业中的消毒与灭菌,48,消毒与灭菌技术,制药工业中的消毒与灭菌,空气中微生物的控制,水中微生物的控制,设备的消毒灭菌,墙壁、地面、天花的消毒灭菌,原辅料药的消毒灭菌,操