生化仪的检定、校准、质控与比对课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,202X/11/4,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,202X/11/4,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,202X/11/4,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,202X/11/4,#,生化部分,生化仪器概述,生化仪的检定、校准、质控与比对,生化检验环境及辅助设施要求,检测系统,检测系统的概念：指为完成某一项目的检测所涉及的仪器、试剂、校准品、质控品、操作程序、质控措施和保养计划等。广义的检测系统还包括标本采集和具体操作人员。,自动生化分析仪是将临床化学分析过程中的加样、加试剂、混合、孵育反应、检测、结果计算、打印及试验后清洗等步骤进行自动化操作的仪器。,具有快速、简便、灵敏、准确、易于标准化、微量等特点。,本科室所使用的生化设备,Streamlab,自动化流水线：包含,4,台,Dimension Rxl MAX,、,1,台,CA7000,、,1,台,CENTAUR XP,2,台,AU2700,1,台,VITROS 250,1,台,VITROS FS5.1,AU2700,结构及组成,进样系统,样本吸样系统,反应比色杯,试剂仓,试剂吸样系统,冲洗系统,混匀系统,光路系统,AU2700,工作流程,加试剂,加样本,混匀,加试剂（必要时）,混匀,比色,计算结果,复查（必要时）,双波长的优势,在单位时间内有两条波长不同的光束,1,和,2,交替照射同一个溶液，由检测器测出的吸收度是这两个波长下吸收度的差值,A,。,消除噪声干扰,减少杂散光影响,消除样本本身光吸收的影响：溶血、脂血、黄疸,双试剂的优势,第一试剂加入后可起到全部或部分消除某些内源性干扰的作用,第二试剂为启动被检测物质反应的试剂，两种试剂混合后才共同完成被检项目的生化反应,增强了抗干扰能力和试剂的稳定性，提高了测定的准确性。,检定,检定的概念和用途：依据国家计量检定规程的要求，通过具体的操作，以确定仪器的计量特性（外观、零点漂移、波长的准确度和重复性、杂散光、线性误差、交叉污染、比色池温度的准确性等）是否符合法定要求。一般由国家计量部门执行。适用于新制造、使用中和修理后的吸光原理临床生化分析仪的检定，详见,生化分析仪检定规程,（,JJG 464-1996,）。,校准的概念和用途,“在一定条件下的一系列操作来确定检测仪器和检测系统所指示的量值，或者某一物质，或者参考物质代表的值，与相应标准所认识量之间的关系。”,简单来说是用一个或多个已知某检测物质（项目）浓度的样品（校准品），建立该物质的量（浓度）与仪器检测量（吸光度或吸光度变化率）之间的量效关系的过程。,校准方式,K,因子：在没有酶校准品时可使用,K,值进行酶活性的计算，但应注意理论,K,值与实际,K,值的差异（分光系统：波长精度、杂散光；加样系统：加样误差等）,一点及多点校准：校准曲线线性好并通过坐标零点，可采用一个校准液；线性好的但不通过坐标零点，应使用两个以上的校准液。对于校准曲线呈非线性者，必须使用,3,个以上校准液，每一个校准液都有一个合适的浓度。,校准校正,校准时机,更换试剂批号,质控失控,ISE,每天定标,仪器大维护或更换重要配件,至少每,6,个月进行一次,校准注意事项,选择合适的校准品，校准品应可溯源,不可用定值质控血清代替校准品进行校准,应避免基质效应的影响，最好使用人血清基质校准品,校准验证,校正验证的目的是确定现有的校正设定,(,信号与分析物浓度关系,),是否保持稳定，以及判断可报告范围内的校正是否保持持续稳定及测定结果的准确性的检查方法。,校准验证的时机,试剂种类改变或新批号试剂的应用,;,分析检测系统进行了大的预防性维护或更换了重要部件,由此可能影响到分析检测系统的性能,;,室内质控出现异常的趋势或漂移,超出了实验室可接受的界限,;,实验室检查实验项目的可报告范围是否正确,没有上述情况时一般要求每,6,个月验证一次,质控的概念及用途,质量管理是实验室为保证检测结果准确、可靠、及时所采取的所有措施和管理手段的总和。包括实验室管理的方方面面。,医学实验室质量控制是一个统计过程，用于监视与评价产生患者结果的分析过程。,此过程要求：,1,、与患者样本一起，有规律的检测控制品。,2,、将质量控制结果与统计范围做比较。,在任何情况下，都应在报告患者检测结果前评价质量控制结果,!,WESTGARD,质控规则介绍,12s,：一个质控结果超过,X2S,，为违背此规则，提示警告。,13s,：一个质控结果超过,X3S,，为违背此规则（失控），提示存在随机误差。,R4s,：同批两个质控结果之差值超过,4S,，即一个质控结果超过,X,2S,，另一质控结果超过,X,2S,，表示存在随机误差。,22s,：两个连续质控结果同时超过,X,2S,或,X,2S,，为违背此规则（失控），表示存在系统误差。,41s,：一个质控物连续,4,次测定结果均超过,X,1S,或,X,1S,，为违背此规则（失控），表示存在系统误差。,10X:,一个质控物连续,10,次测定结果均在,X,的同一侧（系统误差）。,20,12s,质控规则,+3s,+2s,+1s,-3s,-2s,-1s,平均数,1,2,5,4,3,6,7,8,9,10,12s,规则,违背,当质控血清中的测定值处于,2s,3s,界限内，为“警报”信号。,21,13s,质控规则,+3s,+2s,+1s,-3s,-2s,-1s,平均数,1,2,5,4,3,6,7,8,9,10,13s,规则,违背,当质控血清中的测定值超过,3s,界限，为“失控”。,提示存在随机误差。,22,22s,质控规则,+3s,+2s,+1s,-3s,-2s,-1s,平均数,1,2,5,4,3,6,7,8,9,10,22s,规则,违背,同批两个质控品结果同方向超出,2s,限 值，或,同一质控品连续两次质控结果超出,2s,限值为,“失控”，多由系统误差造成。,23,R4s,质控规则,+3s,+2s,+1s,-3s,-2s,-1s,平均数,1,2,5,4,3,6,7,8,9,10,R4s,规则,违背,同一批中二个质控结果之差超出,4s,范围，其中一个,超出,2s,限值，另一个超出,2s,限值，为“失控”，,属随机误差过大。,24,41s,质控规则,+3s,+2s,+1s,-3s,-2s,-1s,平均数,1,2,5,4,3,6,7,8,9,10,41s,规则,违背,25,10 x,质控规则,+3s,+2s,+1s,-3s,-2s,-1s,平均数,1,2,5,4,3,6,7,8,9,10,10 x,规则,违背,确定质量目标,质量目标是实验室选用的质控方法所需达到的目标，质量目标可用总允许误差,(TEa),的形式表示,目前中国尚未确立各项目的总允许误差，可参考美国和欧洲的建议。,质控物的选择,人基质,无传染性,添加剂和抑菌剂尽可能少,瓶间,CV%,：酶类应小于,2%,，其它应小于,1%,冻干品复溶后稳定，,2,8,时不少于,24,小时，,20,时不少于,20,天；某些不稳定成分（如,BIL,，,ALP,等）在复溶后,4,小时的变异应小于,2%,有效期至少一年以上,合理的成本,质控水平,至少两个水平或更多水平,最好是医学决定水平、在可测定范围上下限的质控品,所有水平应在线性检测范围内,质控频率,中国卫生部,临床实验室定量测定室内质量控制指南,：在每一个分析批长度内至少对质控品作一次检测。,CLSI,：在每个用户定义的分析批长度中至少检测一次质控品，质控品的浓度必须覆盖医学决定水平。,美国,CAP,：定量项目必须每天检测,2,个不同水品的质控品，定性项目必须每天检测,1,个阳性和,1,个阴性质控品。,澳洲,NATA,：质控品必须覆盖整个分析浓度，对于适用的测试，必须检测低,/,正常,/,高、正常,/,异常、阳性,/,阴性、反应,/,无反应质控品。,推荐每个批次做质控，通常为,8,个小时一批次。,任何一次质控失控都应认为其与上一次质控测定时期内的所有结果都有问题，应重新评估，必要时重测。,规则选择,常用规则：,WESTGARD,多规则,个性化规则,质控限,靶值设定：至少测定,20,批，剔除明显离群值，计算均值及,SD,，作为暂定靶值及,SD,。,一个月结束后将所有测定结果（剔除明显离群值）与之前,20,次统计计算新靶值与,SD,，作为下一个月的靶值及,SD,。,重复,3,5,个月，确定常用靶值。,更换质控物时，应做平行试验,新批号质控品均值的建立,新批号质控品的每个项目都应和现用的质控品作平行检测，最好是在不同天内至少作,20,瓶的检测。若无法从,20,天内得到,20,个数值，至少在,5,天内，每天作不少于,4,次重复检测来获得。,平行检测：用现用质控品的数据进行质控分析；新批号质控品的数据用于计算新均值，为新批号质控品用于质控分析做准备,20,瓶：规定瓶数是为了尽量减少质控品瓶间差（产品本身或复溶过程中的人为因素所致）对均值计算的影响；通常认为至少不得少于,3,瓶,20,天：规定天数是为了尽量减少分析系统的日间波动对均值计算的影响,至少,5,天和每天至少,4,次：通过此种方式获得至少,20,个质控数据，此为计算新批号质控品均值的最低要求,平行实验,失控处理流程,重新测定,重新复溶测定,新开另一批号质控测定,更换试剂,重新校准,检查仪器各部分性能是否完好，包括光路，水路、电路等，重新保养后重测,联系技术支持,真失控,/,假失控,真失控,外来的可归因误差导致的失控,系统误差：,22S,，,41S,，,10X,，,13S,随机误差：,R4S,，,13S,可以找到导致该误差的原因,质控结果不计入统计数据,拒绝本检测批的数据,排除导致这一误差的根源,重新检测质控品，结果在控,重新检测患者样本并报告结果,假失控,固有的不可归因误差导致的失控,随机误差：,R4S,，,13S,不能找到导致该误差的原因,重新检测质控品，结果在控,质控结果计入统计数据,接受本检测批的数据，报告结果,正确的安装与合适的环境,生化分析仪需要有,SFDA,的批准或注册文件,安装空间足够大，保证仪器正常运转及保养维修要求,地面承重能力好，避免振动,充分考虑样本前处理与生化仪的衔接,避免化学腐蚀物质、电磁波、灰尘和烟雾,配备空调，保证环境温度在,15,30,之间,湿度符合仪器要求,UPS,UPS,：当正常交流供电中断时，将蓄电池输出的直流变换成交流持续供电的电源设备。不同生化分析仪要配备质量较高的并相匹配的,UPS,。,在电源中断和通电等情况下保证仪器的电源供应。避免仪器损坏、试剂浪费等情况。,稳定电压的作用。,静电对生化分析仪的影响,轻则电讯号波动,严重致仪器元器件,仪器要接地良好,在维修和更换设备元件时,把身体的某一部分用导线与接地装置相连或带上防静电手链妥善接地,水质分级,一级,二级,三级,PH,范围,(25),-,-,5.0-7.5,电导率,(25),，,mS/m,0.01,0.10,0.50,比电阻,(25),，,M,cm,10,1,0.2,可氧化物质，,mg/L,-,0.08,0.40,吸光度,(254nm,1cm,光程,),0.001,0.1,-,蒸发残渣,(1052),，,mg/L,-,1.0,2.0,可溶性硅,(SiO2)mg/L,0.01,0.02,-,水质对生化检测的影响,生化分析仪的所有用水应是符合仪器说明书要求的纯水，应给分析仪配备专门的纯水处理系统，该系统应该具有足够的纯水处理能力，因为分析仪管道清洗、反应杯的清洗、样本的预稀释，均需要大量的纯水。同时，经过处理后的纯水应符合使用要求。一般生化检验最低要求为二级水。,水质将直接影响结果的准确性，尤其是有电解质分析模块的分析仪和需做钙、镁、磷等无机离子测定。,纯水制备过程,自来水 粗滤滤芯：过滤原水中的泥沙等大的颗粒物 活性炭滤芯：吸附去除水中的绝大部分