免疫组化标记物临床意义

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,免疫组化标记物临床意义,免疫组织化学技术,基本原理,抗原抗体反应,，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。,显色剂 抗体 抗原,为什么要做该检查？,检查目的,1、确定细胞类型,2、辨认细胞产物,3、了解分化程度,4、鉴定病变性质,5、发现微小转移灶,6、探讨肿瘤起源或分化表型,7、确定肿瘤分期,8、指导治疗和预后,9、辅助疾病诊断和分类,10、寻找感染病因,大肠癌套餐,(,CEA,)癌胚抗原,P53,蛋白,nm23,转移抑制基因,Ki-,67细胞增殖相关核抗原,MRP,多药耐药相关蛋白,P53、Ki-67和nm23的表达与大肠癌的侵袭转移和预后密切相关；CEA可能是大肠癌的侵袭转移的促进因素；MRP所引起的耐药机制是一个相对独立的机制。CEA，P53，nm23，Ki-67可作为判断大肠癌恶性程度、侵袭转移以及预后的指标，分析他们的表达情况可以作为临床选择更合理的治疗方案提供可靠的依据。,CEA,CEA是大肠癌分泌的一组酸性糖蛋白，作为抗原可引起患者的免疫反应。广泛存在于各种上皮性肿瘤，尤其是各种腺癌。一般认为，大肠癌分化程度越低，CEA阳性表达率越高。,上皮组织,被覆在机体体表，或衬于机体内中空器官的腔面，以及体腔腔面。,肿瘤的命名：良性肿瘤一般称为瘤，来源于上皮组织的恶性肿瘤称为癌，来源于间叶组织的恶性肿瘤为肉瘤，既有癌又有肉瘤者称为癌肉瘤。,CEA,阳性表达的,提示,大肠癌，阳性强度越高，说明癌的分化程度越低，浸润性强，转移快。例如腺瘤为阳性（+），早期癌变就变成（+）,P53蛋白,P53基因可分为野生型和突变型，野生型是抑癌基因，可以抑制肿瘤的增殖，但突变型则起反作用。,免疫组化所检测的是突变型基因所表达的蛋白，即p53蛋白,那么p53阳性的意义是什么？,免疫组化检测的P53蛋白是一种肿瘤的促进因子，不但没有起到抑制肿瘤的作用，反而会促进肿瘤的生长，因此其阳性率越高，预后越差。,nm23,抗转移基因，其表达降低与肿瘤的高转移能力，复发相关。,nm23编码的产物具有抑制肿瘤转移的功能，nm23在分化良好的肿瘤中呈高水平表达，且nm23基因表达与淋巴结转移呈负相关,，,与无病生存期，整个生存期呈正相关，因此检测nm23基因的表达高低，可 以作为判断肿有无转移的一个重要指标.,故nm23阳性率越低，肿瘤越容易转移。,Ki-67,Ki-67是一种与细胞周期相关的一种核蛋白，主要表达于细胞增殖分裂的各个时期（G1、G2、M、S期），但是在静息的细胞（G0期）中不表达，常用于检测肿瘤细胞的生长指数（免疫组化利用计算洗脑总数中的Ki-67阳性细胞数所占比例得到Ki-67指数），反映肿瘤细胞的增殖程度。,细胞增殖相关核抗原Ki-67在多种肿瘤及癌前病变中均有异常表达，且与肿瘤的种植、浸润、转移潜能密切相关。,简言之，肿瘤长它就涨，肿瘤静它就静。,MRP,MRP属ABC转运蛋白超家族成员，MRP基因定位于16号染色体p13.1带上，由6500bp组成，编码1531个氨基酸的跨膜糖蛋白，分子量为190kD。耐药的发生与依赖ATP的谷胱甘肽S结合载体（glutathione-S-conjugate carrier）活性提高的缘故，谷胱甘肽S结合的输出载体又称为GS-X泵，它可将阴离子的共轭物排泄出细胞，并在清除外源性毒素中发挥作用。MRP能介导药物中的谷胱甘肽硫共轭物、葡萄糖醛酸甙共轭物和硫酸盐共轭物排出细胞。MRP转运的步骤可能为：GSH合成GSH与药物偶和MRP将药物泵出细胞外 MRP不但定位于血浆细胞膜，而且存在于内质网、高尔基滤泡处，提示MRP还可在细胞内隔离药物，使药物不能与靶位点结合，从而间接导致耐药。,MRP依靠ATP的作用能够把带有负电荷的化疗药物逆浓度梯度转运，使进入肿瘤细胞中的药物浓度减低，在靶细胞中达不到有效作用浓度，导致耐药。,CK,细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)主要存于上皮细胞胞浆中,是构成细胞骨架的一类中间丝状物,有多种类型,其中以细胞角蛋白19(CK19)片段CYFRA21-1(cytokeratin19frag2ments)在恶性肿瘤诊断中最为重要;细胞癌变时CK19释放增加,这与CK19的DNA基因组改变有关,CK19经蛋白酶降解或细胞凋亡后其碎片释放入血。,CK18低分子量角蛋白，主要标记各种单层上皮包括腺上皮，而复层鳞状上皮常阴性，主要用于腺癌诊断。,CK19分布于单层上皮和间皮，常用于腺癌诊断，肝细胞不表达，而胆管为阳性反应。,CK7 卵巢、肺和乳腺上皮常阳性，结肠、前列腺、胃肠道上皮阴性。,常用免疫组化项目,Her-2：抗凋亡，参与调节P13K/AK途径和MAPK激活途径,胞膜, +,耐药：环磷酰胺,三苯氧胺,氨甲喋呤,ERCC1：过表达使停滞在G2/M期的损伤DNA迅速恢复胞核,+,耐药：顺氯氨铂,PRM1：DNA修复的限速酶，吉西他滨的结合位点,，,胞浆，+，耐药：吉西他滨/顺铂,BRCA1：高表达使细胞修复能力增强,，,胞浆/核，+，耐药：顺铂,ER、PR：正常乳腺上皮细胞内存在ER、PR。当细胞发生癌变时，ER和PR出现部分和全部缺失。如果细胞仍保留ER和（或）PR，则该乳腺癌细胞的生长和增殖仍然受内分泌的调控，称为激素依赖性乳腺癌；如果ER和（或）PR缺失，则该乳腺癌细胞的生长和增殖不再受内分泌的调控，称为非激素依赖性乳腺癌。,