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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第八章细菌和噬菌体的遗传重组,第一节 基因和产物的符号,细菌:,表型 野生型,Gal,，,突变型,Gal,或,Gal,；,基因型 野生型,gal,突变型,gal,或,gal,酵母,:,啤酒酵母 基因:,GAL4,CDC28,蛋白质:,GAL4,CDC28,非洲粟酒酵母 基因:,gal4,cdc2,蛋白质:,Gal4,Cdc2,果蝇,:,以1-4个字母表示。,基因:,white,(,w,),tailless,(,tll,),hedgehog,(,hh,);,蛋白:,White,Tailless,Hedgehog,植物,:,没有惯用法，大多数用1-3个小写字母表示。,Arabidopsis,基因用果蝇的方法命名但用大写字母，,如 基因,AGAMOUS(,AG,)，,蛋白,AGAMOUS,。,脊椎动物,:,一般以1-4个小写字母表示其基因功能。,例如，基因,sey,myc,蛋白,Sey,Myc,人类,:,方法如脊椎动物但需大写。,例如基因,MYC,、,SRY,，,蛋白,MYC、ENO1。,基因产物的命名无统一的规定，现在一般都用正体,全部大写，或第一个字母大写，如,Gal,或,GAL,。,第二节细菌转化,在细菌中遗传物质有三种转移的形式:,转化,（,transformation）,接合,（,conjugation）,转导,（,transduction,）,共同特点是：,（1）单方向转移；,（2）产生部分二倍体（,partial diploid）；,（3）,基因只有整合到环状染色体上才能稳定,地遗传,。,自然转化,（,natural transformation）,在自然转化中细菌可以自由地吸收,DNA，,通过它来进行遗传转化；枯,草杆菌中的转化属于自然转化,。,工程转化,（,engineered transformation）,在这种转化中，细菌发生改变使得它,们能摄入并转化外源,DNA。,E.,coli,转,化就属于工程转化。,接合,是,DNA,从细胞到细胞直接转移。,转化,细胞从周围介质中吸收裸露的,DNA,。,转染,对裸露的病毒基因组,DNA/RNA,的吸收,。,（,在,动物,细胞中，从周围介质中吸收任何裸,露,DNA,都称为,转染,。在,酵母,和,植物,细胞中,导入裸露的,DNA,可以称为,转染,或,转化,),转导,通过病毒颗粒介导将染色体或质粒,DNA,转移到细胞中。,普遍性转导,:,宿主,DNA,片断,可能取代病毒基因组被包装在噬菌粒中,(1)载体为,P1,P22,噬菌体;(2)经错误包,装宿,主,DNA,片断和,同源重组；(3)转移任何,片断,。,特异性转导,:,宿主,DNA,共价地加入到病毒基因组中,(1)载体为,噬菌体;(2)经特异位点整合或同源重组;(3)转移特定的基因。,第三节细菌的接合,一、,E.,coli,接合的发现,1946年,莱德伯格,(,Lederberg,J.),和,塔特姆,(,Tatum),发现,细菌的,接合,（,conjugation）。,细菌接合是指通过细胞的,直接,接触，遗传信息从供体,单向转移,到受体的过程。,两大难题：,a,b,a,b,a,b,(,10,-7,）,和回复突变频率相近，难以区别。,(2),E.,coli,杂交产生重组频率为10,7,，,筛查重组子的工作量太大。,解决的方法：,(1)使用,多重突变型,（,multiple,auxotrophs,）,(2),是采用基本培养基和选择培养基,细菌,同宗配合,（,homothallic,）,A,品系：,met,bio,thi,leu,thr,（,thi,：,硫胺素,B1）,B,品系：,met,bio,thi,leu,thr,A,A+B,B,基本培,养基,met,bio,thi,leu,thr,质疑,：,细菌的杂交实验获得的重组子可能是转化的结果。,培养基中含有某些代谢产物，混合后这些产物互相补充了对方的不足而得以在基本培养基上生长。,二、单向转移与,F,因子,1952年 海斯（,W.Hayes）,大剂量链霉素,A,品系 无影响,大剂量链霉素,B,品系,阻止了重组,提出,异宗配合,（,heterothallic,）,意外的发现：,三.致育因子（,fertility factor，F）,（1）,有,F,因子的细菌称为,F,，,细菌增殖时可把,F,因子传递给后代,。,（2）没有,F,因子的细菌称为,F,，F,细菌经,吖,啶,橙处理而丢失，成为,F,。F,因子一经丢失，,细胞中便不再出现；,（3）,F,可以和,F,杂交，而不能和,F,杂交；,（4）,F,F,的杂交后代皆为,F,，,而且可以10,7,频率获得重组体后代。,转移区,（,transfer region）,长33,Kb,四.高频重组(,High,frequence,recombination,Hfr,),1951年,Cavalli,发现,用氮芥处理,F,然后将处理后的,FF,10,4,1954,年,Hayes,也分离了,Hfr,品系，发现：,(1),Hfr,使重组能力增加，但无传递,F,因子的能力，,Hfr,F,F,(2),Hfr,只能将供体基因组的一部分传给受体，,Hayes,的解释是,Hfr,的,F,因子发生了永久性改变。,F,F,重组,子,此称为,Hfr,五.,Hfr,和,F,因子的关系,1,.,F,因子的结构,(1)重组区；,(2,),复制区:2个复制起点,；,(3),接合转移区,F,因子(,F-factor),转 重,移,IS3,组,IS3,区,区,O,IS2,P,OriT OriV,复,区,制,2.结合的过程：,(1,),F,纤毛(,F,pili,),的合成,由纤毛素(,pilin,),蛋白构成，接合管仅使细胞初步接触；,(2)转移启动 转移起始区(,transfer origin,Ori,T),滚环复制；,(3,),单链转移，复制，或重组。,3.,F,因子的整合特点,F,有多个整合位点，主要在,IS,3,处；,E.,cili,染色体上有20个以上的整合位点；,双向整合，,整合通过,a.IS,3,等同源重组；,b.,转座,
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