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,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,检测生物组织中的,糖类、脂肪和蛋白质,一,.,实验原理:,某些,化学试剂,能够使生物组织中的有关,有机化合物,产生特定的,颜色反应,。如:,.,还原性糖的鉴定:,还原性糖,+,.,脂肪的鉴定:,脂肪,+,脂肪,+,.,蛋白质的鉴定:,蛋白质,+,淀粉,+,斐林试剂,砖红色沉淀,苏丹,橘黄色,苏丹,红色,双缩脲试剂,紫色,碘,蓝色,二,.,目的要求:,尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,1,、还原糖的检测和观察:,选材,应该选择含,量高,.,颜色为,的植物组织,,以,苹果,.,梨,为最好。,糖,白色或近于白色,制备组织样液:,制浆 过滤 取液,三,.,实验过程,:,用一层纱布,可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,,说明植物组织样液中含有还原,糖,。,注入,2mL,苹果组织样液,注入,1mL,刚配制好的斐林试剂,水浴加热约,2min,呈色反应,变成,砖红色,50-65,0,C,的温水,结论:,甲乙液等量混匀,振荡、混合摇匀,呈现蓝色,还原糖有,。,试剂:,.,(甲液:,0.1g/ml,的,乙液:,0.05g/ml,的,.,),甲乙液必须,后再加入样 液中,,。,必须,。,葡萄糖,果糖,麦芽糖,用水浴加热,斐林试剂,NaOH,CuSO,4,等量混合均匀,现配现用,注意事项:,颜色变化:,浅蓝色,棕色,砖红色,2,、脂肪的检测和观察:,圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。,方法一:,待测组织样液,+,苏丹,染液,橘黄色,取材:,花生种子,(,浸泡,3,4h,),将子叶削成薄片,方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察,子叶细胞的着色情况。,制片,取最理想的薄片,在薄片上滴苏丹,染液(,2,3min,),去浮色(用,50,酒精), 制成临时装片,观察,低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,,然后用高倍镜观察,结论:,注意事项:,切片要薄,,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。,酒精的作用是:,。,需,使用显微镜观察, 使用不同的染色剂染色时间不同,颜色变化:,。,洗去浮色,橘黄色或红色,3,、蛋白质的检测和观察:,选材,应该选择含,丰富 的,豆浆,或,鸡蛋清,溶液。(避免材料自身的颜色对,实验变化颜色的掩盖),蛋白质,黄豆浆滤液或蛋清稀释液,制备组织样液,呈色反应,组织样液,2mL,双缩脲试剂,A,液,1mL,双缩脲试剂,B,液,4,滴,摇匀后变成紫色,结论:,说明组织样液中存在蛋白质。,(,3,)注意事项:,试剂:,(,A,液:,0.1g/ml,的,;,B,液:,0.01g/ml,的,),先加,,再加,。,B,液要求量适中,否则,多余,的,B,液,将会,与,A,液,发生反应生,成,Cu,(,OH,),2,显色而遮盖原有的颜色,。,鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比,双缩脲试剂,A,液,1ml,B,液,4,滴,NaOH,CuSO4,蛋白质的检测结果,用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免,实验后粘住试管壁,不易洗刷,斐林试剂与双缩脲试剂的比较:,A,液,:0.1g/mLNaOH,B,液,:,0.01,g/mLCuSO,4,甲液,:0.1g/mLNaOH,乙液,:,0.05,g/mLCuSO,4,紫色物质生成,砖红色沉淀,先加,A,液,,,再加,B,液,,,不需加热,甲液与乙液,先混再用,,且,现配现用,,需,加热,蛋白质,还原性糖,试剂组成,检验结果,试剂用法,检测对象,双缩脲试剂,斐林试剂,斐林试剂与双缩脲试剂的不同点,斐林试剂与双缩脲试剂都由,NaOH,和,CuSO4,组成,但二者有如下,3,点不同:,a.,溶液浓度不同、斐林试剂中,NaOH,的浓度为,0.1g,mL,,,CuSO4,的浓度为,0.05g,mL,;双缩脲试剂中,NaOH,的浓度为,0.1g,mL,,,CuSO4,的浓度为,0.01g,mL,。,b.,使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的,Cu(OH)2,溶液;双缩脲试剂实质是在碱性环境下的,Cu2+,。,c.,使用方法不同。斐林试剂使用时,先把,NaOH,溶液和,CuSO4,溶液混合,而后立即使用。双缩脲试剂使用时,先加入,NaOH,溶液,然后再加入,CuSO4,溶液。,4,、淀粉的检测和观察:,取材:,马铃薯匀浆,检测,组织样液,2mL,碘液,2,滴,结论:,说明组织样液中存在淀粉。,注意:,常用材料:马铃薯,试剂:,。颜色变化:,。,碘液,变蓝,摇匀后变成蓝色,1.,在下列四支试管中分别加入一些物质,甲试管,:,豆浆,;,乙试管,:,氨基酸溶液,;,丙试管,:,牛奶和蛋白酶,;,丁试管,:,人血液中的红细胞和蒸馏水,.,上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是,( ),A.,甲、丁,B.,甲、乙、丁,C.,甲、乙、丙,D.,甲、丙,对应训练,D,2.,下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定,.,脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴,C.,鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂,A,液与,B,液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现配现用,( ),3,.,甘薯和马铃薯都富含淀粉,但甘薯吃起来比马,铃薯甜,为探究其原因,某兴趣小组以甘薯和,马铃薯块茎为材料,在不同温度、其他条件相,同的情况下处理,30min,后,测定还原糖含量,结,果表明马铃薯不含还原糖,甘薯的还原糖含量,见下表:,处理温度(),0,10,20,30,40,甘薯还原糖含量(,mg/g,),22.1,23.3,25.8,37.6,40.5,处理温度(),50,60,70,80,90,甘薯还原糖含量(,mg/g,),47.4,54.7,68.9,45.3,28.6,(,1,)由表可见,温度为,70,时甘薯还原糖含量最高,这是因为,_ _,。,(,2,)马铃薯不含还原糖的原因是,_,。(,3,)为了确认马铃薯不含还原糖的原因,请完成以下实验:实验原理:,_,;,_,。,备选材料与用具:甘薯提取液(去淀粉和还原糖,马铃薯提取液(去淀粉),二苯胺试剂,斐林试剂,双缩脲试剂,质量分数为,3%,的淀粉溶液和质量分数为,3%,的蔗糖溶液等。,还原糖的产生是酶作用的结,果,,70,时酶活性最高,不含淀粉酶,淀粉酶水解淀粉产生还原糖,还原糖与斐林试剂反应,产生砖红色沉淀,实验步骤:第一步:取,A,、,B,两支试管,在,A,管中加入甘薯提取液,,B,管中加入等量的马铃薯提取液。第二步:,70,水浴保温,5min,后,在,A,、,B,两支试管中各加入,_,第三步:,70,水浴保温,5min,后,在,A,、,B,两支试管中再各加入,_,,第四步:,_.,实验结果:,_,等量淀粉溶液。,等量斐林试剂。,沸水浴加热,1min,2min,。,A,试管呈现砖红色,,B,试管呈现蓝色,
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