幽门螺杆菌IgG抗体分型检测系统课件43014

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Marshall,Robin Warren,（,Helicobacter Pylori; HP,）,一,美国,/,加拿大,30-40%,拉丁美洲,70-90%,西欧,30-50%,非 洲,70-90%,澳大利亚,20%,亚洲,70-80%,东欧,70-90%,世界范围内幽门螺旋杆菌感染现状,Hp,在全球的人群的感染率均很高；,其中发展中国家的感染率远超发达国家；,Hp,在亚洲人群的感染率超过,40%-80%,；,幽门螺杆菌感染亚洲现状,华东地区,-,59.36%,华南地区,-,50.08%,58.27%,-,华西地区,华北地区,-,46.84%,华中地区,-,66.26%,我国感染率超过,40%-70,%,左右；,幽门螺杆菌,中国,感染现状,人与人的直接和间接接触传播：,发达国家，,口-口传播,的可能性大；,发展中国家，则以,粪-口传播,为主；,医源性传播：,胃镜吸引阀、活检孔道及活检钳可分离出Hp；,患者胃镜检查次数越多，Hp阳性率越高；,Hp,的传播方式,H.pylori,致病机制,2,H.pylori,进,入机体,定植于胃,上皮细胞,刺激机体,释放各种,细胞因子,胃粘膜炎,症、坏死和,免疫反应,胃泌素和,生长抑素,调节失衡,胃酸分泌,异常,胃部,疾病,幽门螺杆,菌侵袭性感染进程,幽门螺杆,菌侵袭性感染进程,毒素,胃泌素,生长抑素,宿主,胃粘膜损伤,直接,免疫反应,失,衡,Hp,定值,胃酸分泌异常,Hp,致病因素,Hp,产生的,尿素酶（,Ure,）,能将尿素分解为氨和二氧化碳，氨在,Hp,周围形成“氨云”,，影响胃壁细胞表面的局部微环境，形成细胞损伤；,Hp,能够,产生,细胞毒素：,空泡,细胞毒素,（,VacA,）,细胞毒素相关基因A蛋白(Cag A),；,90%,的十二指肠溃疡和,80%,的胃溃疡都是,由,HP,引起,的，同时与胃癌的发生密切相关,，,1994,年世界卫生组织,已将,HP,定为,类致癌因子；,Hp的致病因素主要：,尿素酶,细胞毒素,鞭毛,粘附素,超氧化物歧化酶,活性氧,细胞因子,Vac A：,是对上皮细胞有害的细胞毒素，称之为空泡毒素，存在于细胞的外壁，可使上皮细胞因空泡形成而遭受破坏。,Cag A：,细胞毒素相关基因A蛋白，可影响细胞毒素的表达。 有研究证实：含Cag A单克隆抗体阳性者比阴性者，患胃癌的危险性高4倍。,Hp,的,致病,因素,细胞毒素 Cag A、Vac A被认为Hp最重要的致病因子：,Cag A,细胞密度,胃上皮损伤,IL-8,分泌,炎症,改变胃酸分泌,诱变剂,更快的发展成萎缩性胃炎,胃溃疡发生的危险性,胃癌发生的危险性,胃黏膜相关性淋巴组织（,MALT,）淋巴瘤：,早期根除,HP,，胃,MALT,淋巴瘤可以缩小或消失；,根除Hp 已成为Hp 阳性低级别胃MALT 淋巴瘤的一线治疗方法。,胃癌：,世界卫生组织已将,HP,列为,类致癌因子；,HP,感染率与胃癌发生率明显正相关；,HP,主要定植部位与胃癌好发部位一致；,慢性胃炎：,浅表性胃炎；弥漫性胃窦炎；多灶性萎缩性胃炎；,HP,持续感染，浅表性胃炎可发展为萎缩性胃炎、肠上皮化生和非典型增生（上皮内瘤变），上述病变都属于癌前病变；,消化性溃疡：,HP,的发现是消化性溃疡在发病机制及病因学的革命；,“没有胃酸就没有溃疡”；,“没有,HP,就没有溃疡和溃疡复发”；,HP,与消化系统疾病,心脑血管疾病：,冠状动脉硬化性心脏病（,CHD,）；缺血性心脏病；,脑血管疾病，中风等；,偏头痛和原发雷诺现象；,血液系统疾病：,缺铁性贫血；,特发性血小板减少性紫癜；,白血病；,代谢性疾病,肥胖、糖尿病等；,幽门螺杆菌与胃外疾病,自身免疫性疾病,类风湿性关节炎,、自身免疫性甲状腺炎；干燥综合征等；,呼吸系统疾病,慢性阻塞性肺疾病（,COPD,）；支气管扩张；,精神性,疾病,自闭症、抑郁症等；,皮肤病,慢性荨麻疹；食物过敏；酒槽鼻；,Maastricht-,国际共识,中提出,HP,感染与不明原因缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜症、维生素,B12,缺乏等等相关性；,近几年，关于,HP,感染,与,其他疾病的发生，也,受,了很多重视，如肝胆疾病、脑血管病、皮肤病等等。,H.pylori,根除治疗及存在问题,3,幽门螺杆菌胃炎是一种感染性疾病,传染病,幽门螺杆菌胃炎无论有无症状、伴或不伴有消化性溃疡和胃癌，均应该定义为一种感染性疾病,根除幽门螺杆菌治疗是改善消化不良症状的一线治疗方案,所有感染幽门螺杆菌的个体都需要接受根除治疗,17,三联疗法,四联疗法,序贯疗法,复合疗法,治疗策略,PPIs +,两种抗生素,PPIs +,两种抗生素,+,铋剂,PPIs +,两种抗生素,7,天,PPIs +,另外两种抗生素,14,天,四联疗法为基础,中药辅助治疗,微生物辅助治疗,抗生素,+PPIs,为基础的治疗策略,根除幽门螺杆菌中的临床问题,随着Hp 耐药率的上升，标准三联疗法( PPI + 克拉霉素+ 阿莫西林或PPI + 克拉霉素+ 甲硝唑) 的根除率已低于或远,低于,80%,。,推荐用于根除治疗中抗菌药物，甲硝唑耐药率,60% 70%,，,克拉霉素达,20% 38%,，,左氧氟沙星达,30% 38%,，耐药显著影响根除率;,此外抗生素使用的副作用，不良反应发生率高，进而导致患者依从性差；,抗生素的耐药,抗生素的副作用,抗生素,的滥用,根治,HP,治疗,方案的,难点,根除幽门螺杆菌中难点,“发现即根除,”,策略是否适合我国？,高,Hp,感染率：,Hp,感染率超过,50%,，引起胃癌患者只占,1%,？,Hp,都是有害菌吗？过分根除是否会引发菌群紊乱？,21,临床根除幽门螺杆菌的思考,H.pylori,分型检测的重要意义,4,精准治疗,+,个体化治疗,应对,措施,解决问题的办法,医生：有明确适应症再使用抗生素,；,精准诊断：,查明致病病原体；,辨别有效抗生素；,精准治疗：,制定个体化精准治疗方案；,病情跟踪；,抗生素疗效跟踪；,患者,：正确选择抗生素药物和治疗方式,；,普及,合理使用抗生素知识,；,精准诊断,准确检测,/,诊断幽门螺杆菌的重要性,幽门螺杆菌的研究是胃肠道领域最热门的研究课题：,1999,年，第一次全国幽门螺杆菌专家共识会在海南召开；“,1999,海南共识”,2000,年，“中华医学会消化疾病分会幽门螺杆菌学组 ”正式成立；,香港大学玛丽医院林兆鑫教授指出：“越来越广泛的检测和治疗,HP,感染的过程中，出现的第二个问题就是耐药性和感染复发率”；,中华医学会消化学会、全国幽门螺杆菌学组副,组长胡伏莲教授,在“中国幽门螺杆菌研究现状”中指出：“,HP,耐药性是,HP,根除失败的主要原因”；,幽门,螺杆菌的清除中外要有别，中国的清除计划要依据中国国情来建立，不能盲目参照国外方案！,在中国，幽门螺旋杆菌的分型性剖析非常重要。,幽门螺杆菌共识,H.pylori 的毒力因子与分型,H.pylori,菌株的基因型多态性与其致病性有密切的关系，其中最主要的是空泡毒素A(vacA)和细胞毒相关基因(cagA)蛋白。,H.pylori 的检测分型,根据是否表达VacA、CagA抗体，将H.pylori 分为:,型(VacA,/,CagA,抗体,阳性),型（VacA、CagA 抗体阴性)。,Hp,分离细菌,致,病,不,致,病,型,有毒株,型,无毒株,检测,CagA,、,VacA,有无,H.pylori 的毒力分型与致病性的关系,国内外研究表明，,95,的十二指肠溃疡、,75,的胃溃疡病人、,80,以上的胃癌病人感染的是,CagA,阳性,I,型,H.pylori,。,幽门螺杆菌,IgG,抗体分型检测系统,泰州欣康基因数码科技有限公司,5,2016,跨越,获,幽门螺旋杆菌三类医疗器械注册证，,6,项产品专利；,泰州欣康基因数码科技有限公司坐落于中国国家级医药高新科技园区江苏泰州中国医药城，成立于 2012年2月，,是一家集研发、生产、销售和服务于一体的生物高新科技创新企业。,公司所生产的组合式生物芯片获得了行业最高级别的知识产权奖项,中国专利金奖和联合国世界知识产权组织金奖。,2012坚持,获,斑点试验芯室一类注册证,、,医疗器械生产许可证,；,2013,发展,检测仪器获得医疗器械二类注册证、一项产品专利；,2014,创新,获得三项产品专利；,2015,认证,取得,ISO13485,体系认证证书，,4,个一类注册证，,5,项产品专利；,公司介绍,2012成立,国内首批进行生物芯片研发、生产及销售的高新技术企业,；,系统构成,幽门螺杆,菌检测芯片,蛋白生物芯片,阅读,仪,数据报告,所生产的组合式生物芯片获得了行业最高级别的知识产权奖项,中国专利金奖和联合国世界知识产权组织金奖，同时取得两项实用新型专利。,产品质量体系认证,研发技术团队,闫小君,原中国人民解放军第四军医大学教授，博士生导师。是国内最早从事基因诊断技术研发和产业化的科学家之一，研发的组合式生物芯片制备技术，,获2005年国家发明专利金奖及世界知识产权组织金奖，这是迄今我国生物芯片研究领域所获得的级别最高的知识产权奖项。,任泰州欣康基因数码科技公司首席科学家。,采用微量点样等方法，将大量生物大分,子有,序地固化,于硝,酸纤维膜表,面；,生物大分子组,成密集二维分子排,列；,生物大分子与待测物结构形成抗体复合物，并显色；,电,荷偶联摄影像机（,CCD,）对杂交信号的强度进行快速分,析；,判断待测,样品中,靶分子的数量,；,芯片原理,尿素酶（,Ure,）,细胞毒素相关蛋白A,(CagA),细胞毒素相关基因A蛋白，可影响细胞毒素的表达，诱导宿主胃粘膜局部产生多种细胞因子。 血清中检测到,Gag A,抗体是,Hp,感染的一个高度特异性标志，在慢性胃炎、胃和十二指肠溃疡、胃癌中，Cag A抗体的阳性率分别可以高达,67.54%,、,73.17%,、,9.00%,、,53.33%,。,VacA因其可致细胞空泡变性而得名，与消化性溃疡密切相关，从消化性溃疡患者分离到VacA阳性菌株的频率比慢性胃炎高。,细胞空泡毒素A蛋白（VacA）,Hp蛋白芯片,筛查项目,尿素酶是Hp主要抗原之一，也是Hp感染后诱导胃粘膜炎症反应的重要诱发因子之一，所有的野生型的Hp都产生尿素酶，Hp是人胃内产生高活性尿素酶的唯一菌株，可以引起Hp感染患者的血清中抗Hp IgG和IgA的滴度显著升高，因此可以确定是否存在Hp感染，并可以判定感染严重程度和抗Hp疗效。,指导临床合理用药,分型,意义,CagA,VacA,Ure,临床意义,型,有感染,有毒性,+,+,+,重度感染致病菌，建议进行根除治疗,+,+,-,重度感染致病菌，建议进行根除治疗,+,-,+,感染致病菌，建议根据临床症状用药进行根除治疗,-,+,-,感染致病菌，建议根据临床症状用药进行根除治疗,+,-,-,感染致病菌，建议根据临床症状用药进行根除治疗,-,+,-,感染致病菌，建议根据临床症状用药进行根除治疗,型,有感染,无毒性,-,-,+,低,毒力株感染，建议进行密切观察，根据临床症状及患者个人意愿进行选择性治疗,阴性,无感染,无毒性,-,-,-,无感染人群,分型检测，细分患者类型，服务于临床精准治疗和个体化治疗；指导临床合理用药，打击抗生素滥用，建立行业金标准；,Hp,抗体分型检测的重要意义,1,分型检测：,实现联合检测幽门螺杆菌,CagA、VacA、Ure 3种毒力因子的特异性抗原检测，,将感染Hp患者细分为型和型,，精准检测，指导临床合理用药，打击抗生素滥用，建立行业金标准,；,2,实现对胃内相关疾病的诊断：,对浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡及胃癌诊治有较高的参考价值；,3,指导胃外相关疾病的早期诊断：,对胃外相关疾病如血液系统疾病、心脑血管疾病、呼吸道疾病等、自身免疫系统疾病的早期发现，早期治疗提供有价值的临床数据。,方法,分类,侵入法,（依赖内镜活检法）,组织细胞学方法,光镜法,电镜法,微生物学方法,直接镜检,快速尿素酶实验,分离培养,非侵入法,（非内镜依赖法）,同位素示踪方法,13,C,、,14,C,呼气试验,15,N-,尿素排出试验,血清学方法,抗体检测,分子生物学方法,PCR,临床常用HP检测方法比较,公司名称,检测项目,检测方法,检测时间,检测样本,检测优势,泰州欣康基因数码科技有限公司,尿素酶（,Ure,）,血清学方法蛋白芯片法,5-10min,血清,检测快速；,空泡毒素（,VacA,）,分型检测；,细胞毒素（,CagA,）,大数据跟踪；,深圳伯劳特生物制品有限公司,尿素酶,A,型（,UreA,）,血清学方法免疫印迹法,2h,血清,不需仪器；,尿素酶,B,型（,UreB,）,空泡毒素（,VacA,）,分型检测；,细胞毒素（,CagA,）,安倍医疗器械贸易（上海）有限公司,尿素酶（,Ure,）,血清学方法免疫印迹法,15min,血清,/,血浆,/,全血,无需设备；,检测现症感染；,可全血检测；,Exalenz Bioscience Ltd.,尿素酶（,Ure,）,13,C/,14,C,尿素呼气试验,10,15min,吹气,只需,1h,空腹时间；,鼻导管自然呼气收集；,深圳市中核海得威生物科技有限公司,尿素酶（,Ure,）,30min,吹气,安徽养和医疗器械设备有限公司,尿素酶（,Ure,）,30min,吹气,华亘控股广州华友名康光电科技有限公司,尿素酶（,Ure,）,30min,吹气,华亘控股广州华亘琅博药业有限公司,HP,多肽抗原,粪便抗原法胶体金法,10-20min,粪便,覆盖所有亚型；,检测现症感染；,幽门螺杆菌非侵入性诊断方法,蛋白芯片技术的发展进程,幽门螺杆菌发现,慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、,MALT,淋巴瘤相关,根除和广泛治疗,治疗规范化不够，抗生素滥用，耐药性上升，根除率下降,流行病学调查,仅少数,H.pylori,感染患者发展为明显临床疾病，需对致病菌加以识别、筛选，并给予规范化治疗及临床随访,临床困惑,如何能够快速、简便、无创、高通量的筛选出需要治疗的病人，成为临床医生的困惑和难题,蛋白芯片技术,目前应用的多种方法难以满足上述需求，蛋白芯片技术为解决这一难题带来希望,H.pylori,分型检测,蛋白芯片满足临床精准治疗的需求，指导临床合理用药具有巨大意义,幽门螺杆菌,IgG,抗体分型检测系统,临床研究,6,临床研究（一）,蛋白芯片检测,Hp,抗体与,Bolt,比较,研究单位：吉林省第三人民医院,辽宁省第三人民医院,辽宁中医院大学附属第三医院,待考核试剂,参比试剂,合计,阳性（,+,）,阴性（,-,）,阳性（,+,）,373,12,385,阴性,（,-,）,8,657,665,合计,381,669,1050,1050例样本检测结果,结果：阳性符合率：,97.90%,；阴性符合率：,98.21%,；总体符合率：,98.1%,；,欣康生产的,IgG,抗体检测试剂盒（蛋白芯片）与深圳伯劳特生物制品有限公司的抗体分型试剂盒（免疫印迹法）检测结果一致性较好。,适 用 人 群,适用人群,1,、普通,人群体检 ：,1994,年,世界卫生组织（,WHO,）已将,HP,列为,类致癌因子，我国的,HP,感染率达到,40%-60%,。,2,、消化系统疾病患者：,慢性胃炎、十二指肠和胃溃疡等患者，应及早进行针对,H.pylori,病菌进行筛查。,3,、儿童和青少年人群：,研究表明儿童、青少年携带,H.pylori,的比例很高，多为口口相传或饮食卫生所导致，因此儿童和青少年的早期筛查尤为重要,。,4,、饮食不规律者：,长期熬夜加班、饮酒吸烟、饮食不规律者、需定期进行,H.pylori,病菌进行筛查。,5,、接受治疗后患者：,曾患有胃炎、胃溃疡、胃癌等疾病患者，定期进行检查。,实现,联合检测幽门螺杆菌,CagA,、,VacA,、,UreB,等,3,种毒力因子的特异性抗体,；,系统化、数据化可以实现,对,胃内相关,疾病的诊断、治疗,跟踪；,在健康体检中设为常规,筛查,项目,，扩大普查对象；,建立大数据平台，形成大健康慢病管理体系；,打击抗生素滥用，建立行业金标准；,分型检测芯片,系统的特点,谢谢！,演讲完毕，谢谢观看！,