教培用血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义课件

,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义,血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义,一、血细胞各通道分析原理及散点图分析,二、散点图案例分析,一、血细胞各通道分析原理及散点图分析,一、血细胞各通道分析原理及散点图分析,血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究 参数，如直方图，,DIFF,散点图，,NRBC,散点图等。实验人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注的,进行涂片复检确认，提高工作效率，减少漏诊率。,一、血细胞各通道分析原理及散点图分析血细胞分析仪提供了大量的,DIFF,WBC/BASO,NRBC,半导体激光,荧光染色（聚次甲基,+,噁嗪 ）,主要原理,FSC,前向散射光：细胞大小,SSC,侧向散射光：复杂程度（细胞的颗粒 和细胞核等内含物的信息）,SFL,侧向荧光：核酸含量（,DNA,、,RNA),DIFF半导体激光主要原理FSC前向散射光：细胞大小,DIFF,通道分析原理,4DL(,阴离子表面活性剂）,完全溶解,RBCPLT,在,WBC,膜上打孔,溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附，使,Eo,颗粒的复杂程度增加，在,SSC,显示复杂程度是最大的。,4DS,对核酸染色,纵坐标：侧向荧光（,SFL,）,反映核酸含量,横坐标：侧向散射光（,SSC,）,反映细胞内部复杂程度,化学粘附,大分子有机酸与嗜酸 粒细胞中的碱性颗粒 发生化学粘附,嗜酸粒细胞,大分子有机酸,DIFF通道分析原理4DL(阴离子表面活性剂）完全溶解RB,RNA/DNA,荧光染色原理,成熟白细胞：高荧光特性,网织红细胞：弱荧光特性,血小板：,成熟,RBC,：,原始细胞：,幼稚细胞：,微弱荧光特性 无荧光特性 极高荧光特性 极高荧光特性,RNA/DNA荧光染色原理成熟白细胞：高荧光特性血小板：微弱,疟原虫感染的散点图（一）,DIFF散点图显示淋巴与单核之 间融合，有分类结果，但不可 信。,横坐标：侧向散射光（SSC）,散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。,灰白色散点，完全融合，不分类。,4DL(阴离子表面活性剂）,中华临床医师杂志， ,5（2）:633-635,5%的异常淋 巴细胞。,红色散点，仪器报警提示有大量 原始细胞和幼稚粒细胞。,异型淋巴细胞增高与 多种病毒感染及变态 反应有关。,WBC增多对RBC计数的干扰,5%的早幼粒细胞，单 核细胞24.,镜检：47%原始淋巴细胞，未见 异淋。,流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志CD13和CD33阳性，为髓 细胞性白血病。,大致分成两群，一群为原始细胞， 一群为幼稚粒细胞。,荧光染色,WBC,分类的优势,检测异常细胞,提供幼稚粒细胞信息（,IG,）,提供原始细胞信息（,Other,）,疟原虫感染的散点图（一）荧光染色WBC分类的优势检测异常细胞,10,SFB,溶血剂 （酸性，低渗）,溶解,RBCPLT,除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态,Baso,保持原状,纵坐标：前向散射光（,FSC,） 反映细胞大小,横坐标：侧向散射光（,SSC,）,反映细胞内部复杂程度,嗜碱,其它有 核细胞,嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液，,Baso,内的蛋白为酸性蛋白，因此在该,溶液中受到保护，而其他有核细胞则被 溶解成裸核,WBC/BASO,通道分析原理,10SFB溶血剂 （酸性，低渗）纵坐标：前向散射光（FSC,NRBC,通道分析原理,NR,溶血剂,完全溶解,RBC,，,PLT,WBC,保持原状,NRBC,溶解为裸核,NR,染液对核酸染色,纵坐标：前向散射光（,FSC,）,反映细胞大小,横坐标：侧向荧光（,SFL,）,反映核酸含量,NRBC%,=,NRBC#,/,NRBC_WBC#,NRBC通道分析原理NR溶血剂反映细胞大小横坐标：侧向荧光,出现有核红时,WBC,的修正,红系增生活跃时，外周血易见较多的,NRBC,，在,WBC,计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。,出现有核红时WBC的修正红系增生活跃时，外周血易见较多的NR,WBC,增多对,RBC,计数的干扰,RBC,：阻抗法,RBC,值含,WBC,WBC100*109/L,时，需校正红系统参数,贫血越严重，对,RBC,影响越大,WBC增多对RBC计数的干扰,血红蛋白通道,光电比色法,SLS,（十二烷基磺酸钠）：无氰无毒,血红蛋白通道光电比色法,二、散点图案例分析,二、散点图案例分析,嗜碱性粒细胞增多症,在,BASO,散点图上，嗜碱区 域出现大量散点，另外,DIFF,散点图上，中性区域,的左下方也为嗜碱区域， 也出现了大量的散点。,BASO%,：仪器,13.4%,镜检,13.5%,嗜碱性粒细胞增多症在BASO散点图上，嗜碱区 域出现大量散点,AML-M1(,例,1),不可信,DIFF,散点图显示淋巴与单核之 间融合，有分类结果，但不可 信。,IMI,散点图也提示大量原始细 胞。,镜检发现有,77.5%,的原始细胞。,细胞表面标志,CD13,和,CD33,阳 性，,CD36,阴性；为急性髓细 胞性白血病。,AML-M1(例1)不可信,AML-M2,DIFF,散点图显示白细胞完全融合 且不分类。,IMI,散点图显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。,NRBC,散点图：红色散点,镜检发现有,90%,的原始细胞、,3%,的早幼粒细胞哦、,1%,中幼粒细胞。,流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志,CD13,和,CD33,阳性，为髓 细胞性白血病。,AML-M2DIFF散点图显示白细胞完全融合 且不分类。,AML-M3,DIFF,散点图显示白细胞完全融合且不分 类。,IMI,散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒 细胞。,NRBC,散点图：红色散点,镜检发现,3%,的原始细胞，,91%,的早幼粒 细胞、,3.5%,的中幼粒细胞，,0.5%,晚幼 粒细胞。,AML-M3DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分 类。,AML-M4,DIFF,散点图，白细胞区域出现大量,灰白色散点，完全融合，不分类。 大致分成两群，一群为原始细胞， 一群为幼稚粒细胞。,IMI,散点图也显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。,AML-M4DIFF散点图，白细胞区域出现大量,血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义,除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态,IMI散点图也提示大量原始细 胞。,溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在,Baso内的蛋白为酸性蛋白，因此在该,大分子有机酸与嗜酸 粒细胞中的碱性颗粒 发生化学粘附,NRBC散点图：红色散点,疟原虫感染的散点图（一）,其他1 492份散点图基本正常。,在BASO散点图上，嗜碱区 域出现大量散点，另外,DIFF散点图显示白细胞完全融合 且不分类。,血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究 参数，如直方图，DIFF散点图， NRBC散点图等。,荧光染色WBC分类的优势,报警提示异常淋巴细胞/原始细 胞，异淋？,镜检发现59%的原始细胞，,淋巴与单核区域分界不 清，仪器提示淋巴细胞 增多/原始淋巴。,NRBC散点图：红色散点,散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。,DIFF散点图淋巴与单核 融为一体，不分类，IMI,AML-M5b,DIFF,散点图淋巴与单核 融为一体，不分类，,IMI,散点图显示大量原始细胞 和幼稚粒细胞。,镜检发现,59%,的原始细胞，,0.5%,的早幼粒细胞，单 核细胞,24.5%,。,血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义AML-M5bDIFF散,慢粒危象,DIFF,散点图,OTHER,区域出现大 量散点，中性粒细胞上方也有少 量散点，,IMI,散点图也出现大量,红色散点，仪器报警提示有大量 原始细胞和幼稚粒细胞。,NRBC,散点图：红色散点,镜检发现,38.5%,的原始细胞，幼 稚粒细胞和幼稚的单核细胞。酯 酶染色阴性或弱阳性，可被氟化 钠抑制。这是一例慢粒急单变。,慢粒危象DIFF散点图OTHER区域出现大 量散点，中性粒细,MDS,DIFF,：淋巴细胞和单核细胞,之间界限不清，提示出现原 始细胞。中性粒细胞散点向 左下方延伸到嗜碱区域。,IMI,：少量红点,NRBC,：幼红,镜检：原始：,1%,，,BASO,：,5%,，,NRBC,：,MDSDIFF：淋巴细胞和单核细胞,范*，女，,67y,。，诊 断为,MDS,伴原始细胞增多（,10%,）,DIFF,散点图淋巴与单核区域融 合，提示出现原始细胞,报警提示异常淋巴细胞,/,原始细 胞，异淋？,镜检：,47%,原始淋巴细胞，未见 异淋。血片,POX,（,-,）。,急淋变,MDS,急淋变,范*，女，67y。，诊 断为MDS伴原始细胞增多（10,急性,T,淋巴细胞白血病,DIFF,散点图淋巴与单核完 全融合，,IMI,散点图几乎没,有红色散点，仪器提示异 常淋巴,/,原始淋巴细胞。,镜检发现有,59.5%,的异常淋 巴细胞。,本例被诊为,ATL,。,急性T淋巴细胞白血病DIFF散点图淋巴与单核完 全融合，IM,CLL,淋巴与单核区域分界不 清，仪器提示淋巴细胞 增多,/,原始淋巴。,镜检：,L,：,%,，幼淋,2.0%,CLL淋巴与单核区域分界不 清，仪器提示淋巴细胞 增多/原始,异型淋巴细胞,异型淋巴细胞增高与 多种病毒感染及变态 反应有关。,常见有：传染性单核 细胞增多症、病毒性 肺炎、病毒性肝炎、 肾综合征出血热等病 毒性感染。,特点：胞体增大，胞 质增多、嗜碱性增强,，细胞核母细胞化， 荧光强度最强。,异型淋巴细胞异型淋巴细胞增高与 多种病毒感染及变态 反应有关,散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。,原因：疟原虫裂殖体破裂，疟色素从感染的血细胞中释放出来，继而被白细胞吞噬，吞噬 了疟色素的白细胞侧向散射光强度改变，显示在散点图靠近中性粒细胞一侧，但也被仪器 以Eo特有的红色标示出来。,张时民等.血细胞分析仪测定疟原虫感染患者特征二例.中华临床医师杂志， ,5（2）:633-635,疟原虫感染的散点图（一）,散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。疟原虫感,从仪器报警,EO,增高或无,EO,分类结果的,1 501,份标本中发现有,9,份疟 原虫标本，,6,份散点图表现为,EO,与,NEG,之间间距缩小,(,图,1),，,3,份报警白细胞散 点图异常,且散点图显示,EO,与,NEG,之间无间距,(,图,2),。,其他,1 492,份散点图基本正常。因为是真性,EO,增多，表现在散点图上是,EO,数量增加，为正常分类散点图,(,图,3),。,戴燕，万海英等. XE-2100血细胞分析仪嗜酸粒细胞异常散点图报警筛选疟原虫感染的研究.中华检验医学杂志， ,31,（7）:763-766,疟原虫感染的散点图（二）,从仪器报警EO增高或无EO分类结果的1 501份标本中发现有,谢谢,谢谢,教培用血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义课件,