血浆治疗若干问题探讨

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,血浆治疗若干问题探讨,输血医学,输血是医学发展史上的重要里程碑,输血是最早获得成功的组织移植,输血是现代医学的重要支持手段,输血是未来医学的重要载体,9/28/2024,2,临床输血相关法规,中华人民共和国献血法（1998）,第十三条：医疗机构对临床用血必须进行核查。；第十六条：医疗机构临床用血应当制定用血计划，,遵循合理科学原则,。,国家鼓励临床用血新技术的研究和推广,医疗机构临床用血管理办法（1999）,第五条：医疗机构应当设立临床输血管理委员会，负责临床用血的规范管理和技术指导。；第六条：二级以上医院设立输血科（血库），负责计划、储血、制度执行情况检查、参与临床诊断、治疗与科研,临床输血技术规范（2000）,总则；输血申请；受血者血样采集与送检；交叉配血；血液入库、核对、储存；,发血；输血；附件19,9/28/2024,3,合理科学输血,现代输血理念,各类血液成分的适应症、指征和输注量,相关病例的输血治疗,输血不良反应的预防、诊断、处理,9/28/2024,4,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念,血浆生理概要及其临床治疗适应症,血浆置换疗法,被动免疫血浆治疗,血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,9/28/2024,5,现代输血理念,成分输血,科学、,合理用血,9/28/2024,6,成份输血定义,将全血分离，制备成各种高浓度、高纯度的血液成份制品。根据病情需要有针对性地输注不同的血液成份，称为成份输血。,9/28/2024,7,成份输血的优越性,高效,安全,易于保存,节约血液资源,9/28/2024,8,临床合理用血原则,“不可替代时选择”原则,满足生理需要原则,风险规避原则,9/28/2024,9,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念,血浆生理概要及其临床治疗适应症,血浆置换疗法,被动免疫血浆治疗,血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,9/28/2024,10,血浆生理概要,9/28/2024,11,血,液,血,浆,血,细,胞,红细胞,白细胞,血小板:,水：,9092,血浆蛋白,溶质,：,810,小分子物质,营养物质,激素,代谢产物,有机物,无机盐（电解质）,白蛋白,球蛋白,纤维蛋白原,9/28/2024,12,血浆的构成,体重的 4% （ 40 45 ml / kg 体重）,组成,水 90 %,溶质 10 %,蛋白质 7 %,无机盐 0.9 %,其它有机物,9/28/2024,13,血浆蛋白的主要功能：,1.形成血浆的胶体渗透压,2.运输功能,3.参与凝血和抗凝血功能,4.防御功能,5.营养、缓冲功能,9/28/2024,14,血浆蛋白 白蛋白,白蛋白,MW 67000,血浆中含量最多的蛋白,4048g/L,血浆总白蛋白,约,120 g,占人体总白蛋白的,40 %,功能,维持血浆胶体渗透压,运输,脂肪酸 胆红质等,肝脏合成,正常成人肝脏每日约合成,12g,白蛋白，相当,300ml,血浆所含的白蛋白,半寿期,约,20,天,9/28/2024,15,免疫球蛋白和补体,免疫球蛋白,免疫球蛋白是一组主要由脾、淋巴结和其他淋巴组织内的桨细胞所产生具有抗体活性的蛋白质,组成 IgG 、IgM、IgA、IgE、IgD,生物学效应：与抗原特异性结合；激活补体；与细胞表面Fc受体结合；参与免疫调节,补体,存在于血液和组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质,组成由30余种可溶性蛋白、膜结合性蛋白和补体受体组成的多分子系统(complement system)。根据补体系统各成分的生物学功能，可将其分为补体固有成分、补体调控成分和补体受体（CR）,生物学效应有：增强吞噬细胞的趋化性；增加血管的通透性；参与细胞溶解；参与免疫调节等,9/28/2024,16,凝血、抗凝血和纤维蛋白溶解系统,血液凝固：血液由流动的液体状态变成不流动的凝胶状血块的过程,抗凝血：阻碍血液凝固的机制,纤维蛋白溶解：纤维蛋白或纤维蛋白原被水解的过程,9/28/2024,17,凝血因子,血液及其它组织中直接参与凝血的物质称为凝血因子。根据发现的先后顺序，以罗马数字编号,9/28/2024,18,血液凝固的机理,9/28/2024,19,凝血过程 (瀑布学说),凝血过程大体上分为三个基本步骤：,凝血酶原激活物形成, 凝血酶原,凝血酶, 纤维蛋白原,纤维蛋白,9/28/2024,20,抗凝血机制,体液抗凝系统中的主要抗凝物质：,抗凝血酶, (AT ),肝素,蛋白质 C (PC),体外的主要抗凝物质：,降低血钙浓度而妨碍血液凝固，如：,草酸盐,柠檬酸盐,9/28/2024,21,纤维蛋白溶解机制,概念:,纤维蛋白或纤维蛋白原被纤维蛋白溶解酶,（简称纤溶酶）水解的过程，,简称纤溶。,意义:,使血液经常保持液态,血流通畅,防血栓形成。,纤溶的基本过程包括：,纤溶酶原的激活,纤维蛋白的降解，,9/28/2024,22,血浆无机物,阳离子,Na,+,主要,140 mM,K,+,4 mM,Ca,+,1 mM,Mg,+,2 mM,阴离子,Cl,主要 103 mM,HCO,3,-,28 mM,9/28/2024,23,血浆碳水化合物,种类,葡萄糖 70 105 mg %,其它单糖,果糖,半乳糖,甘露糖,多糖 量少,糖蛋白,9/28/2024,24,血浆脂质,含量,5 mg / ml,主要形式 脂蛋白,9/28/2024,25,血浆制品,常规血浆制品,新鲜冰冻血浆,(FFP),冰冻血浆,(FP),冷沉淀,9/28/2024,26,常规血浆输注适应症,获得性多凝血因子缺乏,先天性凝血因子缺乏？,血浆置换,被动免疫治疗,注：,1,、血浆不是维持血液胶渗透压、扩充血容量的最佳途径,2,、纠正低蛋白血症的首选制剂是白蛋白,9/28/2024,27,血浆不宜单纯用于扩充血容量,扩容效果不理想,血浆增量效力仅76% ，血液动力学改善效果 并不理想(Ahnefeld 1965),具有输血相关风险,输血相关传染性风险：,HCV,HBV,HIV,免疫抑制,输血相关急性肺损伤,9/28/2024,28,临床常用的胶体溶液,羟乙基淀粉,白蛋白,明胶制剂,右旋糖酐,9/28/2024,29,不同液体容量效力的比较,9/28/2024,30,若干临床输血特例讨论,急性大量出血,择期手术,恶性肿瘤,播散性血管内凝血,.,9/28/2024,31,大量失血的输血抢救（大量输血）,概念,24小时内输入血液全身血量,1 小时内输入血液1/2全身血量,适应症,大血管创伤性断裂,外科手术及手术意外,产科意外,9/28/2024,32,大量失血的治疗的程序,首要目标：维持循环容量,第二目标：保持血氧携带能力,第三目标：恢复凝血和内环境稳定,美国麻醉学会（ASA）1997,9/28/2024,33,大量输血,紧急大量输血的配血,5分钟？,15分钟？,3045分钟？,WHO临床用血：紧急情况下输注“O、Rh-”,临床输血规范： Rh（D）阴性和其他稀有血型患者，,应采用自身输血、同型输血或配合型输血,UMSTC:5649例创伤,8%输RBC,其中11%(50例)未经交叉配型直接输入“O”型RBC,(,Hess JR et al,Transfusion,2006,46(5),),9/28/2024,34,大 量 输 血,大量输血的血液选择,全血？,组织间液缺失,柠檬酸中毒,大量、多人份异体血浆溶血可能、急性肺损伤,PT-GVHD,红细胞悬液,必要时输注血小板、FFP、冷沉淀,9/28/2024,35,维持凝血所需的凝血因子水平,凝血因子,最低水平（正常）,I,30-50,II,20-40,V,15-25,VII,5-10,VIII,25-30,IX,15-25,X,10-20,XI,10,XIII,2-3,9/28/2024,36,急性失血对血小板的影响,（可耐受230%失血）,血小板计数,150,100,50,失血量/血容量50% 100 150 200 230%,9/28/2024,37,各凝血因子可耐受的失血量,血小板 230% 血容量,纤维蛋白元 140%,凝血酶原 201%,V 因子 229%,VIII因子 236%,9/28/2024,38,失血后容量替代治疗步骤,Target controlled replacement,Volume loss (%),Colloids + crystalloids,100,90,80,70,60,50,40,30,20,10,+ 红细胞,+新鲜冰冻血浆,+ 血小板,0,晶+胶,9/28/2024,39,血浆输注剂量,补充凝血因子15,9/28/2024,40,冷沉淀输注,冷沉淀的定义,冷沉淀的组份及含量,冷沉淀输注适应症,冷沉淀输注剂量,9/28/2024,41,冷沉淀的定义,把从400ml全血中获得的FFP置于04条件下融化，收集得到的冷不融部分称为冷沉淀。,9/28/2024,42,冷沉淀主要组份及含量,因子,VIII,促凝活性,(F VIII,：,C) 80IU,瑞斯托霉素因子,(VWF)60IU,纤维蛋白原,(F1) 200,300mg,纤维蛋白稳定因子,(FXIII)80IU,纤维结合蛋白,(Fn)60mg,9/28/2024,43,冷沉淀输注的适应症,先天性凝血因子缺乏,甲型血友病,血管性假血友病,(VW,病,),获得性凝血因子缺乏,DIC,严重肝病,尿毒症,等,.?,纤维结合蛋白水平降低,恶性肿瘤,重症感染,DIC,严重创伤、烧伤,大手术,等,9/28/2024,44,冷沉淀输注剂量,血友病及其它凝血因子缺乏患者,（袋/Kg.BW),纤维蛋白原 4080,（袋/Kg.BW),Fn水平低下患者,大剂量法：15mg/Kg . BW,（袋/Kg.BW),维持法：6-7mg/Kg . BW,9/28/2024,45,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念,血浆生理概要及其临床治疗适应症,血浆置换疗法,被动免疫血浆治疗,血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,9/28/2024,46,血浆置换术,适应症,自身免疫性疾病,(重症肌无力、肺肾综合征、SLE、,急进性肾炎等),药物、毒物、毒素中毒,(洋地黄、有机磷等、内毒素),急性肝、肾功能衰竭,9/28/2024,47,血浆置换术,机理:,移除血浆中的致病因子,(抗体、毒素、滞留代谢产物等),导入缺乏的血浆成分,凝血因子,体液免疫因子等,9/28/2024,48,血浆置换术,方法：,人工单采术,机械单采术,9/28/2024,49,血浆置换术,血浆置换量：,置换全身血浆清除率60%,置换全身血浆2倍清除率85%,全身血浆(ml)=体重(kg)70(1-Hct),常规：,13L/次、间隔12日一次,35次为一疗程,9/28/2024,50,血浆置换术,置换液：,新鲜冰冻血浆,晶体溶液,白蛋白溶液,血浆蛋白混合液,9/28/2024,51,血浆置换术,不良反应及其对策：,柠檬酸盐反应 适当补充钙离子,凝血障碍FFP、凝血因子,病毒感染病毒灭活血浆,栓塞脉管炎等严谨操作,9/28/2024,52,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念,血浆生理概要及其临床治疗适应症,血浆置换疗法,被动免疫血浆治疗,血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,9/28/2024,53,被动免疫血清（浆）治疗,1890年，德国病理学家Won Behring发现感染病菌的人恢复后血清中会产生一种抗菌成份，给病人注射恢复期病人的血清可以治疗同一种感染性疾病，由此开创了用“康复期血清（浆）”实施被动免疫治疗的先河。,9/28/2024,54,被动免疫治疗,是指给机体输入含有特异性抗体的免疫,血清、血浆或免疫球蛋白，使机体被动获得特异性免疫力，达到紧急预防或治疗某些感染性疾病的目的治疗方式,9/28/2024,55,主动免疫与人工被动免疫,区别要点,人工主动免疫,人工被动免疫,免疫物质,抗原,抗体或细胞因子等,免疫出现时间,慢，2-4周,快，立即,免疫维持时间,长，数月-数年,短，2-3周,主要用途,预防,治疗或紧急预防,9/28/2024,56,SARS康复期血浆治疗,姜素椿,，传染病专家。 曾任中国人民解放军302医院传染科主任、副院长、专家组成员。在中枢神经系统、消化系统、呼吸系统及出血热等传染病的诊治方面具有很高的造诣及丰富的经验。 2003年，姜素椿在抢救一位SARS患者时不幸感染SARS，他在自己身上大胆试验，注射了SARS康复者的血清，使病情发生奇迹般的变化，再配合其他药物治疗后，仅23天就康复出院，开创了全国首例用血清来治愈SARS的临床实验，为科学治疗SARS留下了宝贵的临床医学资料和经验。在抗击SARS斗争中，姜素椿被中国人民解放军四总部评为“全军非典型肺炎防治先进个人”，被中组部评为“全国防治非典工作优秀共产党员”,被中国科协授予“防治非典先进科技工作者”称号。,商务印书馆大家专栏,9/28/2024,57,香港SARS康复期血浆治疗,曾在工作中感染“非典”并已痊愈的中大内科及药物治疗学系副教授郑彦铭，至今已捐出毫升血清救助患者。月初，郑彦铭在威尔斯医院工作时受到感染，他自愿成为中大血清治疗法的试验者。月底，郑彦铭康复出院后很快返回工作岗位，积极参与研究血清疗法。,新华网,9/28/2024,58,香港中文大学SARS康复期血浆治疗,康复期血浆组 类固醇激素组,患者数 20 20,痊愈 20 17,死亡 0 3,死亡率 0% 15%,人民网 陈少波,9/28/2024,59,康复期血浆治愈H5N1型禽流感一例,患者概况：男性，,31,岁，既往史无特殊；于,2006,年,6,月,7,日因高热,4,天（体温,39.9,），伴寒战，咳嗽，咳痰收治入院。胸部,X,线摄片示左肺下部有大片模糊影。经,RT-PCR,检测和气管抽吸物病毒分析确定为,A,型（,H5N1,）,禽流感病毒。,入院第,5,天予奥司他韦,150 mg bid,治疗,2,天，患者右肺实变影增重而左肺仅有轻度好转。第一次病毒定量测定为患者开始奥司他韦治疗后,26,小时，,H5N1,病毒呈高水平复制（,1.31105,拷贝,/ml,）,状态，次日，在奥司他韦治疗中，病毒复制水平仍呈上升趋势（,1.68105,拷贝,/ml,）。,钟南山等,N,Engl,J Med 2007, 357: 1450,9/28/2024,60,康复期血浆治愈H5N1型禽流感一例,入院第八天行,H5N1,型禽流感康复期血浆治疗：捐献者为,2006,年,2,月罹患,H5N1,型禽流感经治疗后康复的患者。共捐献,600 ml,康复期血浆，血浆,H5N1,病毒中和抗体滴度,1:80,。,600ml,康复期血浆分,3,次输注，,200mi/,次；第一次输注与第二次输注间隔,8hr,，,第二次输注与第三次输注间隔,24hr,；,第一次输入康复期血浆后,8hr,，,患者的病毒复制水平从,1.68105,拷贝,/ml,降至,1.42104,拷贝,/ml,，,第一次输注康复期血浆后,32hr,（,距第二次输注,24hr,）、,病毒检测阴性。患者最终得以康复。,H5N1,病毒中和抗体测定：输注康复期血浆前,H5N1,病毒中和抗体阴性，输注血浆后抗体水平逐步增高，至第一次康复期血浆输注,5,天后，抗体滴度维持在,1:40,1:80,之间。,钟南山等,N,Engl,J Med 2007, 357: 1450,9/28/2024,61,康复期血浆治疗甲型H1N1流感的预期,甲型H1N1流感诊疗方案（2009年第三版）,颁布,对于重症和危重病例，也可以考虑使用甲型,H1N1,流感近期康复者恢复期血浆或疫苗接种者免疫血浆进行治疗。对发病,1,周内的重症和危重病例，在保证医疗安全的前提下，宜早期使用。,推荐用法：一般成人,100-200ml,，,儿童,50ml,（,或者根据血浆特异性抗体滴度调整用量），静脉输入。必要时可重复使用。使用过程中，注意过敏反应。,9/28/2024,62,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念,血浆生理概要及其临床治疗适应症,血浆置换疗法,被动免疫血浆治疗,血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,9/28/2024,63,近代输血医学的关注焦点,不断提高输血的疗效,成分输血,科学合理用血,血液成分的体外诱导、修饰,不断降低输血风险,技术层面,发展经血传播病原体及免疫血液学检测技术,发展血液病原体灭活、白细胞滤除、,-,射线照射等血液处理技术,管理层面,实施无偿献血，根除利益驱动性供血,实施体系化质量管理，最大限度杜绝失误事件的发生,9/28/2024,64,输血风险,免疫反应,输血感染疾病,红,细,胞,白,细,胞,血,小,板,血,浆,急,性,溶,血,迟,发,性,溶,血,发免,G,热疫 V,抑 H,制 D,血输,小血,板后,输紫,注癜,无,效,急 过,性 敏,肺 反,损 应,伤,乙 丙 爱 人 C 其,型 型 滋 类 M 它,肝 肝 病 T V 病,炎 炎 细 感 原,胞 染 体,白,血,病,9/28/2024,65,输血相关病毒感染风险,病毒标记物检测技术的局限性,窗口期,WP,试剂敏感性,检测病毒种类的局限性,检测：,HBV HCV HIV,未检测 ：,HTLV CMV EBV B19,新病毒不断被发现,SARS? WNV,仅2003 年，美国CDC 报告WNV感染97862例,导致264人死亡;其中61例可能与输血有关,21例被确认为输血感染，(其中6人死亡),。,9/28/2024,66,受,血,者,感,染,百,分,比,%,9/28/2024,67,病毒性输血传染病发生机率,美国,HIV 1：676,000 HCV 1 : 103000,HTLV 1: 641,000 HBV 1: 63,000,输血相关病毒感染机率 1 : 34,000,(其中1/1000死亡),Schreiber,GB,et al, NEJM,334:1685,1998,9/28/2024,68,美国生活风险(年死亡机率),主动生活风险,吸烟 1:200,驾驶汽车 1:10,000,摩托车比赛 1:50,赛马 1:740,怀孕 1:4,350,被动生活风险,交通意外 1:20,000,地震 1:588,000,流行感冒 1:5000,PTCA 1:200,术后感染 1:1,200,输血感染 1:34,000,9/28/2024,69,输血传播病毒性疾病,全球目前受,感染人数: 约,5.8,亿,HBV,3.71,亿,1.2亿(32%),HCV,1.77,亿,3800万(21%),HIV,3300,万,100万(3%),因不安全输血引起:,HBV,8001600,万,HCV,230470,万,HIV 1,5,0,30,0,万,健康报, CDC 2003,WHO / GDBS 1998-99,9/28/2024,70,Four,Protecting Walls,donor criteria,testing,Inactivation,removal,Modified,from: N Dhingra, 17-18 June 2003,Rational Use,9/28/2024,71,病毒性输血风险的控制对策,现行对策：,推行无偿献血,严格筛查血液,提倡科学用血,消除残留风险的根本对策：,血液制品病毒灭活,开发血液代用品,9/28/2024,72,严格筛查血液-NAT 检测的优势,直接检测病毒的核酸,缩短病毒检测的“窗口期”,敏感性高,HIV markers during early infection,HIV RNA (plasma),HIV Antibody,11,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,HIV p24 Ag,16,22,5 Days,6 Days,Theoretical Infectivity Day 0HIV RNADay 11,HIV p24 AgDay 16,HIV AntibodyDay 22,COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT 2002,9/28/2024,74,HBV markers during early infection,InfectionDay 0,HBV DNADay 32,HBsAgDay 59; disappears Day 120,HBV DNA (PCR),Anti-HBc,Infection,120,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,110,HBsAg,ALT,59,COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT 2002,9/28/2024,75,HCV markers during early infection,HCV RNA,Anti-HCV,12,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,InfectionDay 0,HCV RNADay 12,HCV AntibodyDay 70,COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT 2002,9/28/2024,76,NAT 缩短病毒检测窗口期,HIV: 22 to 11 days,HBV: 59 to 32 days,HCV: 70 to 12 days,Residual risk, all donors (US),Infection,Residual risk from:,Repeat donors,All donors,HBV,1:205,000,1:144,000,HCV (without NAT),1:276,000,1:199,000,HCV (with NAT),1:1,935,000,1:1,390,000,HIV (without NAT),1:1,468,000,1:1,048,000,HIV (with NAT),1:2,135,000,1;1,525,000,HTLV,1:2,993,000,1:2,230,000,Dodd RY, Notari EP 4th, Stramer SL.,Transfusion,. 2002 Aug;42(8):975,9/28/2024,如何杜绝已检测病毒的残留感染风险？,如何杜绝CMV EBV B19 WNV等未检测病毒经,输血传播的风险？,如何防范未知病毒经输血传播的风险,？,血液成分病毒灭活,9/28/2024,79,病毒性输血风险的控制对策,现行对策：,推行无偿献血,严格筛选血液,提倡科学用血,消除残留风险的根本对策：,血液制品病毒灭活,开发血液代用品,9/28/2024,80,血液成分病毒灭活方法,血浆病毒灭活,湿热法（巴士德法）,有机溶剂,/,洗涤剂,(Solvents/Detergents,）,亚甲兰光化学法（,MB-P,）,S-59,光化学法,核黄素光化学法,红细胞病毒灭活,血卟啉、酞菁化合物、部化菁,酚噻嗪类化合物（,MB,、,DMMB,）,+,可见光照射,FRALE S303+PH,调节,PEN110,血小板病毒灭活,硫堇,+,可见光照射（,Thionine,-I,）,8-,甲氧补骨脂,+UVA,（,8-MOP-UVA,）,S-59+UVA,核黄素,9/28/2024,81,血液病毒灭活方法评价原则,能有效灭活病毒,指示病毒：,HIV,、,DHBV,、,Sindbis,、,VSV,、,脊髓灰质炎病毒,方法：细胞病变法、动物感染、,PCR,对血液成分活性及功能无明显不良影响,血浆：凝血因子、血浆蛋白回收率、蛋白质免疫原性,.,红细胞：溶血、,K,+,逸出、,ATP,、,2,3-DPG,、,形态积分、体内回收率,血小板：,HSR,、,形态积分、聚集率、,CCI.,对人体安全,急性毒性、慢性毒性、,基因毒性,适用于单袋血液成分处理,9/28/2024,82,近年关注的血液病毒灭活方法,亚甲兰光化学法（,MB-P,）,S-59,光化学法,核黄素光化学法,FRALE S303+PH,调节,PEN110,9/28/2024,83,亚甲兰光化学病毒灭活,机理,破坏病毒核酸,破坏病毒包膜,9/28/2024,84,MB-P病毒灭活机理,LIGHT,MB,MB,9/28/2024,85,亚甲兰的安全性,亚甲兰是国家药典收录的静脉输注药物,1000ml,血浆含,380m,g,亚甲兰，仅是临床常用成人输注量的,1/600,适应症,MB,常用剂量 给药途径,高铁血红蛋白症,50250mg/50kg,静脉,甲状腺染色,50250mg/50kg,静脉,血浆病毒灭活,静脉,9/28/2024,86,MB-P血浆病毒灭活的效果,照射时间,0,5,10,30,60,0.00,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00,8.00,9.00,logTCID50,5,10,60,MB+荧光照射不同时间含VSV，Sindbis病毒血浆,logTCID50变化,SINDBIS,VSV,9/28/2024,87,MB-P对HCV-RNA NS-5的作用,9/28/2024,88,MB灭活后病毒残留量(%),100,80,60,40,20,0,灭活时间(分钟),未处理 5 30,标本病毒灭活前后血浆HCV-RNA浓度,病毒灭活动力学曲线,9/28/2024,89,病毒-HCV的FQ-PCR,PCR Amp/Cycle Chart,9/28/2024,90,MB-P对DHBV-DNA病毒的灭活效果,方法:,受试样品接种雏鸭，观察感染情况,对照样品:含不同滴度DHBV的人血浆,实验样品:经亚甲蓝光化学处理的含不同滴度DHBV的人血浆,结果:,未经MB-P处理的含不同滴度DHBV的人血浆均感染雏鸭,经MB-P处理，可使血浆中DHBV的TcID,50,下降10,6,- 10,7,.,9/28/2024,91,MB-P对,CMV的灭活效果,未灭活CMV感染人胚肺细胞 灭活CMV未感染人胚肺细胞,9/28/2024,92,MB-P对血浆凝血因子的影响,0,5,10,15,30,Fir回收率,:C回收率,:C回收率,70,75,80,85,90,95,100,(%),照射时间,MB+荧光照射对部分凝血因子的影响,9/28/2024,93,MB-P处理对血浆蛋白免疫原性的影响,9/28/2024,94,MB-P 血浆临床输注（1000,000单位）,无不良输注反应,治疗效果良好,9/28/2024,95,MB-P血浆病毒灭活技术提要,亚甲蓝添加精度,光照剂量范围,30,000,38,000lx,MB,滤除材料疏水性材质和碳纤维吸附材质,（保证血浆有效成分回收率）,MB,滤除率 ,85%,灭菌方法 高压蒸汽灭菌（无毒）,病毒灭活有效性验证,9/28/2024,96,DNA or RNAof pathogen,Amotosalen,(S-59),Docking,Permanent Crosslinking,UVA Illumination,S-59光化学病原体灭活机理,9/28/2024,97,S-59光化学病原体灭活技术,特点,适用于血小板和血浆病毒灭活、不适用于红细胞病毒灭活,尚能同时灭活多种细菌及T淋巴细胞,9/28/2024,98,S-59光化学病原体灭活技术的进展,建立了,S-59+UVA,血小板和血浆病毒灭活方法,实验室及动物模型验证了病毒灭活的有效性,证实对血小板和血浆的体外质量指标及动物体内回收率无明显不良影响,期临床试验结果表明经,S-59,光化学处理的血小板和血浆具有良好的疗效和安全性,9/28/2024,99,核黄素光化学病毒灭活,机理,多环平面结构的芳香族化合物,易穿透细胞膜和病毒包膜，插入病毒的核酸,在接受了UVA或可见光提供的能量后,发生电子转移,使鸟嘌呤碱基氧化并形成共价加成化合物，阻止核酸的转录、复制,进一步的反应可使核酸骨架链断裂,使病毒、细菌、,T淋巴细胞等病原体失活,9/28/2024,100,核黄素光化学病毒灭活机理示意图,Illumination reaction breaks DNA,Riboflavin intercalates into DNA,Normal pathogen DNA,9/28/2024,101,核黄素光化学病毒灭活,特点,能灭活脂质包膜病毒和非脂质包膜病毒及多种细菌,无残留生物毒性,期望适用于血小板、血浆及红细胞病毒灭活,9/28/2024,102,核黄素光化学病毒灭活进展概要,实验提示该方法病毒灭活效果良好，对血小板和红细胞的功能、活力、形态及血浆有效组分无明显不良影响,能有效灭活,T,淋巴细胞，预期可用于预防,PT-GVHD,DVHD,核黄素光化学血浆及血小板病原体灭活已获准在欧洲使用 （,2008,、,10 CE Mark,）,核黄素光化学红细胞原体灭活的研究尚处于实验室阶段,9/28/2024,103,血液病原体灭活研究的发展取向,病毒灭活 病原体灭活,以病毒灭活为焦点、兼顾细菌、寄生虫、,T,细胞等病原体的 灭活,血液成分病原体灭活 全血病原体灭活,能有效灭活病原体；对红细胞、血小板、血浆均无 明显损伤,有望最终克服输血感染性疾病病,9/28/2024,104,9/28/2024,105,9/28/2024,106,展望,血浆病原体灭活,建立了成熟的方法，经亚甲蓝光化学病毒灭活处理的血浆已临床应用逾十年，效果良好,血细胞病原体灭活,两项血小板病原体灭活技术已在欧洲获准进入临床,红细胞病原体灭活的研究尚有待突破，,全血病原体灭活已开始初期研究,有望最终克服输血感染性疾病病,9/28/2024,107,SHOT输血不良反应报告,9/28/2024,108,输 血 相 关 急 性 肺 损 伤,症状及体征,输血后,14,小时内出现急进性呼吸衰竭伴发热,呼吸浅快、短促、呼吸功增加及紫绀等；呼吸音低钝；,胸片示肺部弥散性阴影，心脏不扩大，血管无出血,发病机理,输入血浆中含有抗白细胞抗体,受血者体内抗异体白细胞抗体,肺血管缺血后再灌注,激活的白细胞黏附于肺毛细血管内皮、释放炎性介质 吸引粒细胞,肺循环粒细胞不断聚集 释放,ROS,、,蛋白水解酶、血管活性物质等,血管收缩、末梢血管堵塞、血管壁通透性增加 肺水肿、肺组织损伤,9/28/2024,109,TRALI-胸片,9/28/2024,110,输 血 相 关 急 性 肺 损 伤,临床表现,病例数,%,须吸氧支持,36 100,气管切开-呼吸机,26 72,肺水肿,快速消退,(, 7days) 6 17,死亡,2 6,Popovsly &Moor, Transfusion: 25, 573 (1985),9/28/2024,111,输 血 相 关 肺 损 伤,发病几率,ND,死亡率,5%,25%,。,美国：,死亡率,20.1%,，输血相关死亡原因中列第三位，,占输血相关总死亡报告病例总数的,9%,（,FDA,）,英国：,死亡率,25%(SHOT),，,占严重输血不良反应报告总数,的第四位,(6.7%),和死因的第二位，,9/28/2024,112,FDA:,严重输血反应的平均死亡率,(2000 2004),TRALI,20.1%,ABO/Hemolytic Transfusion Reactions,13.9%,Bacterial Contamination,11.8%,L Holness: FDA, 2004 TRALI Consensus Conference,9/28/2024,113,SARS死亡率,全球SARS累计发病、死亡数,（ WHO网站2004年4月21),发病数 死亡数 死亡率,8096 774 9.56%,9/28/2024,114,输血相关急性肺损伤的预防,输注不含抗白细胞抗体的血液,合理把握血浆治疗适应症和指征,输注滤除白细胞的血液,体外循环中加设白细胞过滤装置,9/28/2024,115,建议,医学科学尤其是临床医学、免疫学和基因技术等学科的快速发展，势必对输血医学提出新的要求并推动其发展，输血医学的发展又有助于促进其它临床学科的发展，输血医学在这种因果关系的推动下仍将不断出现新的观念、方法和制品，建议临床医生适时更新输血知识。,9/28/2024,116,谢 谢 ！,9/28/2024,117,谢谢！,