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,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第四章 蛋白质的共价构造,一、蛋白质通论,1. 蛋白质对生命的意义,催化功能,调节和调控功能,运动、支持和构造功能,转运功能,贮存功能,保护功能,2. 蛋白质的组成和分类,元素组成上的特点：,含N量较高，且恒定为16%左右：,蛋白质含量%=含氮量/16%=含氮量6.25,(凯氏定氮法测蛋白质含量的根底),蛋白质的分类：,简单蛋白质 纤维状蛋白质,缀合蛋白质 球状蛋白质,膜蛋白质,3. 蛋白质构造的组织层次,一级构造 氨基酸的排列顺序,二级构造,三级构造 空间构造 (高级构造、构象,四级构造,蛋 白 质 的 结 构 层 次 及 相 互 关 系,二级构造是三级构造的组织层次,二、 肽,1. 肽键及其性质,多肽的方向及表示方法,肽键的构造特点：,1. 肽键具有局部双键的性质，所以不能自由旋转；,2. 组成肽键的4个原子和2个相邻的C在一个平面上称为酰胺平面或肽平面；,3. 除脯氨酸的-NH2参与形成的肽键外，其余的肽平面上，两个C都是处于更稳定的反式构象；,2 肽的理化性质,2.1 肽的两性解离,pK,1,=2.34,pK,-COOH,= 3.86,pK,-NH2,=10.79,Pk,2,=8.95,pI= (3.86+8.95)/2=6.4,2.2 肽的双缩脲反响,2.3 天然存在的活性多肽,三、蛋白质一级构造的测定,测定蛋白质的氨基酸顺序的意义：,是说明蛋白质生物学功能的根底；,是说明蛋白质空间构造的根底；,有助于提醒一级构造的变化与遗传疾病的关系；,4. 有助于指明蛋白质的进化史；,蛋白质,组 织,DNA和RNA,LiCl,2,DNA,RNA,PolyU亲和层析,mRNA,逆转录酶,cDNA,间接法：,直接法：,蛋白质样品(纯度97,蛋白质中多肽链的数目,1,非共价结合,变性剂,共价结合,氧化剂,复原剂,断开多肽链内的二硫键,1,水解后分析氨基酸的组成,确定N-末端和C-末端氨基酸种类,用多种方法裂解多肽链成小片段并测定其氨基酸序列,用重叠法重建完整多肽的氨基酸顺序，确定二硫键位置,一 N-末端分析,1. DNFB法、DNS法、PITC法,2. 氨肽酶法,氨肽酶是能够从N-末端逐个水解下氨基酸的酶。,二 C-末端的分析,1. 肼解法,2. 复原法,3. 羧肽酶法,羧肽酶A ：,能释放除Pro、Arg、Lys之外的所用C-末端氨基酸；,羧肽酶B：,只能释放Lys和Arg形成的C-末端；,
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