马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验一,马铃薯葡萄糖琼脂（,PDA,）培养基配制,1,一、食用菌菌种种类,人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。,1,）母种（一级菌种）：,用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种。,2,）原种（二级菌种）：,把母种扩大到木屑、棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。,3,）栽培种（三级菌种）,：由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为栽培种。,4,）菌种：,实质上就是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。,2,二、食用菌的制种程序,组织分离,接种母种（一级）,接种 原种（二级）,接种栽培种（三级）,种菇,孢子分离,经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。,一般,1,支试管菌种可繁殖,46,瓶原种，每瓶原种又可扩大繁殖,60100,瓶栽培种。,培养,培养,3,母 种,4,原种和栽培种,5,三、菌种生产常用的设备和用具,1,、接种设备, 接种室, 接种箱, 超净工作台,6,7,8,超净工作台,9,2,、灭菌设备,1,）手提式：,容量小，适于斜面试管及玻璃器皿等；,2,）立式,： 容量大，投资大；,3,）卧式,：容量大，投资大；,4,）家用,24,或,26 cm,压力锅：,母种、原种培养基 。,高压蒸气灭菌锅,优点：省时、省燃料、 效果好,2,）、,3,）一般在菌种场或研究所应用。,三、菌种生产常用的设备和用具,10,灭菌设备,高压蒸气灭菌锅,11,2,、灭菌设备,常压灭菌锅,目前农村生产栽培种的必备设备，实际上是一种大型蒸笼式煮灶。底部为铸铁大锅，上部为圆形木桶，桶内装数层供放培养基的格架。桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈，由于锅内温度最高是,100,，所以灭菌时间需维持,1012h,，才能达到灭菌效果。,三、菌种生产常用的设备和用具,12,培养室, 生化培养箱,3,、培养设备,三、菌种生产常用的设备和用具,13,4,、培养菌种的容器,母种,：试管，常用规格,20180200mm,，,18180mm,等。,原种、栽培种,菌种瓶：盐水瓶、罐头瓶,菌种袋,聚丙稀袋,聚乙稀袋,规格有：,12153035 cm,，,173545 cm,三、菌种生产常用的设备和用具,14,菌种瓶,15,5,、接种工具,移植菌种于培养基上的工具称接种工具，主要有以下几种：,接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等；,三、菌种生产常用的设备和用具,16, 70%,酒精：一般用于手、种菇表面消毒；,0.1%,升汞：常用于玻璃器皿、非金属器械及种菇表面消毒；,0.1%KMnO,4,：一般用于用具、器皿消毒；,6,、常用的消毒药品,三、菌种生产常用的设备和用具,17, 5%,石炭酸：喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等，也可用来苏尔代替；,2%,来苏尔、新洁尔灭：用法同上；,甲醛（福尔马林）：用于菇房和接种箱等空气消毒；,方法：关闭门窗消毒，自行气化；,用量：,10ml,甲醛,5g KMnO,4,立方米。,6,、常用的消毒药品,三、菌种生产常用的设备和用具,18,四、母种生产技术,食用菌母种培养基的种类繁多，由于不同营养类型的食用菌对营养物质的要求不同，所以，在培养不同食用菌母种时，应选择适宜该菌种的培养基。,母种培养基要求营养丰富、完全、氮源、维生素的比例应高。,现将食用菌常用的母种培养基列举如下 ：,19,（一）母种培养基,马铃薯葡萄糖琼脂培养基（,PDA,）,马铃薯,200g,、葡萄糖（或蔗糖）,20g,、琼脂,20g,、,H,2,O 1000 mL,、,pH 6.5,。,适用于一般食用菌母种分离与培养，但草菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。,四、母种生产技术,20,综合马铃薯培养基,马铃薯,200g,、葡萄糖（或蔗糖）,20g,、,KH,2,PO,4,2g,、,MgSO,4,0.5g,、维生素,B,1,10mg,、琼脂,20g,、,H,2,O 1000ml,、,pH,自然。,适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌种分离、保藏。,四、母种生产技术,21,胡萝卜葡萄糖琼脂培养基,胡萝卜,200g,、葡萄糖（或蔗糖）,1820g,、琼脂,20g,、,H,2,O 1000ml,、,pH,自然。,四、母种生产技术,22, PDA,培养基配制方法,马铃薯（去皮、去芽眼）切成片（玉米大小）称取,200g,1000mL H,2,O,煮沸,15-20min ,双层纱布过滤取滤液并补足,1000mL,琼脂熔化其它营养物质调节,pH,（用,HCl,或,NaOH,）分装试管塞上棉塞捆扎灭菌（高压蒸气灭菌,15-30min,）制成斜面检查灭菌效果（即,2830,培养,23d,）,23,（,3,） 作业,（,1,）每人制,5,支试管斜面。,（,2,）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？,（,3,）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？,（,4,）写出食用菌的制种程序。,（,5,）常用的消毒药品有哪些？,24,