色谱定性武汉大学

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,色谱定性分析,色谱的定性分析,（1）将已知物直接和未知物对照进行定性,（2）利用文献的保留数据进行定性,（3）利用经验规律定性,（4）与化学方法结合定性,（5）与其它仪器连用进行定性,2024/9/23,1,1,根据色谱保留值进行定性,1.1,与已知物对照定性,在一定操作条件下，各组分的保留时间是一定值。,2024/9/23,2,白酒中醇系物色谱示意图,若组分,i,的保留值与甲醇的保留值相同，即可判断组分,i,为甲醇。,2024/9/23,3,峰高加入法,将已知纯样加入待测组分后，再进行一次分析，然后与待测组分原来的色谱图进行比较，若前者的色谱峰增高，则可以认为加入的已知纯样与样品中的某一组分为同一化合物。,注意：当进样量很低时，如果,峰不重合，峰中出现转折，或者半峰宽变宽，,则可以肯定试样中,不含,与所加已知纯物质相同的化合物,。,白酒中醇系物色谱示意图,图中,组分,i+,甲醇,的峰较上,图组分,i,的峰有转折出现，则可判断组分,i,不是甲醇。,2024/9/23,4,1.2,其他定性方法,式中,A,1,和,C,1,是常数，,n,为分子中的碳原子数（,n3,）。,该式说明，如果知道某一同系物中两个或更多组分的调整保留值，则可根据上式推知同系物中其它组分的调整保留值,.,当没有待测组分的纯标准样时，可用文献值定性，或用气相色谱中的经验规律定性。,（,l,）碳数规律,-,在一定温度下，同系物的调整保留时间的对数与分子中碳，原子数成线性关系，即,2024/9/23,5,式中,A,2,和,C,2,均为常数，,T,b,为组分的沸点（,K,）。,由此可见，根据同族同数碳链异构体中几个已知组分的调整保留时间的对数值，可求得同族中具有相同碳数的其他异构体的调整保留时间。,（,2,）沸点规律,同族具有相同碳数碳链的异构体化合物，其调整保留时间的对数和它们的沸点呈线性关系，即,2024/9/23,6,(3).,根据保留指数定性,保留指数又称,Kovasts,指数，是一种较其他保留数据都好的定性参数，可根据所用固定相和柱温直接与文献值对照，而不需标准样品。,其它物质的保留指数（,I,X）,是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有,Z,和,Z,1,个碳原子。被测物质,X,的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示,：,将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。,2024/9/23,7,保留指数计算方法,2024/9/23,8,解,:,已知,n=7,例图,19-15,为乙酸正丁酯在阿皮松,L,柱上的流出曲线（柱温,100,）。由图中测得调整保留距离为：乙酸正丁酯,310,0mm,，正庆烷,174,Omm,，正辛烷,373,4mm,，求乙酸正丁酯的保留指数。,即乙酸正丁酯的保留指数为,775,6,。在与文献值对照时，一定要重视文献值的实验条件，如固定液、柱温等。而且要用几个已知组分进行验证。,2024/9/23,9,样品中的某些化合物与一些特征试剂反应，生成相应的衍生物。将反应前后的色谱图进行比较而定性。,(4)与化学方法结合定性,2024/9/23,10,色谱,-,结构分析仪器联用,小型化的台式色质谱联用仪（,GC-MS；LC-MS）,色谱-红外光谱仪联用仪；组分的结构鉴定,Sample,Sample,5890,1.0,DEG/MIN,HEWLETT,PACKARD,HEWLETT,PACKARD,5972,A,Mass,Selective,Detector,D,C,B,A,A,B,C,D,Gas Chromatograph (GC),Mass Spectrometer (MS),Separation,Identification,B,A,C,D,2024/9/23,11,气相色谱与质谱（,GC,MS,）联用、气相色谱与,Fourier,红外光谱,(GC,FTIR,）联用、气相色谱与原子发射光谱（,GC,AES,）联用等。,气相色谱/质谱联用,2024/9/23,12,2024/9/23,13,气相色谱/傅立叶红外光谱仪联用,2024/9/23,14,色谱定量分析,色谱定量分析是根据检测器对溶质产生的响应信号与溶质的量成正比的原理，通过色谱图上的面积或峰高，计算样品中溶质的含量。,峰面积的测量,（1）峰高,（,h,）,乘半峰宽,（,Y,1/2）,法：,近似将色谱峰当作等腰三角形,A,= 1.064,h,Y,1/2,（2）峰高乘平均峰宽法：,当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积：,A,=,h,（,Y,0.15,+,Y,0.85,）/ 2,2024/9/23,15,（3）峰高乘保留时间法：,在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积：,A,=,hbt,R,（4）自动积分和微机处理法,2024/9/23,16,定量方法,1,标准校正法,(,外标法,)-,标准曲线法,试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即：,m,i =,fi,A,i,比例系数,f,i -,单位面积对应的物质量,f,i =,m,i /,A,i,定量校正因子与检测器响应值成倒数关系：,f,i = 1 /,S,i,2024/9/23,17,以标准样品的色谱峰面积作图，得到一条标准曲线，再在标准曲线上根据待测样品的峰面积查出待测组分的浓度。,标准工作曲线图,特点：,外标法准确性较高，,操作条件变化对结果准确性影响较大。,对进样量的准确性控制要求较高，适用于大批量试样的快速分析。,2024/9/23,18,2,内标法,选择一个内标物质，以固定的浓度加入标准溶液和样品溶液中，以抵消实验条件和进样量变化带来的误差。,试样配制：,准确称取一定量的试样,W,，,加入一定量内标物,m,S,计算式：,2024/9/23,19,相对校正因子,f,i,：,即组分的绝对校正因子与标准物质的绝对校正因子之比。,2024/9/23,20,内标法特点,(,a),内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不大。,(,b),每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。,(,c),若将内标法中的试样取样量和内标物加入量固定，则：,内标法的缺点：在试样中增加了一个内标物，这常常给分离带来一定的困难。,2024/9/23,21,3,峰面积归一化法,特点及要求：,归一化法简便、准确；进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大；,仅适用于试样中所有组分全出峰的情况,。,适合于对多组分试样中各组分含量的分析,。,缺点：经过色谱分离后，样品中所有的组分都要能产生可测量的峰,2024/9/23,22,各种定量方法的比较,2024/9/23,23,